マウス脳の両半球からの局所電界電位の記録

まず

、頭を定位フレームに固定した麻酔をかけたマウスから始めます。

頭皮を剃り、殺菌します。

切

開して残存組織を取り除き、頭蓋骨を露出させます。

頭

蓋骨を消毒剤で洗浄し、ターゲットの位置に穴を開けます。

脳の外層を取り除きます。

イオン溶液で満たされた微小電極を希望の角度で穴に挿入します。

両方の微小電極を脳のターゲット座標に下げます。

電極の抵抗をテストし、記録設定を調整して、局所電界電位または LFP データを確実に取得できるようにします。

LFPは、小さな領域内の多くのニューロンの集合的な活動から生じる電圧変化を反映します。

両半球の LFP を記録して、それらの間の神経活動を比較します。

手術前に、鉗子で尾やつま先をつまんでマウスの麻酔の深さを確認します。次に、マウスを定位固定装置に配置し、頭を固定します。両目に軟膏を塗って湿らせます。

次に、頭を剃り、その部分を殺菌します。剃った部分の真ん中に12〜15ミリの小さな切開を入れます。鉗子を使用して、頭皮を正中線からそっと引き離します。その後、皮膚をそっと分離し、残留組織を取り除きます。

過酸化水素でコーティングされた綿棒を使用して頭蓋骨をきれいにします。実体顕微鏡下で、頭蓋骨の左右両側に半径1〜1.5ミリメートルの小さな穴を2つ開けて、記録微小電極をM2領域に挿入できるようにします。

タ

ングステン針で硬膜を慎重に取り除き、機械式マイクロマニピュレーターを使用して、0.5モルの塩化ナトリウムで満たされた2つの別々の記録微小電極を60度の角度で穴に挿入します。

LFP記録の場合は、左右のガラス電極をM2座標までゆっくりと下げます。品質管理のために、差動増幅器を使用して各電極の抵抗をテストします。次に、録音処理を0.1ヘルツのハイパスと1,000ヘルツのローパスに設定し、1,000倍の増幅を行います。デジタル化された生の LFP データを少なくとも 60 秒間安定した状態で収集し、マウスは麻酔下で毎秒 2 回の呼吸で均等に呼吸します。