JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 2:36 分 • April 28th, 2025
麻酔をかけたネズミを例に挙げます。
頭皮を剃る。次に、角膜の水分補給を維持するためにアイジェルを塗布します。
動物を定位フレームに固定し、手術部位を消毒します。正中線を切開し、それを引っ込めて頭蓋骨を露出させます。
右前頭半球に穴を開けて前頭前野にアクセスします。
神経膠芽腫または脳腫瘍細胞の懸濁液を含む定位誘導注射器をドリル部位に配置します。
ポンプコントローラーを使用して、細胞懸濁液を前頭前野に注入します。
注入された細胞の逆流を防ぐために、針をゆっくりと引き抜きます。次に、穴あけ部位を骨ワックスで密閉します。
手術切開部を縫合し、その部位を消毒します。
ネズミをケージに戻し、赤いランプを使って体温を維持します。
注射後、脳腫瘍細胞は増殖し、周囲の組織に浸潤し、血管新生を誘導し、正常な脳機能を破壊し、神経膠芽腫モデルを生成します。
麻酔をかけた170グラムの雌フィッシャーF344ラットの脳に神経膠腫細胞を接種するには、まず、つま先のつまみに対する反応の欠如による鎮静を確認します。頭蓋骨の後ろまで目の高さから毛を取り除き、動物の目に軟膏を塗ります。動物を定位装置に固定します。露出した皮膚をポビドンヨードで消毒し、頭皮正中線2センチメートルの切開で頭蓋骨を露出させます。ダイヤモンドドリルを使用して、右前頭半球のブレグマの外側に1ミリメートル、後方2ミリメートル、および2.5ミリメートルの穴を開けます。
次に、29ゲージのインスリン注射器の針に5マイクロリットルの細胞懸濁液を装填します。そして、マイクロシリンジポンプコントローラーを使用して、定位誘導下で細胞を頭蓋骨に3ミリメートルの深さまで注入し、針をゆっくりと引き抜きます。骨ワックスで切開部を閉じます。次に、より多くのポビドンヨードで皮膚を縫合して消毒します。そして、赤いランプを使用して、手術後に動物の体温を安定させ、完全に回復するまで監視します。