JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 3:22 分 • July 8th, 2025
蓋骨を露出させた状態で定位固定フレームに固定された麻酔をかけたマウスを取ります。
頭蓋骨には、埋め込まれた地面、基準、固定ネジ、および脳を露出させる開頭術が特徴です。
挿入ツールに固定され、ホルダーに取り付けられたシリコンプローブを取ります。
このプローブは、直線的に配置された電極を備えたシャンクを備えています。
プローブを目的の深さより少し上の脳に挿入し、歯科用セメントで固定ネジに固定します。
次に、さらに下げて目標の深さに到達します。
挿入ツールを外し、次にコネクタボードを外して頭蓋骨に固定します。
安定した電気接続のために、コネクタボードのアース線と基準線を頭蓋骨の対応する線に接続します。
アセンブリを保護ケーシングで覆います。
マウスを回復させて記録を開始します。
電極は、局所電界電位と呼ばれる移植部位のニューロン活動を細胞外で記録します。
電極挿入ツールを定位固定装置ホルダーに取り付け、プローブをブレグマにゼロにします。開頭術の上の定位座標までプローブを動かし、ゆっくりと脳表面に侵入します。プローブシャフトが曲がらないようにし、血管から移植されないようにしてください。次に、プローブを希望の深さより約200マイクロメートル上までゆっくりと下げます。次に、保護のために開頭手術とシリコンプローブのシャンクを滅菌ワセリンで覆います。
続いて、歯科用セメントを塗布して、プローブのベースを頭蓋骨の固定ネジに固定します。セメント塗布直後に、プローブを目標の深さまでゆっくりと動かします。セメントを塗布した後、最後の200マイクロメートルを進めて、プローブの横方向の動きを減らし、ターゲット領域の組織損傷を最小限に抑えます。
セメントが硬化したら、焼灼器でワックスを溶かして、プローブを挿入ツールから解放します。次に、コネクタボードを挿入装置から外し、クロコダイルクランプを使用して頭蓋骨の適切な場所に配置します。歯科用セメントを使用してコネクタボードを頭蓋骨に固定します。
海馬にプローブを埋め込む場合は、コネクタボードを対側の頭頂骨に配置します。次に、コネクタボードのアース線と基準線を、小脳の上の2本のネジに取り付けられた線にはんだ付けします。保護カバーを正しい高さにトリミングし、シリコンプローブの上に置きます。
その後、コネクタボードと頭蓋骨のカバーを歯科用セメントで固定し、露出した頭蓋骨の周りの皮膚を避けます。手術後、マウスに適切な鎮痛剤を少なくとも2日間適用します。インプラントの損傷を防ぐためにマウスをシングルハウス
にします。