マウス脳におけるヒト神経前駆細胞のin vivo生物発光イメージング

遺伝子

組み換えヒト神経前駆細胞(NPC)を脳に注射した免疫不全マウスから始めます。

これらの細胞は、光を生成する酵素であるルシフェラーゼを発現します。

ルシフェラーゼの基質であるルシフェリンをマウスに腹腔内注射します。

マウスに麻酔をかけ、目に眼科用潤滑剤を塗布して乾燥を防ぎ、頭を剃って画像を撮ります。

イメージングの条件があらかじめ設定されたイメージングチャンバー内でマウスを腹臥位に配置します。

ルシフェリンは血流中を循環し、内皮細胞を通過して脳組織に入り、移植されたNPCに到達します。

細胞内では、ルシフェリンがルシフェラーゼと反応し、生物発光を生成します。

イメージングシステムは、NPC移植部位から放出されるこれらの生物発光信号をキャプチャします。

これらの生物発光シグナルは、ヒトNPCのマウス脳への移植の成功を確認します。

ルシフェリンを腹腔内に注射し、5分後にイソフルランを連続供給して動物を麻酔します。従来のシェーバーを使用して、鎮静した動物の頭の部分を剃ります。動物をイメージングチャンバーに入れ、ルシフェリン注射の15分後にコントロールパネルの取得をクリックしてイメージングを開始します。