マウスモデルにおけるウイルス誘発性神経炎症の作製

表皮の最も深い層である基底層を露出させる足元に微小な傷がある麻酔をかけたマウスを取ります。

この層には、脊髄近くの後根神経節 (DRG) に接続された末梢神経線維が含まれています。

神経系を標的とする偽狂犬病ウイルスの接種物を傷口に塗布し、針軸でこすりつけて吸着力を高めます。

ウイルスは細胞表面受容体に結合し、ウイルスが侵入して複製を開始することができます。

ウイルス粒子は近くの細胞に広がり、末梢神経に入ります。

その後、ウイルスはDRGに移動し、脊髄を通って脳に広がり、ニューロンに感染します。

感染したニューロンは DAMP を放出し、常在ミクログリアを活性化し、サイトカインとケモカインを分泌してマクロファージと好中球を引き付けます。

これらの免疫細胞は、ニューロンに損傷を与える活性酸素種とタンパク質分解酵素を放出し、神経炎症を引き起こします。

20マイクロリットルの適切な力価のウイルス接種物を、摩耗したフットパッドに局所的に塗布します。対照動物の摩耗したフットパッドにのみ培地による模擬接種を並行して実行します。各塗布後、10分ごとにウイルスの吸収を促進するために、針の軸でフットパッドを30回優しくこすります。摩耗したフットパッドが乾いたら、臨床フォローアップとサンプリングのために動物を個々のケージに入れる前に、胸骨が横臥するまでマウスをモニタリングしながら回復させます。