内頸動脈への注入によるマウス脳への標的物質送達

総頸動脈またはCCAが露出し、外頸動脈またはECAと内頸動脈またはICAに分岐する麻酔マウスを取ります。

遠位ECAをしっかりと縫合し、分岐部の近くに緩い結び目を置き、CCAとICAをクリップして血流を制限します。

ECAを切開し、被験物質の入った注射器に接続された毛細管を挿入します。

分岐部とCCAクリップの間の毛細管を前進させ、近位ECAノットを締めて固定します。

ICAクリップを取り外し、体循環を迂回しながら脳に標的に送達するために物質を注入します。

この

物質は血液脳関門を通過して脳実質に到達します。

ECAとICAが露出したら、鉗子を使用して外頸動脈の下に1センチメートルのナイロン縫合糸のセグメントを配置し、次に2番目の1センチメートルのセグメントを配置します。次に、ECAの可能な限り高い位置に永久的な結び目を作ります。

CCA分岐点のすぐ上のECAの可能な限り低い点で、より緩い取り外し可能な結び目を作ります。次に、容器クリップを使用して、CCAを可能な限り低いポイントで閉じ、ICAを閉じます。

外頸動脈に小さな切り込みを入れる前に内頸動脈を適切に閉じると、出血を防ぐことができます。

次に、顕微解剖スプリングハサミを使用して、2つの結び目の間のECAに2ミリメートルの切り込みを入れます。

切り

口を大きくすると注入する物質が漏れる可能性があるため、切り口を小さく保つことが重要です。

注入

する物質が250マイクロリットルのツベルクリン注射器に6インチの毛細管チューブを取り付けて、注入システムを組み立てます。次に、毛細管の先端をECAの切開部にそっと挿入します。分岐部とCCAのクリップの中間に達するまで、先端を前進させ続けます。

下部のECAノットを結びます。結び目が毛細管現象の流動性を可能にするのに十分な緩みであり、漏れを防ぐために十分にきついことを確認します。次に、ICAからクリップを取り外します。シリンジピストンにそっと圧力をかけ、毎秒約10マイクロリットルで物質を注入します。

試験物質を注入した後、クリップをICAに戻します。キャピラリーチューブをそっと取り外し、下部のECAノットを完全に固定します。ICA と CCA からクリップを取り外します。次に、レトラクターまたはティッシュフックと枕を取り外します。

滅

菌生理食塩水で縫合する領域を洗浄し、ナイロン縫合糸を使用して切開部を閉じます。術後の不快感を軽減するために承認された抗炎症剤と鎮痛剤を投与した後、動物を加熱パッドの上のケージに少なくとも1時間置き、回復を監視します。