神経膠芽腫に対する免疫担当マウスモデルの生物発光イメージング

シフェラーゼ発現腫瘍細胞を脳組織に移植した麻酔免疫担当マウスから始めます。

マウスには、ルシフェラーゼ酵素の基質であるルシフェリンも投与されます。

ルシフェリンは血流中を循環し、血液脳関門を通過し、ルシフェラーゼ発現腫瘍細胞に到達します。

ルシフェラーゼ発現腫瘍細胞からの生物発光シグナルを測定するためのパラメーターを使用してイメージングシステムをセットアップします。

麻酔をかけたマウスを生物発光イメージングチャンバーに入れ、画像を取得します。

ルシフェリンは細胞内に入り、ルシフェラーゼ酵素と相互作用し、腫瘍細胞数に比例した生物発光シグナルを生成します。

関心領域ツールを使用して、シグナル領域を定義し、生物発光シグナルを定量化します。

腫瘍の増殖を評価するには、数日間にわたってイメージングを繰り返し、同じ領域からの発光シグナルを測定します。

時間が経つにつれて、ルシフェラーゼを発現する細胞が増殖し始め、神経膠芽腫または腫瘍を形成します。

発光シグナルの増加は、神経膠芽腫の増殖を確認します。

頭蓋内腫瘍の成長を画像化するには、まず、先ほど示したようにイメージングステーションを初期化します。

次に、テールピンチによる適切な鎮静レベルを確認した後、露光時間に自動を選択することを除いて、先ほど示したようにイメージングシステムのパラメータを設定します。イメージングシステムの準備ができたら、マウスをイメージングステーションに置き、取得を選択してルシフェラーゼ発現の画像を取得します。画像が正常に取得されたら、ツールパレットから関心領域ツールを選択し、円のアイコンから自動を選択します。

信号の領域を囲んで、関心のある領域を定義します。次に、ステラジアン/平方センチメートルあたりの1秒あたりの光子の単位として領域の測定値を取得します。最後に、マウスをイメージングチャンバーから取り出し、腫瘍を保有する動物が完全に回復するまで監視します。