脳波および筋電図記録によるマウスの睡眠行動の解析

麻酔をかけたマウスを定位固定フレームに固定します。

剃った皮膚を消毒し、マウスをドレープで覆い、正中線を切開して頭蓋骨を露出させます。

特定の定位座標で頭蓋骨に2つの穴を開けます。

ステンレス鋼線に接続された4ピンヘッダーを備えた記録電極ユニットを用意します。

脳波または脳波電極としてネジ付きの2本のワイヤーを使用して、脳の電気的活動を測定します。

他の 2 本のワイヤーを筋電図または EMG 電極として使用して、筋肉の電気活動を測定します。

脳波電極を穴にねじ込み、電極アセンブリを頭蓋骨に固定します。

EMG電極を首の筋肉に挿入します。

縫合糸で切開部を閉じ、マウスを回復させます。

マウスを防音録音室に移します。

電極アセンブリを記録ケーブルに接続し、アンプに接続します。

EEG と EMG 信号を記録して、マウスのさまざまな睡眠段階と覚醒を分析します。

始める前に、すべての手術器具をホットビーズ滅菌器で滅菌してください。つま先つまみでマウスが麻酔していることを確認したら、頭と首の毛を剃ります。

次に、マウスを定位固定フレームに固定し、2つのイヤーバーの間にヘッドを固定します。次に、乾燥を防ぐために眼科用軟膏を目に塗ります。アルコールとヨウ素ベースのスクラブで剃った皮膚をクレンジングします。

次に、メスで正中線に沿って切断して頭蓋骨を露出させ、クリップを使用して皮膚を横に固定して手術領域を開いたままにします。0.8ミリメートルのドリルを備えた超硬カッターを使用して、2つの穴を開けます。前頭皮質領域に1つの穴を開けます。2番目の穴を右半球の頭頂領域に置きます。

次に、宝石商のドライバーを使用して、ステンレス鋼の脳波記録ネジを穴にねじ込みます。わずか2〜2回転半でネジを挿入して、皮質上の硬膜外位置を確保します。ネジは一度挿入すると小刻みに動かないようにしてください。これは非常に重要です。

次に、ピンを上向きにして電極アセンブリを頭蓋骨に固定します。電極はまっすぐ取り付ける必要があります。綿棒を使用して電極の位置を固定し、シアノアクリレートを使用して電極を接着し、続いて歯科用セメントを接着します。

次に、僧帽筋に小さな穴を開け、その穴にEMG電極を挿入します。次に、直径0.1ミリメートルの絹糸で皮膚を縫合します。次に、マウスを定位固定フレームから取り外し、ヒートパッドの上に置きます。

マウスにアンピシリンとメロキシカムの腹腔内注射を行い、胸骨の横臥を取り戻すまでマウスを監視します。次に、マウスを単独で収容します。

電極を埋め込んでから1週間後、マウスを防音記録室内の実験用ケージに移します。マウスのEEG / EMG電極アセンブリを、スリップリングに接続された記録ケーブルに固定します。

ADコンバータケーブルをスリップリングに接続されたEEG/EMG信号フィルタアンプに接続します。ADコンバーターを使用して信号を128ヘルツのデジタル信号に変換し、最後に信号をコンピューターに記録します。

記録チャンバーでマウスを2〜3日間慣れさせます。EEG/EMG記録ソフトウェアを起動します。まず、データファイル情報タブをクリックし、ファイル名の横にあるボックスをクリックします。ファイル名を入力し、[保存] をクリックします。次に、記録条件タブから、記録する必要があるすべてのEEG / EMGチャネルを選択します。また、このタブでサンプリング頻度を選択します。

、チャンネル情報タブで、選択したチャンネルが正しく表示されているかどうかを確認します。確認したら、最初にタイマー設定タブを選択して記録を開始します。次に、[モニター] をクリックして EEG と EMG を表示します。信号が正しく表示されている場合は、メインタイマーエリアで記録の開始と終了のクロック時刻を設定します。次に、モニターボタンをクリックして録画を開始します。