慢性てんかん誘発ラットにおける興奮性神経伝達物質レベルの評価

対照ラットと、海馬にガイドカニューレと脳波(EEG)電極を埋め込んだ慢性てんかん誘発ラットを取ります。

てんかんの誘発は興奮性神経伝達物質の放出を増加させ、シナプス後細胞へのイオン流入を引き起こし、継続的な興奮性電位を生成します。これにより、電極を使用して記録される発作と呼ばれる電気的活動の同期バースト

が発生します。

半透膜を備えたマイクロダイアリシスプローブをカニューレに挿入します。

ラットを脳波記録システムのケージに縛り付けます。

プローブ入口を介して脳組織に生理学的バッファーを注入します。

発作がないことを確認し、プローブ出口から細胞外液を収集して神経伝達物質レベルを評価します。

てんかんラットの基礎レベルの上昇は、てんかんを介した増加を示しています。

高カリウムバッファーを注入し、サンプルを回収します。

カリウムの増加はニューロンの興奮性を延長し、継続的な神経伝達物質の放出を引き起こします。

てんかんラットと対照ラットの両方で神経伝達物質レベルの一時的な急上昇は、カリウム誘発性の高い増加を示しています。

まず、メーカーのユーザーガイドに従って、初めて使用するマイクロダイアリシスプローブを準備し、リンゲル液で満たします。次に、長さ 10 センチメートルの FEP チューブを切断し、さまざまな色のチューブ アダプターを使用して、プローブの入口カニューレと出口カニューレに接続します。チューブがアダプターに接触し、すべての接続でデッドスペースがないことを確認してください。

動物の頭をしっかりと持ち、ピンセットを使用してダミーカニューレをガイドから取り外します。マイクロダイアリシスプローブをガイドカニューレに挿入し、モデリングクレイを使用してカニューレをさらに固めます。次に、動物をテザーEEG記録システムに接続します。次に、動物をプレキシガラスのシリンダーに入れ、新しい環境を探索させます。目覚めて自由に動くネズミの動きをたどってください。

次に、チューブアダプターを使用して、リンゲル液が入った鈍い22ゲージ針でプローブの入口を2.5ミリリットルのシリンジに接続します。2.5ミリリットルのシリンジのピストンを連続的に押して、10ミリリットルのリンゲル液をプローブに押し込みます。プローブの準備が整ったことを示すために、出口に液体の滴が現れるかどうかを確認します。最後に、FEPチューブに接続された2.5ミリリットルのシリンジに、チューブアダプターでリンゲル液を充填し、輸液ポンプに取り付けます。ポンプを毎分2マイクロリットルで始動し、一晩稼働させます。

ビデオ脳波記録で、サンプル採取前の 3 時間に発作がないことを確認した後、リンゲル液で満たされた FEP チューブのカニューレ注射器を運ぶポンプを停止します。FEPチューブに接続された2.5ミリリットルのシリンジの別のセットを、100ミリモル