JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 3:18 分 • April 28th, 2025
データ収集システムに接続された心臓灌流装置を取ります。
電気刺激と心拍リズムモニタリングの両方のために多電極カテーテルを配置します。
大動脈にカニューレが挿入されたマウスの心臓を取り、装置に接続します。
酸素灌流バッファーで心臓を灌流し、生理的循環を模倣します。
カテーテルを右心房と心室に挿入します。
ペースメーカー細胞と伝導線維で構成される心臓伝導システムは、心腔の同期収縮を調整します。
カテーテルを通して電気刺激を加えて、心臓の電気生理学的状態を安定させます。
温度を安定させるためにチャンバーを閉じてください。
制御された刺激を適用して、ベースラインの心臓活動を測定します。
次に、刺激頻度を上げて心臓の正常なリズムを無効にし、心室性不整脈として知られる心室に由来する不規則なリズムを引き起こします。
刺激後、心臓が正常なリズムに戻ることは不整脈に対する抵抗性を示唆し、異常なリズムが続く場合は感受性を示します。
まず、ウォーターバスを開始し、95%の酸素と5%の二酸化炭素の混合物を含む灌流溶液を入れます。次に、心臓を取り付ける前にポンプ速度を調整して、装置に取り付けるときにカニューレに気泡が残らないようにします。一般設定で目標灌流圧を水銀柱80ミリに設定し、記録を開始します。
白金電極、電極表面 0.5 x 0.5 ミリメートル、電極間隔 0.5 ミリメートル、指定されたデジタル刺激発生器によるデータ記録と刺激に、電気生理学カテーテルを使用します。次に、装置に取り付けた後、心臓が配置される領域の近くにカテーテルを配置します。次に、カニューレをランゲンドルフ装置にすばやく取り付け、カニューレに気泡が残っていないことを確認します。灌流圧を水銀柱80ミリメートルに切り替えて、定圧灌流を可能にします。
心臓に触れたり損傷したりすることなく、カテーテルを右心房と右心室に慎重に挿入し、カテーテルをカニューレにテープで取り付けます。次に、最初の20分間の平衡期間の間、準備されたサイクル長100ミリ秒で刺激を開始します。最後に、チャンバーを閉じて温度を安定させます。
まず、心房または心室ペーシング閾値の 2 倍でカテーテルの遠位または近位電極を介してプログラムされた刺激を加え、電気生理学的パラメーターを評価します。次に、ランベス規則に沿ってプログラムされた追加の刺激またはバーストペーシングプロトコルを実行して、心室性不整脈の発生を評価します。
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