JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 5:12 分 • April 28th, 2025
麻酔をかけたネズミの子犬を温熱パッドの上に固定することから始めます。
エタノールとポビドンヨードで交互に頸部を滅菌します。切開部位に局所麻酔を施します。
頸椎切開を行い、総頸動脈を露出させます。
リトラクターを配置して、アクセスが明確になるようにします。
内頸動脈またはICAを特定し、周囲の組織を除去します。
ICAの基部に結紮糸を結び、血流を一時的に止めるために引っ込めます。
ICAに緩い2番目の結字を置きます。
合字の間に切開を入れます。
シリコンでコーティングされたナイロン閉塞縫合糸を取り、中大脳動脈またはMCAに到達するまで切開部から挿入します。
これにより、MCA への血流が遮断され、脳に局所虚血が誘発されます。
咬合縫合糸の周りに結紮糸を結んで固定します。
切開部位を閉じます。さらに研究する前に、子犬が回復するのを待ちます。
承認されたプロトコルに従って吸入イソフルランを使用して子犬を麻酔した後、足をつまんでも反応がないことを確認します。手術段階の下で加熱パッドを使用して体表面温度を維持します。肩の部分にテープで動物を仰臥位に固定します。
滅菌綿棒を使用して、70%エタノールで前頸部領域を綿棒で拭き、続いてポビドンヨード溶液の綿棒で拭きます。次に、計画された切開部位に 0.25% ブピバカインを局所的に浸潤させます。次に、ステレオスコープを通して作業しながら、頸椎前部5〜7ミリメートルの正中線切開を行い、総頸動脈を露出させます。
2〜4個のリトラクターを配置して、空洞を開いたままにし、動脈を露出させます。次に、内頸動脈、後頭動脈、外頸動脈の位置を確認します。動脈から結合組織と脂肪を取り除き、鮮明な視界を取得します。
1.5センチの6-0シルク編組縫合糸を切断した後。縫合糸をほどき、一本のストランドを引き抜きます。一本のストランドがきれいでほつれていないことを確認してください。
縫合糸を45度の鉗子で保持しながら、先端がICAとOAの間に現れるように、ICAの下で円弧を描くように鉗子を掃きます。次に、縫合糸の端をつかみ、端がアクセスしやすいように引っ張ります。鉗子からストランドを解放し、鉗子をICAの下から引き出して、前の動きを逆
にします。CCA から分離する場所に最も近い基部で、ICA の周りに一時的な結紮糸を結びます。ICAを慎重に横方向に引っ込め、クリップを使用して、切開部の反対側の腋窩領域近くの余分な皮膚に引っ込めたストランドを固定します。次のステップに進む前に、引っ込めたストランドが血流を止めるのに十分なほどピンと張っていることを確認してください。
動脈は平らで青白くなければなりません。45度の鉗子を使用して、別の編組されていない縫合糸をつかみ、以前と同様にICAの下と周りにループさせます。このストランドをリトラクトストランドの横方向に配置します。
次に、結ばれた結紮糸と結ばれていない結紮糸の中間で0.2ミリメートルの動脈切開術を切断し、結ばれた結紮糸に近づけます。次に、メートル定規を使用して、閉塞縫合糸として 10 mm のシリコンでコーティングされたナイロン縫合糸を測定します。再灌流中の除去のために、2〜3ミリメートルの余分な余裕を持って縫合糸を切断します。
閉塞縫合糸を45度の鉗子で保持し、まっすぐな鉗子を使用して曲がり、前進の停止点をマークします。閉塞縫合糸を動脈切開術に送り込み、ECAと平行に頭に向かって向けます。曲がりに達するまで縫合糸をスムーズに進めます。次に、収縮ストランドの横側に配置されたストランドを使用して、一時的な結紮糸を結び、咬合縫合糸を固定します。リトラクタークリップを取り外します。次に、両方の一時的な結紮糸のストランドをトリミングし、結び目を取り除くために使用されるストランドを、結び目を締めるために使用したストランドよりも長く残します。リトラクターを取り外します。そして、6-0編組シルクを使用して空洞を閉じ、3つまたは4つの断続縫合糸を作成します。
子犬を麻酔から外し、室内空気の中の加熱パッドの上に置きます。子犬が胸骨の横臥を維持するのに十分な意識を取り戻すまで監視し、ダムに戻す前に完全に回復したことを確認してください。