アミロイドβペプチド注入によるアルツハイマー病ラットモデルの確立

頭

蓋骨を露出させた動けなく麻酔をかけたラットから始めます。

ブレグマを見つけ、3つの基準点に印を付け、慎重に穴を開けます。エリアを掃除します。

穴の1つから、海馬近くの前背側視床核に成長因子を注入します。

2つの穴に2本のネジを固定し、3番目の穴にガイドカニューレを挿入し、歯科用セメントで固定します。ガイドカニューレをダミーカニューレで覆います。

翌日、内部カニューレをガイドカニューレに挿入し、注入システムに接続します。

アミロイドベータペプチドと三塩化アルミニウムを脳の側脳室に定期的に注射して、海馬での拡散を促進します。

その後、カニューレ移植システムを取り外します。その部分を消毒し、穴を骨セメントで埋め、切開部を縫合します。

時間が経つにつれて、アミロイドベータペプチドは凝集して有毒なプラークになります。

注入

された成長因子と三塩化アルミニウムは、記憶に重要な海馬ニューロンの周囲のプラーク形成も促進します。

これは神経細胞の死につながり、アルツハイマー病と同様の記憶障害を引き起こします。

麻酔をかけたラットでは、まず頭の頂点の毛皮を外科用ハサミで切り取り、ヨードフォアで消毒します。

次に、外科用ビストリーとはさみで正中縦頭蓋骨に沿って頭の皮膚を切開します。

皮下組織と筋膜を分離します。頭蓋骨の頭蓋骨を0.3%過酸化水素で拭き、マーカーペンでブレグマに印を付けます。次に、RHTGF-β1を注入して1本のネジを固定するための前背側視床核、Aβ25-35とAICI3を注入するための側脳室または左室領域、そして最後に2番目のネジ固定場所の3つのポイントに印を付けます。

頭

蓋骨の3つのマークされたポイントに、柔軟な骨ドリルで直径1ミリメートルの穴を3つ静かに開けます。出血を止め、滅菌乾燥綿で頭蓋骨表面を繰り返し洗浄します。

次に、マイクロインジェクションポンプにリンクされた針を脳に深さ4.2ミリメートルで挿入し、1マイクロリットルのRHTGF-β1を広告領域に優しく注入します。マイクロインジェクションは注射後2分間保持してから、ゆっくりと引き抜きます。

小さなドライバーで、前にマークしたポイントで指定された2本のネジを頭蓋骨に固定します。スクリューを配置した後、75%アルコール浸漬で24時間消毒した後、最初にダミーカニューレをガイドカニューレに挿入して、カニューレ移植システムを組み立てます。次に、ラットの定位固定装置のカニューレホルダーを使用して、ステンレス製チューブガイドカニューレを頭蓋骨の穴から左室領域の4.6ミリメートルで脳に挿入します。

次に、義歯床材と義歯床の水を1ミリリットルあたり1.5グラムの割合で混合します。ガイドカニューレを覆うためのペースト、プラスチック製の台座、およびガイドカニューレを固定するための2本のネジを入れます。皮膚感染を避けるために