脳低酸素虚血による脳損傷のマウスモデルにおけるイメージング

麻酔をかけたマウスを取り、ノーズコーンを使用して酸素を供給します。

マウスの右総頸動脈は、右脳半球への血流を減少させるために結紮され、低酸素症による損傷の素因となりました。

カテーテルを挿入して、放射性標識グルコースを静脈内送達します。

マウスをスキャナーに配置して、陽電子放出断層撮影法(PET)を使用してグルコース代謝を同時に画像化し、磁気共鳴画像法(MRI)を使用して構造変化を画像

化します。

酸素を減少させることによって低酸素症を誘発し、それによって脆弱な半球の細胞ストレスを悪化させます。ストレスは細胞内の水分の蓄積につながり、細胞外空間と比較して腫れた細胞内の水分子の動きを制限します。

MRI画像では、制限された水分子の動きが影響を受けた半球の暗い領域として現れ、低酸素症による損傷を示しています。

同時に、注入された放射性標識ブドウ糖は脳に到達し、健康な細胞に吸収されます。

PET イメージングは放射性標識グルコース分布を示し、影響を受けた半球の暗い領域は、低酸素症による損傷によるグルコース取り込みの減少を示しています。

酸素と窒素の誤差源をオンにして、酸素と窒素の流量計の動作を確認します。次に、流量計の電源を入れます。毎分 1 リットルの流量で、酸素の流量を毎分 114.3 ミリグラムに、窒素の流量を毎分 1.150 グラムに設定します。

次に、麻酔、呼吸パッド、ヒーター システムがしっかりと機能するようにして、動物用ベッドを準備します。次に、放射性トレーサーを含む基準マーカーを視野内の動物床に取り付けます。マウスをイソフルランで麻酔し、尾を予熱してカテーテル挿入の準備をします。

準備ができたら、ヘパリン化生理食塩水で事前に充填されたPE-10カテーテルを最大5センチメートルまで挿入します。挿入部位のIVラインをシアノアクリレート接着剤を一滴固定します。次に、動物を準備された動物のベッドに移します。マウスの目に眼科用軟膏を塗り直して乾燥を防ぎ、上切歯を歯棒の周りに置き、イヤーバーを所定の位置に置くことで動物の頭を安定させます。

毎分0.5〜1リットルで1%〜2%のイソフルランフローを開始します。直腸プローブ体温計を挿入します。体温と呼吸の測定値が機能していることを確認します。次に、200マイクロリットルの生理食塩水中の放射性トレーサー用量の約600マイクロキュリーを1ミリリットルの注射器に引き込み、シリンジポンプに入れます。

約3メートルのヘパリン化PE-10チューブをシリンジに接続し、もう一方の端を尾静脈カテーテルラインに接続します。MRIコイルとラインやケーブル、特に麻酔チューブの位置が絡まっていないか確認してください。

脳の中心が MRI コイル、PET システム、MRI 磁石の中心と揃っていることを確認してください。次に、動物のベッドを磁石のボアに慎重に前方にスライ