JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 4:08 分 • May 29th, 2025
視神経萎縮を示す麻酔をかけた遺伝子組み換えマウスを取り上げます。
瞳孔は光の透過性を高めるために拡張されます。
目を固定するために麻酔薬を投与します。角膜の水分補給のために点眼薬を塗布します。次に、マウスをガーゼで包み、体の暖かさを保
ちます。光の屈折を最小限に抑えるためにジェルを塗布します。マウスをスペクトル領域光コヒーレンストモグラフィーシステムカセットに固定し、頭の位置が適切であることを確認します。
右目の光軸とイメージングレンズを合わせます。アライメント コントロールを使用して視神経乳頭を画像フィールドの中央に配置し、網膜の適切なアライメントを確保します。
網膜に向けられた低コヒーレンス光は、屈折率の異なる層で反射します。反射光は基準ビームと結合して干渉パターンを生成し、網膜の高解像度断面画像を作成します。
イメージング後、マウスが回復するまで待ちます。
OCT 画像分析により、視神経萎縮の特徴である神経節細胞複合体層の肥厚が明らかになりました。
滴を取り除き、10%フェニレフリンと0.5%トロピカミドの取り付けを繰り返します。目がイメージングのために十分に拡張したら、粘性のあるグリコールベースの点眼薬で目を潤滑して角膜に水分を補給し、マウスをサージカルガーゼで包んで暖かく保ちます。
スポンジまたは綿の芯を使用して、0.3% ヒプロメロースを添加した眼科用ジェルの薄層を両目に塗布します。その際、まつげとひげを脇に置きます。マウスをカセットに置き、頭をまっすぐに前に向けてマウスを置き、バイトバーを慎重に口に入れます。検査対象の目の動物の側面の下にコットンロールを置きます。
次に、クリップオン照準先端をマウス専用レンズに当てたまま、Zトランスレータネジを反時計回りに回してレンズを目に近づけます。カセットを回転させ、バイトバーとXトランスレーターネジを回して、実験眼がレンズを直接見ることができる位置になるまで、マウスの位置を事前に設定します。
目の光軸とレンズが揃ったら、検査で最初のスキャンを選択します。[照準を合わせる]をクリックし、Z トランスレータ ネジを使用して、左側のパネルで網膜を垂直に、右側のパネルで水平に移動します。カセットを回転させて、視神経乳頭を上下に動かして、右側のパネルの中央に持ってきます。バイトバーネジを使用して右側のパネル内の網膜をまっすぐにし、カセットを回転させて視神経乳頭を左側のパネルの中央に配置します。
次に、Xトランスレータースクリューを使用して左側のパネル内の網膜を水平にし、各モジュレーターの主な機能を念頭に置いて、視神経乳頭に完全に集中するように網膜の位置をさらに調整します。網膜が所定の位置に配置されたら、[スナップショットの開始]をクリックして、スペクトルドメインの光コヒーレンストモグラフィースキャンを開始します。
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