パーキンソン病のラットモデルにおけるレボドパ誘発性ジスキネジアの誘導

レ

ボドパ、ドーパミン前駆体、ドーパミン変換阻害剤で満たされた注射器を取ります。

この溶液をパーキンソン病の拘束ラットの皮下組織に注射し、ドーパミン産生ニューロンの損傷を示します。

ラットでは、阻害剤はドーパミン産生酵素に結合し、レボドパのドーパミンへの早期変換を防ぎます。

レボドパは血流に入り、アミノ酸チャネルを介して血液脳関門を通過し、損傷していないドーパミン産生ニューロンに入ります。

これらのニューロンの酵素は、レボドパを興奮性神経伝達物質であるドーパミンに変換し、シナプスに放出します。

ドーパミンはシナプス後ニューロンの受容体に結合し、シグナル伝達を引き起こします。

ドーパミンの生成を増やすために、定期的に注射を繰り返します。

時間が経つにつれて、過剰なドーパミンはその受容体の過剰刺激と過剰なニューロンシグナル伝達につながり、最終的にはラットの体の動きを混乱させます。

ネズミをケージに入れ、その行動を観察します。ラットは、レボドパによって誘発されるジスキネジアとして知られる不随意で反復的な体の動きを示します。

L-DOPA注射の前に、琥珀色のバイアルで事前に計量され凍結乾燥されたL-DOPAとベンセラジドの混合物に適切な量の滅菌生理食塩水を加え、10秒間よく振とうします。調製直後に、各動物に必要な量のL-DOPA-ベンセラジド混合物を個々のシリンジに充填し、26ゲージの針で取り付け、各シリンジに個々の動物識別でラベルを付けます。

最初のケージを注射ベンチに持ってきた後、ラットをケージから取り出し、注射面に置きます。利き手ではない手を使って、手のひらを表面に当ててラットの頭と肩を拘束し、親指と人差し指で肩甲骨を覆う背中の皮膚を首筋にします。利き手を使用して、筋肉内注射を避けるために針を体と平行に保ちながら、指の間の皮下空間に L-DOPA の量を注入します。

注射後、ラットをケージに移動します。次に、タイマーを1〜2分にセットし、すべてのラットが注入されるまで、1〜2分ごとに1匹のラットを注射する手順を繰り返します。評価日に、ケージの横にタイマーを配置して、レボドパ誘発性ジスキネジア、または LID 行動強度を観察しながら、評価期間中の特定の行動の頻度を推定します。

LID 行動の最初の開始、ピーク行動、および望ましい数の時点での衰退段階を含む、ジストニアおよび多動性ジスキネジア運動の強度と頻度を評価します。1分の評価間隔を使用する場合は、1分間のタイマーを設定して最初のラットを評価し、1分間隔ですべてのラットに評価を続けます。