アルツハイマー病マウス脳切片におけるメトキシX04標識アミロイドプラークの可視化とマッピング

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イメージング中の水分補給を維持するために、バッファー内の関心領域を含むマウス脳組織切片から始めます。

組織は、蛍光色素であるメトキシX04を注射したアルツハイマー病マウスモデルから得られます。

メトキシ X04 は、アミロイド プラークのβプリーツ シート構造に特異的に結合し、イメージングと分析のためにその蛍光を保持します。

UVフィルター付きの蛍光顕微鏡を使用して、メトキシ-X04を励起し、放出された蛍光を捕捉して、周囲の組織に対して蛍光標識されたアミロイドプラークを視覚化します。

顕微鏡ステージを調整せずに、同じ領域の画像を明視野モードでキャプチャして組織構造を詳細に把握し、蛍光モードでプラークを視覚化します。

画像処理ソフトウェアを使用して明視野画像と蛍光画像を位置合わせし、プラークを解剖学的構造に正確にマッピングします。

これらの画像は、アルツハイマー病の病理を研究するために、構造的文脈内でのアミロイドプラークの詳細な視覚化を提供します。

定位固定マウス脳アトラスの助けを借りて、関心領域を含む脳切片を選択し、各切片を24ウェル培養プレートのウェル内の凍結保護剤に入れます。次に、使い捨てピペットを使用してPBSの液滴を顕微鏡スライドに追加し、その切片を液滴上に置きます。

蛍光顕微鏡で切片を調べて、メトキシ-X04標識A-ベータプラークを含む領域を特定します。顕微鏡ステージを動かさずに、明視野および蛍光モードで関心領域の画像をキャプチャします。プラークを組織切片の構造領域に関連付けるために、各画像は両方のフィールドで同じ領域を示す必要があります。

動物の番号に従って撮影した画像を保存し、名前を付けます。また、プレートのウェル番号と撮影した写真のフィールドを記録します。イメージングが完了したら、セクションを指定されたウェルに戻します。セクションが乾燥しないように、同じ手順を使用してシーケンスの次のセクションを調べます。

画像を整列させるには、画像Jで同じROIの明視野画像とUVフィールド画像を開きます。次に、モザイク J プラグインを使用して、2 つの画像の端を揃えます。整列して結合された画像を、ウェル番号に従って特定の動物の番号とともにフォルダーに保存します。同じ動物の異なるセクションからの画像を組み合わせて、関心領域のプラークを特定して位置を特定します。

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最終更新:1 8月 2026