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皮質血管と組織を露出させる頭蓋窓を備えた麻酔ラットから始めます。
ラットをイメージングステージに置き、麻酔を供給するマウスピースと酸素レベルを調節する混合ガスに接続されたままであることを確認します。
カメラを脳の表面に焦点を合わせます。広帯域光をフィルターに通して、特定の波長を分離します。
ライトガイドと集光レンズは、フィルタリングされた光を皮質組織に向けます。
組織内では、光は酸素化状態に応じてヘモグロビンに吸収され、細胞によって散乱され、拡散反射率を生成します。
この散乱光をカメラを使用してキャプチャし、積分時間を調整して明るさを最適化します。
回転するフィルターホイールを使用して複数の波長にわたってイメージングを繰り返し、スペクトルデータを収集します。
最後に、光路を遮断して暗い画像をキャプチャし、スペクトル画像からそれを差し引いてノイズを除去します。
これらの処理された画像は、脳血流、酸素化、および組織構造を明らかにします。
まず、ネズミをステージにそっと置き、カメラがネズミの脳の表面に焦点を合わせられるようにステージレベルをゆっくりと調整します。画像取得ソフトウェア内で、[ファイル]メニューから[保存]コマンドを選択して、サンプルと波長に応じて名前を付けて画像をファイルに保存します。
次に、フィルターホイールを回転させてフィルターの位置を変更します。9つの波長のそれぞれで画像取得を繰り返します。次に、ハロゲンランプの光源を消します。シールドプレートを使用して、単色電荷結合デバイスカメラシステムへの光路を遮断します。最後に、[ファイル] メニューから [保存] コマンドを選択し、サンプルを識別するファイル名を選択します。
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