マウスモデルにおける実験的自己免疫性脳脊髄炎の誘導

まず、

神経ペプチドと熱死滅細菌アジュバントを含むエマルジョンを麻酔マウスに皮下注射します。

皮下組織では、アジュバントは抗原提示細胞 (APC) を引き付け、主要な組織適合性複合体上のニューロン ペプチドを処理して提示します。

活性化されたAPCはリンパ節に到達し、ナイーブT細胞と相互作用し、自己反応性T細胞への分化を誘導します。

これらのT細胞は循環し、血液脳関門またはBBBに到達します。

次に、細菌由来の外毒素を腹腔内に注射します。

外毒素はBBBに到達し、その透過性を高め、中枢神経系(CNS)へのT細胞浸潤を可能にします。

CNSでは、T細胞はニューロンペプチドを提示する常在APCと相互作用し、サイトカイン放出を促進し、さらなる免疫細胞浸潤を誘導します。

免疫細胞は炎症誘発性サイトカインを放出し、ミエリン損傷を引き起こします。

さらに、B 細胞は T 細胞と相互作用し、ミエリンにさらに損傷を与える自己抗体を分泌し、実験的な自己免疫性脳脊髄炎 (EAE) を確立します。

この手順では、PTXを1x PBSに1ミリリットルあたり2マイクログラムで溶解し、よく混合します。次に、100マイクロリットルのPLP / CFAをマウスに皮下注射し、短いイソフルラン麻酔中に尾の付け根に2回注射します。背中上部や首の皮膚の免疫反応が頭や脊髄の画像を妨げるため、首の後ろに注射しないでください。

予防接種の1〜2時間後、マウスに100マイクロリットルのPTXを腹腔内に注射します。

次に、免疫化の24時間後に、マウスに100マイクロリットルのPTXを再度注射します。対照マウスの場合、PLPを含まない100マイクロリットルのCFAを尾の付け根に2回注射します。