0 閲覧数 • 5:04 分 • June 17th, 2025
腰部脊柱管にガイドカニューレを埋め込んだ麻酔ラットから始めます。
カテーテルワイヤーアセンブリをガイドカニューレを通して、脳脊髄液またはCSFが循環するくも膜下腔内に斜めに挿入します。
ガイドカニューレを取り外し、カテーテルをゆっくりと深く進めます。
次に、ワイヤーを完全に取り外し、カテーテルを送達システムに接続します。
滅菌生理食塩水を脊柱管に注入し、通路が通るようにします。
試験化合物溶液をCSFにゆっくりと投与し、続いて滅菌生理食塩水で洗い流します。
デリバリーシステムを取り外し、カテーテルを切断し、その端をヒートシールします。
ヒートシールされたカテーテルを結合組織に縫合し、カテーテルの上の皮膚を閉じます。部位を清掃し、ラットが回復するまで待ちます。
試験化合物は、CSF を介して中枢神経系または CNS を構成する脊髄と脳に広がります。
CNS内では、ニューロンに入り、治療の可能性を提供します。
カテーテルの留置と化合物の注入については、剃った骨盤の上の筋肉の間の2つの自然な穴を特定します。そして、片手でピットを持ち、もう一方の手で背骨を尾側から吻側方向に軽く押して感じ、椎骨の間の最初の大きなくぼみを見つけます。S1椎骨とL6椎骨の間の椎間腔を特定した後、吻側に少し動いてL5椎骨とL6椎骨の間の椎間腔を識別します。
メスを使用して、この部位の皮膚と筋肉嚢に、吻側から尾側方向の正中線に沿って長さ2センチメートル以下の切開を行い、注射部位が切開の中心になるようにします。解剖はさみを使用して、筋肉層が見えるようになるまで結合組織を解剖します。L6腰椎の背側脊椎突起のすぐ外側にある筋肉包に1センチメートルの切開を行います。
ガイドカニューレ針アセンブリを第6腰椎の前方近くに配置し、第6椎骨の前方に沿ってアセンブリを椎間腔に押し込み、針の端が脊柱管を貫通するようにします。
鈍い鉗子を使用して、L6腰椎の背側脊椎突起の位置を特定します。次に、6番目の椎骨の前側に沿って針を椎間腔に押し込みます。
ガイドカニューレを針に沿って所定の位置に押し込みます。針を取り外し、カテーテルワイヤーアセンブリをガイドカニューレに挿入します。カテーテルを脊柱管に対して約45度の角度に傾け、カテーテルの端を脊柱管に約0.3センチメートル
押し込みます。カテーテルのくも膜下腔内先端から約2.5センチメートルのスタイレットワイヤーを取り外し、カテーテルの2センチメートルのマークが筋肉のすぐ下に見えるまでカテーテルを脊柱管に進めます。カテーテルが所定の位置に配置されたら、ガイドカニューレを取り外して、カテーテルとスタイレットワイヤーを所定の位置に残します。
2センチメートルのマークが管の入り口になるまでカテーテルを脊柱管に進め、スタイレットワイヤーを完全に引き抜きます。脳脊髄液が埋め込まれたカテーテルに入るのが視覚化される場合があります。次に、30 ゲージの針端を介して、デリバリー カテーテル アセンブリを移植されたカテーテルの遠位端に接続します。
次に、60マイクロリットルの滅菌生理食塩水を100マイクロリットルの注射器にロードし、30マイクロリットルの試験化合物のボーラスを2番目のシリンジにロードします。生理食塩水注射器をデリバリーカテーテルアセンブリのチューブアダプター端に接続し、20マイクロリットルの滅菌生理食塩水をくも膜下腔内に洗い流します。
すべての生理食塩水が洗い流されたら、生理食塩水注射器をボーラス装填注射器に交換し、30 マイクロリットルの試験化合物を 30 秒間にわたってくも膜下腔内に注入します。すべてのボーラスが送達されたら、ボーラスを充填した注射器を別の生理食塩水を充填した注射器と交換し、さらに 40 マイクロリットルの生理食塩水でカテーテルを洗い流します。
2 回目の生理食塩水が送達されたら、移植されたカテーテルからデリバリー カテーテル アセンブリを取り外し、一対の非常に高温のビーズ滅菌解剖鉗子を使用してチューブをクランプし、移植されたカテーテルを無菌的に切断してヒートシールします。吸収性モノフィラメント縫合糸を使用してヒートシールカテーテルを結合組織に固定し、非吸収性縫合糸を使用して皮膚を閉じます。次に、ガーゼと生理食塩水を使用して皮膚から血液を洗い流し、完全に横になるまで監視しながらラットを加熱したインキュベーターに入れます。