インパクターデバイスを用いた外傷性脳損傷のマウスモデルの生成

頭蓋骨が露出した麻酔をかけたマウスを取ります。

頭蓋骨関節である矢状縫合糸と冠状縫合糸を特定して、損傷の標的部位を特定します。

頭蓋骨にドリルで穴を開け、骨弁を取り外して、脳の皮質上の保護層である硬膜を露出させます。

装置が取り付けられた定位固定フレームにマウスを固定します。

インパクターの先端を露出した領域の上に配置して、外傷性脳損傷を引き起こします。

先端を下げて硬膜に接触し、衝撃の深さを設定するために引っ込め、損傷を加えます。

インパクターを取り外し、マウスをフレームから取り外します。

損傷部位からの出血を抑え、外科用接着剤を使用して頭皮を閉じます。

鎮痛剤を皮下投与して痛みを軽減し、マウスを回復させます。

この損傷は、体液の蓄積とともに、皮質とその下にある海馬および視床領域に進行性の損傷を引き起こし、認知機能と運動協調を損ないます。

制御された皮質外傷性脳損傷を誘発するには、まずメスを使用して頭皮の正中線に沿って1センチメートルの切開を行い、頭蓋骨を露出させます。手術部位から頭皮を引っ込め、露出した頭蓋骨の矢状縫合糸と冠状縫合糸を特定します。

頭蓋切除術を行うには、マイクロドリルに5ミリメートルのトレフィンドリルビットを装備し、ドリルを最高速度で作動させ、頭蓋骨に垂直にビットを、矢状縫合糸の左側に2ミリメートル、冠状縫合糸に2ミリメートルの吻側に穏やかで均一な圧力で適用します。ドリルが頭蓋骨を貫通すると、わずかなギブが感じられます。

鉗子と小型皮下注射針を使用して骨弁を取り外し、下にある硬膜を完全に露出させ、インパクターの先端を手術野に回転させます。定位固定フレームのミニチュアイヤーバーの間に両側の側頭骨を固定し、切歯クランプ内に切歯をロックして、マウスヘッドを安定した3点ホールドします。露出した硬膜に接触するまで先端を下げます。機器の接触センサーは、接触が行われたことを警告するために可聴トーンを鳴らします。

衝撃先端をゼロ点から後退させ、定位固定装置フレームのインパクター位置を下げて、希望の衝撃深さを設定します。次に、作動装置のインパクターを作動させてから、装置をフィールドから回転させて動物をフレームから取り除くことができます。

損傷直後は、滅菌綿の先端のアプリケーターから頭蓋骨と損傷した皮質表面に直接圧力を加えて出血を抑え、新しいアプリケーターを使用して頭蓋骨を乾燥させます。標準的な技術に従って頭蓋切除術の上の頭皮を閉じ、術後鎮痛を施します。次に、動物を清潔で予熱されたケージ内の側臥位回復位置に置き、完全に横臥するまで監視し、実験の過程で3日ごとに体重を測定します。