マウスにおける網膜色素上皮の直接結合網膜電図記録

暗に適応し、麻酔をかけたマウスから始めます。

角膜に麻酔薬と拡張薬を塗布します。

薄

暗い赤いライトのあるドームの前の高台にマウスを置きます。

後脚に接地電極を皮下に固定し、口の中に参照電極を固定します。

塩溶液で満たされた毛細管管を備えた電極ホルダーを取ります。フリックして気泡を取り除きます。

毛細管管の先端を塩溶液で完全に満たします。

毛細血管を角膜上に配置して、直接結合網膜電図またはDC-ERGを記録します。

DC-ERG は、網膜色素上皮 (RPE) の微妙な電気応答を測定します。

RPE は、光受容体細胞の健康と構造的完全性を維持する特殊な細胞単層です。

導電性を維持し、乾燥を防ぐために、目の潤滑剤を一滴塗布します。

各目の抵抗値をチェックして、それらが類似しており、範囲内にあることを確認します。

安定したベースラインを確立し、DC-ERG の記録を開始します。

実験のためにマウスと電極を配置するには、鎮静マウスの角膜を0.5%プロパラカイン塩酸の滴で麻酔してから、2.5%フェニレフリンHClと0.5%トロピカミドの滴で角膜を拡張します。

6 つの手順のうちの 1 つを使用して、ドーム内の薄暗い赤いライトを点灯し、マウスを加熱された記録テーブルの上に置きます。鉗子を使用して後脚の皮膚を慎重にテントに置き、片手で針電極をしっかりと保持し、もう一方の手で電極を後脚に皮下挿入して電極を所定の位置に固定します。

参照銀/塩化銀電極を動物の口に入れ、中央のペレットが頬の後ろに沿って置かれ、歯の後ろの所定の位置に保持されるようにします。

キャピラリー電極を目に当てる前に、ガラスキャピラリーを垂直に向けた状態で電極ホルダーを配置し、人差し指で電極ホルダーをフリックして、導入された可能性のある気泡を取り除きます。

25ゲージの針を使用して毛細血管の先端にHBSSを満たし、毛細血管を検査して、先端に気泡が閉じ込められていないことを確認します。HBSSで満たされた毛細血管の開いた先端が角膜に優しく接触するように電極ホルダースタンドを配置し、気泡が入らないように注意して、潤滑剤アイジェルディスペンサーを反転させて最初の滴を捨てます。次に、導電性を維持し、記録中の乾燥を防ぐために、潤滑剤のアイジェルを各目に一滴垂らします。