リゾホスファチジルコリンの2点注入による局所脱髄マウスモデルの確立

頭

を剃った状態で定位固定装置に固定された麻酔をかけたマウスから始めます。

頭皮を消毒し、切開して頭蓋骨を露出させます。

頭

蓋骨をきれいにして結合組織層を取り除きます。

頭

蓋骨の基準点を使用して、ターゲット部位に印を付け、穴を開けます。

定位

固定装置に固定されたリゾホスファチジルコリン(LPC)の溶液を含む注射器を取ります。

脳の白質領域の 2 つの注射点の座標を決定し、それに応じて注射器を配置します。

LPC溶液を注入し、各部位に注射後しばらく針を所定の位置に保持します。

切開部を縫合し、動物を回復させます。

注射部位では、LPC はミエリンと直接相互作用し、その構造を破壊し、破壊を引き起こします。

これにより、局所的な神経機能障害が引き起こされ、局所的な脱髄モデルが確立されます。

まず

、32 ゲージの針を 5 マイクロリットルの注射器に接続します。注射の調製のために5マイクロリットルのLPC溶液を引き出します。次に、呼吸がスムーズである間、つま先ピンチ反射の欠如によってマウスの麻酔の深さを確認します。マウスを背側を上にして定位固定フレームに配置し、ノーズコーンと歯クランプで頭を固定します。

マウスを両側イヤーバーで定位固定装置に固定します。イヤーバーが水平で、頭が水平で安定していることを確認してください。ヨードフォアで拭いて頭の皮膚を消毒します。次に、メスを使用して頭皮の正中線に沿って約1.5センチメートルの小さな切開を切り、頭蓋骨を露出させます。ブレグマ、ラムダ、および後泉門が露出するまで、1%過酸化水素に浸した綿棒で頭蓋骨を拭きます。

注射器を定位固定装置に置きます。動物の水平方向の位置を確認し、脳梁を見つけます。注射部位が決まったら、座標を記録し、頭蓋骨にマーカーで印を付けます。頭蓋骨ドリルでマークされた部位をそっと穴を開けます。出血しないように注意してください。

針を指定された座標までゆっくりと動かします。脳梁の脱髄を誘導するには、各注射部位に 2 マイクロリットルの LPC 溶液を毎分 0.4 マイクロリットルの速度で注入します。注射後、各部位に針をさらに10分間保持します。最後に、4-0縫合糸で皮膚を縫合し、動物が10分以内に目覚めるのを待ちます。