JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 2:52 分 • August 7th, 2025
を、酸素供給を制御するために入口に接続された密閉された誘導チャンバーに入れます。
反復低酸素プレコンディショニング(RHP)と呼ばれる、低酸素レベルが変動するサイクルにさらします。
酸素が減少するサイクルごとに、マウスの血中酸素レベルが低下し、低酸素状態が生まれます。
脳内の一部のニューロンは徐々に適応し、低酸素環境で生き残るために代謝を調整します。
脳を保護する血液脳関門は安定した状態を保ち、脳の炎症を防ぎます。
マウスをチャンバーから取り外し、回復させます。次に、中大脳動脈を塞ぐことで虚血性脳卒中を誘発します。
これにより、酸素が豊富な血液が脳に到達するのを防ぎ、ニューロンに極度のストレスをかけます。
血液脳関門が破壊され、炎症が引き起
こされます。ただし、RHP で訓練されたニューロンは低酸素条件によりよく適応するため、損傷に対する耐性が高くなり、機能が維持されます。
これは、RHP がニューロンの適応を助け、虚血性脳卒中や酸素欠乏によって引き起こされる脳損傷を軽減することを示唆しています。
まず、マウスを 8% と 11% の酸素を同時に曝露する RHP グループと、21% の酸素を同時に曝露する対照群の 2 つのグループに分けます。各ケージの上部フィルター蓋を取り外し、食品と水のボトルをそのままにしたケージを、それぞれの酸素タンクに接続されたチャンバーに入れます。チャンバーの蓋を閉じて固定します。
タンクのメインガスバルブを開き、各誘導チャンバーの初期流量を毎分2リットル(LPM)に設定します。5分間の露光後、残りの露光の間、流量を1LPMに減らします。露光の最後に、流量をゼロLPMに減らし、タンクのガスバルブを閉じます。
チャンバーの蓋を開き、各ケージのフィルター上蓋を元に戻します。次の低酸素曝露まで、ケージを標準ハウジングに入れます。使用後は、各誘導チャンバーに消毒剤と消臭剤をスプレーしてください。
プロトコルの2週間にわたって、RHPマウスと対照マウスの両方を同じ時間に曝露します。次に、本文に記載されているように、一過性中大脳動脈閉塞、またはTMCAOを実行します。