ドーパミンニューロンを標的とするためのマウス脳組織切片の免疫組織化学

0 閲覧数2:42 • April 29th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ドーパミン合成の重要な酵素であるチロシンヒドロキシラーゼを発現するドーパミンニューロンを含むマウス脳組織切片を含むポリマーコーティングされたスライドを取ります.
均一な染色を確保するために疎水性ペンで切片の輪郭を描きます。
組織の形態を維持するために、組織をアセトン-メタノール溶液に固定します。
細胞膜を透過処理するために、界面活性剤を含む緩衝液ですすいでください.
ドーパミンニューロンのチロシンヒドロキシラーゼを標的とする一次抗体とインキュベートし、洗浄して結合していない抗体を除去します.
蛍光色素タグ付き二次抗体、核色素、RNase阻害剤を加えます.
インキュベーション中、二次抗体は一次抗体に結合し、核色素は核を標識し、RNase阻害剤はRNaseを不活性化します.
バッファーですすいでください。次に、エタノールの濃度を上げて組織切片を脱水します.
キシレンでインキュベートして組織を除去します.
処理された組織切片は、レーザーキャプチャマイクロダイセクションの準備が整い、標的ドーパミンニューロンの正確な視覚化と解剖を可能にします。

免疫組織化学を実行するには、疎水性ペンを使用して組織の輪郭を描き、乾燥させます。次に、1〜1のアセトンメタノール溶液で、組織を摂氏負20度で10分間固定します。冷凍庫から組織を取り出した後、PBS中の100〜200マイクロリットルのチロシンヒドロキシラーゼ抗体と1%トリトンで切片を10分間覆います。

次に、1%トリトンを含むPBSを使用してスライドをすすぎ、Alexa Fluor 488で標識された100〜200マイクロリットルのヤギ抗ウサギIgGでセクションを覆います。5分間インキュベートし、PBSを使用してスライドを2回すすぎます。次に、このビデオで前半に示したように、段階的な一連のRNaseフリーエタノールでサンプルをそれぞれ30秒間脱水します。キシレンで1分間インキュベートし、2回目の洗浄を5分間インキュベートします。LCMに使用する直前にスライドを取り外し、自然乾燥させます。

07:01

迅速な免疫標識と合わせてレーザーキャプチャーマイクロダイセクションを使用して、細胞特異的な亜集団からのRNAの単離

関連動画

0 再生回数

07:42

RNA分析のためのヒト前立腺上皮のレーザーキャプチャーマイクロダイセクション

関連動画

0 再生回数

09:31

個々の細胞タイプの転写プロファイリングのためのツールと​​してのレーザ支援顕微解剖(LAM)

関連動画

0 再生回数

03:14

マウス脳切片における座骨髄領域を同定するための免疫組織化学

関連動画

0 再生回数

02:58

マウス脳のMeyner基底核における神経線維の免疫組織化学的染色

関連動画

0 再生回数

03:04

蛍光In Situハイブリダイゼーション後のマウス脳切片におけるニューロンの免疫染色

関連動画

0 再生回数

07:30

ミクログリアとニューロンのための例染色:凍結切片ラット脳組織の免疫組織化学のためのプライマー

関連動画

0 再生回数

09:35

成体マウスにおける中脳ドーパミンニューロンの数の環境モジュレーション

関連動画

0 再生回数

08:19

光分留と標準的な顕微鏡装置を用いたマウス中脳のドーパミン作動性ニューロン数の薬剤の評価

関連動画

0 再生回数

07:44

マウスの脳、青斑核の局在

関連動画

0 再生回数

最終更新:1 8月 2026