ラットの緑内障誘発のための高張生理食塩水注射法

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麻酔をかけたラットを取り、その目に麻酔薬を塗布して反射神経を麻痺させます。

げを切り取り、目の周りを消毒して汚染を防ぎます。

顕微鏡下で、下まぶたをクランプして目を膨らませ、強膜外静脈を露出させます。

この静脈は、房水の流出のためにシュレム管と小柱網を介して前房に接続しています。

露出した静脈に高張生理食塩水を入れたマイクロニードルを挿入します。

生理食塩水を注入し、血液を置換します。目全体に均一な効果を得るために、最初の注射と反対側に2回目の注射を実行します。

生理食塩水は小柱網に入ります。

塩分濃度が高いと浸透圧ストレスが引き起こされ、細胞死や組織の瘢痕化につながります。この瘢痕化は、網目を通る房水の流出を遮断し、眼圧を上昇させます。

圧力の上昇は、視覚情報を脳に運ぶニューロンである網膜神経節細胞に損傷を与えます。損傷は、視力喪失を引き起こす状態である緑内障につながります。

この手順では、KAXカクテルで動物を麻酔した後、動物が意識を失っていることを確認するために、足または尾をつまんで反射神経をチェックします。次に、ハサミでひげを切り取ります。続いて、綿先アプリケーターをベタジン溶液で飽和させ、実験眼の周囲を綿棒で拭きます。

顕微鏡下で、止血剤を使用して下まぶたをクランプし、目を膨らませ、上強膜静脈を露出させ、眼球運動を制限します。次に、微細針で静脈に対して10〜20度の角度で上強膜静脈を慎重に突き刺します。静脈への穿刺は、血液がマイクロニードルの先端に入ることが観察されたときに成功します。

50マイクロリットルの生理食塩水を静脈にゆっくりと注入します。塩が血管系内を循環すると静脈は白くなりますが、一部の領域では血のように赤い外観が維持される場合があります。

この手順の最も重要なステップは、2 モル生理食塩水の注入中に発生します。成功した結果を確実にするためには、血管系のブランチングが不可欠です。この手順では、針を 20 度の角度で安定させることが重要です。

その後、静脈に2回目の注射を行い、網膜神経節細胞層を完全に損傷させます。数分以内に、塩分が血管系を循環するにつれて、目の虹彩を通して明確な曇った外観が見られるはずです。

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最終更新:15 8月 2026