JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 2:21 分 • July 8th, 2025
まず、中枢神経系(CNS)感染の標的となるウイルスを含む異なる容量の培地を充填した2つのシリンジから始めます。
マウスの子犬をうつ伏せの姿勢に保ちます。頭部を消毒し、少量のウイルス溶液をラムダ領域から脳内に注入します。
これにより、ウイルスは血液脳関門を迂回し、脳組織に直接到達することができます。
次に、ネズミの子犬を仰臥位に抱きしめます。消毒し、大量のウイルス溶液を腹部に注入します。
これにより、血管を介したウイルスの全身拡散が促進され、中枢神経系の他の部分に感染します。
注射されたウイルスは神経細胞に入り、宿主機構を利用して複製し、細胞死に至ります。
ウイルスはまた、免疫系を引き起こし、CNSの炎症を引き起こし、CNS感染モデルを確立します。
感染手順を開始する前に、適応していないデング熱ウイルス 2 ストックを RPMI 1640 媒体濃度 40 マイクロリットルあたり 10 倍から 5 番目のプラーク形成単位に希釈します。次に、10.3マイクロリットルの希釈ウイルスが入った30ゲージの針と、1匹あたり30マイクロリットルのウイルスが入った30ゲージの針を備えた10.3ミリリットルの注射器を装填します。
ウイルスの脳内送達の場合は、親指と人差し指の間のオラクルを押して、生後7日の授乳中のがん研究所のマウスをうつ伏せの姿勢で優しく拘束し、10マイクロリットルの希釈したウイルスを矢状縫合糸とラムドイド縫合糸の交差点にあるラムダ領域に注入します。脳内注射後、親指と人差し指を使用してマウスを仰臥位に保持し、腹腔内に穏やかに、30マイクロリットルの希釈ウイルスをマウス腹部に注射します。