JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 9:19 分 • May 29th, 2025
麻酔をかけた対照マウスと体性感覚皮質への血流が制限されているマウスを取ります。
この制限は、脳内で神経細胞の死と梗塞形成を引き起こし、ミクログリアの活性化と末梢免疫細胞の浸潤を引き起こします。
免疫細胞はミトコンドリアトランスロケータータンパク質(TSPO)を過剰発現します。
マウスをPET/CTスキャナーベッドに固定します。
マウスの体にX線を通す回転するX線源を使用してCTスキャンを実行します。
検出器は X 線をキャプチャし、主要な解剖学的ランドマークの画像に処理します。
尾静脈からTSPO放射性トレーサーを注射します。
放射性トレーサーは梗塞領域に移動し、免疫細胞のTSPOに結合します。
PETスキャンを実行します。
放射性トレーサーは陽電子崩壊を起こし、近くの電子と衝突してガンマ線を生成する陽電子を放出します。
検出器はこれらの光線を捕捉し、放射性トレーサー分布の3D画像を再構築します。
重ね合わせたPET/CT画像を可視化し、トレーサーの取り込みが多い梗塞領域を特定。
まず、麻酔をかけたマウスを PET/CT スキャナーベッドにうつ伏せに置き、まっすぐにしてノーズコーンにしっかりと固定されていることを確認します。各マウスの頭と体を柔らかい手術用テープでベッドにテープで留め、テープの配置によって呼吸が制限されないようにします。動物がベッドに固定され、呼吸が安定したら、レーザー十字線をオンにしてスキャンベッドを動かし、4匹のマウスすべての脳と整列します。
マウスの脳を視野の中心にできるだけ近づけて、スキャナーベッドを取得位置に移動します。マウスのスカウトビュー画像を取得して位置を確認し、必要に応じてインターフェースの視野ボックスをドラッグして位置を調整します。最後に、スキャナーソフトウェアの[ワークフローの開始]をクリックしてCTスキャンを開始し、[インタラクティブなユーザープロンプトを表示する]を必ず選択して、トレーサー注入前にPETスキャンを手動で開始できるようにします。
マウスが自動的にCTからPETに進んだら、放射性トレーサー注射用にスキャナーの背面をセットアップします。保護吸収パッドを棚に置き、はさみとライターが手元にあることを確認してください。密閉されたカテーテルチューブをはさみで切り取ります。カテーテルラインに気泡がないことを確認し、10〜20マイクロリットルの生理食塩水フラッシュを実行して、カニューレがまだ静脈内にあることを確認します。次に、以前に測定した用量の注射器を4つのカテーテルのそれぞれにロードし、各マウスにどの用量が与えられたかを追跡します。
PETスキャンを開始する準備ができたら、[OK]をクリックし、同時に10秒のタイマーを開始します。スキャナーの後ろに2人の研究者を置き、用量注射器を手に、タイマーがゼロになったら4匹のマウスすべてに同時に注射しま
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