ショウジョウバエにおける閉鎖性頭部外傷性脳損傷の付与方法

麻酔をかけた成虫ショウジョウバエを空のバイアルに入れます。

綿球をバイアルに挿入してハエを底に閉じ込め、怪我をしたときにより強い衝撃を与えます。

ハエが麻酔から回復したら、バイアルを衝撃の大きい外傷装置のスプリングに取り付けます。

バイアルの端を上げたプラットフォームに置きます。次に、スプリングを斜めに引き戻して放します。

バイアルがプラットフォームに衝突し、ハエがバイアルの壁に繰り返し衝突します。

ショウジョウバエの脳は、外部損傷を引き起こすことなく、閉鎖性頭部外傷性脳損傷(TBI)を模倣して、頭部被膜に衝突します。

ハエが回復するのを待ち、餌の入ったバイアルに移します。

損傷はニューロン膜に損傷を与え、神経機能を損ないます。

損傷したニューロンからのシグナル伝達分子が免疫細胞を動員し、脳組織の進行性の分解を引き起こし、最終的にはハエを死に至ら

しめます。 1〜

60匹の二酸化炭素麻酔ハエを空のバイアルに入れ、ぴったりとフィットする綿球を使用してバイアルを塞ぎます。次に、バイアルの底から1インチのところに線を引きます。バイアルの側面からハエを倒し、新しく引かれた線と一致するまで綿球を押し込みます。

ハエが二酸化炭素から移動性を回復するまで5分間待ちます。次に、ベルクロの内側の端がバイアルの上部と同じ高さになるまで、スプリングの端をバイアルに挿入します。これにより、タイトな圧縮フィッティングを作成することでバイアルがスプリングに固定されます。スプリングを平らに置いた状態で、バイアルの1インチがアイスバケツカバーの隆起した部分と重なっていることを確認します。

このとき、バイアルがアイスバケツカバーに衝撃を与えると大きな音が発生するため、聴覚保護具を装着してください。次に、左手の親指と人差し指を使用してバイアルをベルクロ領域に持ちます。右手でボードをベンチトップにしっかりと持ちます。

次に、スプリングを希望の角度まで完全にまっすぐに引き戻し、スプリングを放します。スプリングが完全に止まるのを待ってから、バイアルをスプリングから取り外します。バイアルをベンチトップに置き、ハエが少なくとも5分間回復するまで待ちます。この間、ハエはゆっくりと通常の動きを取り戻します。次に、後で分析するためにハエをフライフードの入ったバイアルに移します。