自家血液注射によるくも膜下出血ラットモデルの確立

頭蓋骨を露出させ、頭蓋内圧を測定するためにプローブを埋め込んだ麻酔をかけたラットを取ります。

頭

蓋骨の基準点を使用して、ターゲット部位に印を付け、穴を開けます。

骨片を取り除き、穴を骨ワックスで埋めます。

別の穴を開けます。血管の位置を特定し、プローブを固定して脳血流を測定します。

針を取り、頭蓋骨が感じられるまで脳に挿入します。

主要な血管が位置する視交叉の前に確実に配置されるように、少し引っ込めます。

ラットの尻尾から採取した新鮮な血液を針室に充填し、血液の入った注射器を接続します。

脳の外膜と内膜の間の液体で満たされたくも膜下腔に血液を注入すると、頭蓋内圧が上昇し、血管の収縮を引き起こします。

これにより脳血流が減少し、くも膜下出血モデルが確立されます。

レーザードップラープローブを配置するには、目のすぐ前から始めて、正中線の尾側に15ミリメートルの切開を行います。鉗子で結合組織と筋肉を取り除いた後、無菌綿棒の端をレジームとして使用して、前髪と冠状縫合糸を特定します。

武装したレトラクターを配置した後、25ゲージの脊髄針を定位固定フレームに正確に配置し、位置をメモします。次に、ブレグマから針を抜きます。フレームを前方に6.5ミリ動かし、正中線の針を交換して穴あけの側面をマークします。

硬膜が骨の下に特定されるまでドリルします。まっすぐな鉗子を使用して、骨片をそっと取り除き、空洞を骨ワックスで満たします。次に、前胆の右側の横方向に3〜4ミリメートル、レーザードップラー用の冠状縫合糸のすぐ前方に、硬膜を貫通しないように注意しながら別の穴を開けます。

レーザードップラーが血流を測定できる血管を探します。レーザードップラーを配置し、値を確認します。最小値は 100 フラックス単位が必要です。顕微鏡を取り外した後も値が許容できるままである場合は、接着剤を1滴加えてプローブを固定します。値が 80 フラックス単位を超えているかどうかを再確認してください。

くも膜下出血を誘発するには、頭蓋骨の基部による抵抗が感じられるまで、半球の間の正中線の頭蓋骨に針をそっと挿入します。針を1ミリメートル引っ込めて、視交叉のすぐ前方に正しく配置します。血液を注入するときに最も均一な結果を得るには、針の先端が右を向くように針を時計回りに90度回します。次に、スティレットを取り外します。

15分間の平衡の後、麻酔レベルを調整して、80〜100ミリメートルの範囲の平均動脈血圧を取得します。次に、血液ガス分析を実行して、pH、二酸化炭素分圧、酸素分圧が生理学的パラメーター内にあることを確認します。

次に、鈍い 23 ゲージの針が付いた 1 ミリリットルの注射器を使用して、尾部カテーテルから 500 マイクロリットルの血液を採取します。空気の注入を避けるために、脊髄針室のデッドスペースを血液で満たします。注射器内の血液量を300マイクロリットルに調整した後、注射器を脊髄針に接続します。次に、注射器の周りをしっかりとつかみ、平均動脈圧を超えるように手動で血液を注入します。脳内圧の急激な上昇と脳血流の

急激な低下を観察します。