リゾレシチンを用いた視神経の局所脱髄誘導

麻酔をかけたラットから始めて、眼窩の上に切開します。

皮下組織を解剖して、視神経を含む眼窩腔にアクセスします。

顕微鏡下で結膜を解剖し、続いて下にある結合組織を解剖します。

次に、周囲の筋肉と腺を引っ込めます。保護層を切断して視神経を露出させます。

視神経は、電気信号を伝達する脂質が豊富な有髄神経線維で構成されています。

次に、リゾレシチン、脂質かく乱剤、および視覚的追跡用の色素を充填した組み立て済みのガラス製マイクロピペットを取ります。

露出した視神経にマイクロピペットを挿入し、リゾレシチンを注入します。

皮膚切開部を縫合し、抗生物質軟膏を塗布して感染を防ぎ、ラットを回復させます。

視神経では、注射されたリゾレシチンは、神経線維を取り巻くミエリン鞘の完全性を破壊します。

これにより、局所的な脱髄が行われ、視神経を介した信号伝達が減少します。

前述のように動物を手術の準備をし、いずれかの眼窩の上に1〜1.5センチメートルの皮膚切開を行います。細い虹彩はさみで皮下組織を開き、眼窩腔にアクセスします。次に、ステレオスコープの下で、結膜と前テノン嚢を開きます。

次に、外眼筋と眼窩内涙腺を引っ込めて、視神経の約3ミリメートルを露出させます。視神経の周囲で、眼科用ブレードを使用して硬膜層とくも膜層を縦方向に開き、ハミルトン注射器に取り付けられたガラス製マイクロピペットを眼球から2ミリメートル後方の神経に挿入します。

30秒かけて、染料を含むリゾレシチンのボーラスを注入します。手順を完了するには、皮膚切開部を縫合し、感染を防ぐために抗生物質軟膏を塗布し、動物を加温パッドに移動し、回復するまで監視します。