マウスモデルにおける軽度外傷性脳損傷の誘発

麻酔をかけ、準備したマウスを頭蓋骨を露出した定位固定フレームに固定します。

頭蓋骨の基準点を特定します。次に、頭支持装置を動物の頭の下に置き、耳の損傷を防ぐために膨らませます。

定位誘導電磁インパクターを頭の上に整列させます。

定位座標をリセットして、インパクタープローブをターゲット上に正確に位置合わせします。動物の耳に接触センサーを取り付けます。

プローブが頭蓋骨に触れたら、頭蓋骨を引っ込めます。希望の衝撃深さを設定し、適切なパラメータで衝撃を開始します。

プローブは頭蓋骨に制御された力を与え、皮質ニューロンの軸索の伸張とせん断を誘発し、軽度の外傷性脳損傷を引き起こします。

動物の正位時間、つまり怪我後に正常な体位を取り戻すのにかかる時間を測定します。

マウスに目に見える頭蓋骨骨折がないか評価します。

次に、マウスをフレームから取り外し、切開部を閉じて抗生物質を塗布します。

マウスの回復を待ちます。

軽量のアセタール樹脂、テーパードポイントイヤーバー、バイトバー、マウス麻酔マスクを使用して、マウスを定位固定フレームに固定します。次に、マウスの呼吸を注意深く監視して、麻酔の深さを確認します。角膜の乾燥を防ぐために、滅菌アイ潤滑剤を目に塗布します。ポビドンヨード綿棒で頭皮を滅菌します。

麻酔の深さを確認した後、メスを使用して目と首の間に約1センチメートルの頭皮正中線切開を行い、頭蓋骨を露出させます。頭蓋骨を1〜2分間乾燥させてから、ブレグマとラムダを特定します。次に、頭支持装置を頭の下に置き、マウスの頭の底に押し付けられるが、頭がバイトバーから持ち上げられなくなるまで、電球を水で膨らませます。

インパクターをマウスの頭の上の所定の位置に移動します。伸縮トグルスイッチを伸長にして、インパクターを伸ばします。次に、インパクターがブレグマの中央になるまで並べます。定位カメラリーダーのデジタル定位X座標とY座標を0にリセットします。次に、プローブをブレグマからターゲット座標に移動させて、内側外側から0ミリメートル、前方後方からマイナス1.6ミリメートルまで移動して、プローブを衝撃位置に合わせます。

接触センサーをマウスの耳に当てます。表面に最初に接触するまで、延長されたプローブでプローブの先端をゆっくりと下げます。ビープ音で停止します。次に、定位カメラリーダーのデジタル定位Z座標を0にリセットします。

先端が頭蓋骨と同じ高さであるかどうかを注意深く調べてください。次に、コントロールボックスのトグルスイッチを格納位置に置いて、インパクターを格納します。先端は引っ越し、衝撃を受けるまでヘッドに接触しなくなります。背側腹側の深さをマイナス1.2ミリメートルに調整して、衝撃の深さを設定します。マウスの呼吸を注意深く監視して麻酔の深さを確認し、必要に応じてガスレベルを調整します。

右のトグルスイッチを押して衝撃を誘発します。プローブの先端は、表示された速度で下降し、設定された滞留時間の間、下降したまま、後退します。頭部外傷またはCHI衝撃が与えられた直後にタイマーを開始して、正位時間を記録します。平均的な正位反射時間は5〜15分です。

マウスに目に見える頭蓋骨骨折、出血、無呼吸がないか評価します。定位固定フレームからマウスを取り外します。皮膚をホチキスで留めて頭皮を閉じます。次に、滅菌綿の先端のアプリケーターを使用して、閉じた切開部にトリプル抗生物質軟膏を塗布します。マウスをクリーンな保持ケージに戻して回復します。