JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 2:44 分 • June 17th, 2025
サンプルホルダーに固定された厚いマウス脳組織スライスを取ります。ホルダーの上に浸漬チャンバーを置き、二酸化炭素に依存しない培地で満たして、組織の水分補給を維持します。
ホルダーを校正済みの計装ナノ圧子のステージに取り付けます。
振り子アームに取り付けられた球面プローブがチャンバーの真上になるように、浸漬チャンバーを位置合わせ
します。
プローブが培地に沈み、組織表面と位置合わせされるまでチャンバーを持ち上げます。
プローブを組織表面に接触させ、振り子を自由に動かし、正確な力を加えるために少し引っ込めます。
振り子が前方に揺れて組織に当たるナノインデンテーション実験を開始します。この衝撃は表面を貫通し、減衰
した高調波挙動
により振動運動を開始します。振り子の変位と速度を測定して、貫通深さ、エネルギー散逸、減衰を評価します。これらの測定により、剛性や弾力性などの組織の機械的特性が明らかになります。
衝撃のくぼみのセットアップが完全に完了したら、培地を吸引し、ブレインスライスを乾燥させます。次に、シアノアクリレート接着剤の薄層を使用して、スライスした脳をアルミニウムサンプルポストに固定します。
次に、サンプルポストの2番目のOリングの上に液体セルをスライドさせます。そして、液体セルに5ミリリットルの二酸化炭素に依存しない培地を満たして、組織を完全に浸します。
レバーアームの先端がバスの上に適切に配置されるまで、バスを負のx方向に動かします。次に、先端が浴槽に完全に沈み、サンプルの前に来るまで、正のz方向に移動します。
サンプルステージコントロールウィンドウを使用して、慎重に接触し、ステージをサンプル表面から約30マイクロメートル離します。
[実験] メニューで [影響] をクリックし、影響実験を設定します。スイング距離のキャリブレーションに基づいて、結果として生じる衝撃速度に直接関連する特定のインパルス荷重を選択します。次に、スケジュールされた実験を実行します。
振り子が後退し、サンプル表面が測定面に移動し続ける場合は、下限界スイッチをオフにします。時間の関数としてのプローブの変位は、ソフトウェアによって記録されます。