側方流体打楽器装置を用いた外傷性脳損傷のマウスモデルの生成

麻酔をかけたマウスを取り、目の乾燥を防ぐために眼軟膏を塗ります。

頭を剃り、頭皮を消毒し、矢状面を切開して頭蓋骨を露出させます。

結合組織層を取り除き、損傷の標的領域に印を付けます。

ドリルで骨弁を作成し、それを取り外して脳の外側の覆いである硬膜を露出させます。

硬膜の上にカニューレを置き、歯科用セメントで固定します。

カニューレに生理食塩水を入れ、気泡が形成されないようにし、振り子と液体で満たされたリザーバーを含む横方向の液体打診装置のチューブに接続します。

振り子を校正された角度から解放してリザーバーに衝突し、流体を伝って脳に到達する圧力パルスを生成します。

機械的ストレスはニューロンに損傷を与え、外傷性脳損傷を引き起こします。

カニューレを取り外し、切開部を縫合し、マウスを回復させてさらに分析します。

外傷性脳損傷の誘発については、麻酔をかけたマウスのつま先つまみに対する反応の欠如を確認し、動物の目に軟膏を塗布します。髭剃り後、露出した頭皮を70%エタノールで消毒してから、矢状面で頭皮を切開します。鉗子を使用して、両側の切開部を引っ込め、骨膜をわずかに分離します。

マーカーを使用して、正中線から2ミリメートル離れた頭蓋骨の右頭頂領域に直径3ミリメートルの円を描きます。電気ドリルを使用して、硬膜を損傷することなく頭蓋骨を慎重に貫通します。骨弁を取り外して 3 ミリメートルの骨窓を露出させ、開頭術の上にプラスチック製の損傷カニューレを配置します。

カニューレを歯科用アクリルで頭蓋骨にセメントで留めた後、5ミリリットルの注射器を使用して、気泡を避けるように注意しながら、カニューレに滅菌0.9%生理食塩水を入れます。オシロスコープとアンプをオンにします。横方流体パーカッションエントリー装置の高圧チューブに気泡がないことを確認し、装置が安定した信号を出すまで約10回のテストパルスを供給します。

振り子の開始位置の角度を調整して、約2標準気圧のパルス強度に達し、入口カニューレを外側流体打診損傷装置に接続します。引き金を引いて振り子を解放し、脳損傷を誘発します。次に、パルスを取得し、閉じた流体で満たされたチューブシステム全体を通して硬膜に伝達します。

脳損傷誘発後、カニューレを取り外し、切開部を縫合します。次に、マウスを歩行可能になるまで監視付きの加熱パッドの上に置き、その後、動物を自宅のケージに戻して、餌や水を自由に利用できるようにします。