Name: 回転壁容器バイオリアクター由来3D上皮細胞モデルの培養とその応用 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 22 s
Description: 学ぶ回転壁容器バイオリアクターを用いた3D上皮細胞培養法。マイクロキャリアビーズ上で細胞凝集体を形成し、in vivo様のオルガノタイプモデルを構築する技術を解説。組織工学や感染症研究への応用も紹介します。

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著者は、彼のタンパク質分析のための彼女の技術的専門知識とアンドリュー·ラーセンのためにブルックイェルムに感謝します。この作品は、代替の研究開発財団（MMHK）グラントとNIH NIAID性感染症と局所殺ウイルス剤共同研究センターIU19 AI062150-01（MMHK）によって一部で賄われていた。我々は感謝して図の再利用のための生殖の生物学を認める。

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<li>Hjelm, B. E., Berta, A. N., Nickerson, C. A., Arntzen, C. J., Herbst-Kralovetz, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+a+three-dimensional+organotypic+human+vaginal+epithelial+cell+model%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of a three-dimensional organotypic human vaginal epithelial cell model.</a> Biol. Reprod. 82, 617-627 (2009).</li>
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<li>Carvalho, H. M., Teel, L. D., Goping, G., O'Brien, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+three-dimensional+tissue+culture+model+for+the+study+of+attach+and+efface+lesion+formation+by+enteropathogenic+and+enterohaemorrhagic+Escherichia+coli%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A three-dimensional tissue culture model for the study of attach and efface lesion formation by enteropathogenic and enterohaemorrhagic Escherichia coli.</a> Cell Microbiol. 7, 1771-1781 (2005).</li>
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<li>Carterson, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A549+lung+epithelial+cells+grown+as+three-dimensional+aggregates%3A+alternative+tissue+culture+model+for+Pseudomonas+aeruginosa+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">A549 lung epithelial cells grown as three-dimensional aggregates: alternative tissue culture model for Pseudomonas aeruginosa pathogenesis.</a> Infection and Immunity. 73, 1129-1140 (2005).</li>
<li>Smith, Y. C., Grande, K. K., Rasmussen, S. B., O'Brien, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+three-dimensional+organoid+model+for+evaluation+of+the+interaction+of+uropathogenic+Escherichia+coli+with+terminally+differentiated+human+urothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Novel three-dimensional organoid model for evaluation of the interaction of uropathogenic Escherichia coli with terminally differentiated human urothelial cells.</a> Infection and Immunity. 74, 750-757 (2006).</li>
<li>Sainz, B., TenCate, V., Uprichard, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+Huh7+cell+culture+system+for+the+study+of+Hepatitis+C+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Virol+J%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional Huh7 cell culture system for the study of Hepatitis C virus infection.</a> Virol J. 6, 103(2009).</li>
<li>Duray, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasion+of+human+tissue+ex+vivo+by+Borrelia+burgdorferi%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Invasion of human tissue ex vivo by Borrelia burgdorferi.</a> J. Infect Dis. 191, 1747-1754 (2005).</li>
<li>Margolis, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphocyte+trafficking+and+HIV+infection+of+human+lymphoid+tissue+in+a+rotating+wall+vessel+bioreactor%5BTitle%5D)+AND+%22AIDS+Res.+Hum.+Retroviruses%22%5BJournal%5D)">Lymphocyte trafficking and HIV infection of human lymphoid tissue in a rotating wall vessel bioreactor.</a> AIDS Res. Hum. Retroviruses. 13, 1411-1420 (1997).</li>
<li>Reed, L. J., Muench, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+of+estimating+fifty+percent+endpoints%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Hyg%22%5BJournal%5D)">A simple method of estimating fifty percent endpoints.</a> Am. J. Hyg. 27, 493-497 (1938).</li>
<li>Beer, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+preclinical+testing+of+nonoxynol-9+as+potential+anti-human+immunodeficiency+virus+microbicide%3A+a+retrospective+analysis+of+results+from+five+laboratories%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrob+Agents+Chemother%22%5BJournal%5D)">In vitro preclinical testing of nonoxynol-9 as potential anti-human immunodeficiency virus microbicide: a retrospective analysis of results from five laboratories.</a> Antimicrob Agents Chemother. 50, 713-723 (2006).</li>
<li>Hickey, D. K., Patel, M. V., Fahey, J. V., Wira, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+and+adaptive+immunity+at+mucosal+surfaces+of+the+female+reproductive+tract%3A+stratification+and+integration+of+immune+protection+against+the+transmission+of+sexually+transmitted+infections%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Reprod.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Innate and adaptive immunity at mucosal surfaces of the female reproductive tract: stratification and integration of immune protection against the transmission of sexually transmitted infections.</a> J. Reprod. Immunol. 88, 185-194 (2011).</li>
<li>Andersch-Bjorkman, Y., Thomsson, K. A., Holmen Larsson, J. M., Ekerhovd, E., Hansson, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+scale+identification+of+proteins%2C+mucins%2C+and+their+O-glycosylation+in+the+endocervical+mucus+during+the+menstrual+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell+Proteomics%22%5BJournal%5D)">Large scale identification of proteins, mucins, and their O-glycosylation in the endocervical mucus during the menstrual cycle.</a> Mol. Cell Proteomics. 6, 708-716 (2007).</li>
<li>Barrila, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+cell+culture+models%3A+Innovative+platforms+for+studying+host-pathogen+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Microbiology%22%5BJournal%5D)">3D cell culture models: Innovative platforms for studying host-pathogen interactions.</a> Nature Reviews Microbiology. 8, 791-801 (2010).</li>
<li>Vamvakidou, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneous+breast+tumoroids%3A+An+in+vitro+assay+for+investigating+cellular+heterogeneity+and+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomol+Screen%22%5BJournal%5D)">Heterogeneous breast tumoroids: An in vitro assay for investigating cellular heterogeneity and drug delivery.</a> J. Biomol Screen. 12, 13-20 (2007).</li>
<li>Jin, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+three-dimensional+tissue-engineered+bone+constructs+under+microgravity-simulated+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Artif+Organs%22%5BJournal%5D)">Establishment of three-dimensional tissue-engineered bone constructs under microgravity-simulated conditions.</a> Artif Organs. 34, 118-125 (2010).</li>
<li>Vertrees, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+three-dimensional+model+of+lung+cancer+using+cultured+transformed+lung+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Biol+Ther%22%5BJournal%5D)">Development of a three-dimensional model of lung cancer using cultured transformed lung cells.</a> Cancer Biol Ther. 8, 356-365 (2009).</li>
<li>Hwang, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+murine+embryonic+stem+cells%2C+alginate+encapsulation%2C+and+rotary+microgravity+bioreactor+in+bone+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The use of murine embryonic stem cells, alginate encapsulation, and rotary microgravity bioreactor in bone tissue engineering.</a> Biomaterials. 30, 499-507 (2009).</li>
<li>Pei, M., He, F., Kish, V. L., Vunjak-Novakovic, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+of+functional+cartilage+tissue+using+stem+cells+from+synovial+lining%3A+a+preliminary+study%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Orthop+Relat.+Res%22%5BJournal%5D)">Engineering of functional cartilage tissue using stem cells from synovial lining: a preliminary study.</a> Clin. Orthop Relat. Res. 466, 1880-1889 (2008).</li>
</ol>

著者らは、開示することは何もありません。

ここに提示RWVバイオリアクター技術の活用は、より生理学的に関連する器官の細胞培養モデルに、現在の細胞培養系を前進させる能力を研究者に提供することがあります。 RWVバイオリアクター細胞培養システムは、タイトジャンクション、ムチン産生、細胞外のプロセス（すなわち微）、および細胞の極性を含む生体のような特性にして3-Dの細胞凝集体を形成する細胞を可能にする低剪断の微小環境を提供します。ここで提示されたデータと例の大半はRWVシステムに成長した膣上皮細胞を使用しているしかし、RWVシステムも小腸および大腸、肺、膀胱、肝臓、扁桃上皮細胞を含む培養他の上皮細胞の種類に使われている3-D器官モデル1、7-13、18を形成する 。さらに、このシステムは、上皮細胞以外の培養細胞の種類に使用されており、複雑な、multicelの現在開発中lular器官培養モデルは、進行中の2、18である。 ここで説明するプロトコルは、ガイドとして使用することを意図されており、目的の細胞タイプに基づいて変更する必要...

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名前 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> コメント </td></tr><tr><td>のAlexa Fluor®488 </td><td>インビトロジェン</td><td> A21131 </td><td> 1:500希釈で使用</td></tr><tr><td> FACSDiva </td><td> BD </td><td></td><td>フローサイトメーター</td></tr><tr><td> β-tublin抗体</td><td>カルビオケム</td><td> 654162 </td><td> 1:5000希釈で使用</td></tr><tr><td>バイオプレックス2000 </td><td> BioRad社</td><td> 171-000205 </td><td> V5ソフトウェア</td></tr><tr><td>バイオリアクターとコンポーネント</td><td> Synthecon </td><td> RCCS-4 </td><td></td></tr><tr><td>セルストレーナー</td><td> BDファルコン</td><td> 352340 </td><td> 40μmの細孔径</td></tr><tr><td>コニカルチューブ（50ml）に</td><td>コー​​ニング</td><td> 5-538-60 </td><td></td></tr><tr><td>カバースリップ</td><td> VWR </td><td> 48366067 </td><td></td></tr><tr><td>サイトカインビーズアレイキット</td><td> BioRad社</td><td>カスタム人間キット</td><td></td></tr><tr><td> Cytodexビーズ</td><td>シグマ</td><td> C3275 </td><td></td></tr><tr><td> DPBS </td><td>ギブコ</td><td> 14190 </td><td></td></tr><tr><td> EDTA </td><td>シグマ</td><td> ED-500G </td><td>エチレンジアミン四酢酸</td></tr><tr><td>上皮に特異的な抗体（ESA） </td><td>ケミコン</td><td> CBL251 </td><td> 1:50希釈で使用</td></tr><tr><td>ウシ胎児血清（FBS） </td><td>ギブコ</td><td> 10438 </td><td>不活化熱</td></tr><tr><td> HARV（使い捨て） </td><td> Synthecon </td><td> D-405 </td><td></td></tr><tr><td>塩酸</td><td>シグマ</td><td> 258148 </td><td> 37パーセント</td></tr><tr><td>インボルクリン抗体</td&gt; <td>シグマ</td><td>私は9018 </td><td></td></tr><tr><td>顕微鏡スライド</td><td> VWR </td><td> 16004-368 </td><td></td></tr><tr><td> MTT試薬</td><td> MPバイオメディカル、LLC </td><td> 194592 </td><td> 3 - （4,5 - Dimethylthiazolyl 1-2）-2,5 - ジフェニルテトラゾリウムブロミド</td></tr><tr><td> MUC1抗体（顕微鏡） </td><td>サンタクルス</td><td> SC-7313 </td><td> 1:50希釈で使用</td></tr><tr><td> MUC1抗体（フローサイトメトリー） </td><td> BD Pharmingen社</td><td> 559774 </td><td>また、CD227と呼ばれる、テストあたり20μLを使用し</td></tr><tr><td> パラホルムアルデヒド </td><td>電子顕微鏡学</td><td> 15710 </td><td> DPBSで4％に希釈し</td></tr><tr><td>ペトリ皿（小） </td><td> BDファルコン</td><td> 353002 </td><td></td></tr><tr><td>フィルタ付きポリスチレンチューブ</td><td> BDファルコン</td><td> 352235 </td><td></td></tr><tr><td&gt;ポリスチレンフローチューブ</td><td> BDファルコン</td><td> 352058 </td><td></td></tr><tr><td> PR抗体</td><td> DAKO </td><td> M3569 </td><td> 1:100希釈で使用</td></tr><tr><td>ゴールドを長引かせる</td><td>インビトロジェン</td><td> P36931 </td><td> DAPIと取り付けメディア</td></tr><tr><td> RNeasyミニキット</td><td>キアゲン</td><td> 74903 </td><td></td></tr><tr><td>ドデシル硫酸ナトリウム</td><td>シグマ</td><td> 71725 </td><td></td></tr><tr><td>滅菌袋</td><td> VWR </td><td> 11213-035 </td><td></td></tr><tr><td>コック（片道） </td><td>メデックス</td><td> MX5061L </td><td></td></tr><tr><td>シリンジ（10ml）に</td><td> BD </td><td> 309604 </td><td>ルアーロックチップ</td></tr><tr><td>シリンジ（5mL）を</td><td> BD </td><td> 309603 </td><td>ルアーロックチップ</td></tr><tr><td>トリパンブルー</td><td>インビトロジェン</td><td>T10282 </td><td></td></tr><tr><td> VP5抗体</td><td>サンタクルス</td><td> SC-13525 </td><td> HSV-2抗体クローン6F10、1:5000希釈で使用</td></tr></tbody></table>

回転壁容器バイオリアクター由来3d上皮細胞モデルの培養とその応用

Culturing and Applications of Rotating Wall Vessel Bioreactor Derived 3D Epithelial Cell Models

身体の経験、そのアーキテクチャに影響を与える環境条件、細胞間の通信、および全体的な関数の細胞や組織。 in vitroでの細胞培養モデルで正確に目的の組織を模倣するためには、文化の発展環境が考慮すべき重要な側面です。一般的に使用される従来の細胞培養システムのフラット2次元（2-D）不浸透性の表面に上皮細胞を伝播します。多くの従来の細胞培養系から学んだされていますが、多くの知見は、潜在的に生理学的に関連する微小環境の欠如の結果として、人間の臨床試験または組織外植片で再現可能ではありません。 ここでは、革新的な回転壁容器（RWV）バイオリアクター技術を用いて、2次元細胞培養の培養条件の境界の多くを克服する培養系を説明します。我々と他の器官RWVから派生したモデルはstructurを再現することが示されている同様に人間の外植組織1-6外部からの刺激への電子、機能、本物の人間の反応。 RWVバイオリアクターは、低生理流体剪断条件下で上皮細胞の増殖を可能にする懸濁培養システムです。バイオリアクターは、2つの異なる形式で、高アスペクト回転容器（HARV）または彼らは曝気ソースによって異なっている低速回転側容器（STLV）に来る。上皮細胞は、多孔質、コラーゲンコートしたマイクロビーズ（図1A）との組み合わせで、選択したバイオリアクターに追加されます。細胞がバイオリアクターの定数自由落下（図1B）の間に成長の足場としてビーズを利用しています。バイオリアクターによって提供された微小環境は細胞は、しばしば標準的な2-D培養条件（図1D）の下で観察されなかっ生体に似た特性で表示（3-D）は、3次元凝集体を形成することができます。これらの特性は、タイトジャンクショ​​ン、MUCが含まれていin vivoでのタンパク質の局在化、およびその他の上皮細胞型固有のプロパティで私たちの生産、基底/心尖部の向き、。 完全に分化した3-D集計に上皮細胞の単層からの進行は、細胞の1型、7月13日に基づいて変わります。バイオリアクターからの定期的なサンプリングでは、上皮細胞凝集体形成、細胞分化マーカーと生存率（図1D）のモニタリングが可能になります。一度細胞分化および凝集体形成が確立され、細胞がバイオリアクターから採取され、2-D細胞について行った同様のアッセイは、いくつかの考慮事項（図1E-G）で3-D集約に適用することができます。本研究では、我々はどのようにRWVバイオリアクターシステムと潜在的なアッセイおよび3-D集計を実行することができます分析の様々な文化の3-D上皮細胞凝集体への詳細な手順について説明します。これらの分析は含まれていますが、M /構造が、これらに限定されないorphological分析（共焦点、走査型および透過型電子顕微鏡）、サイトカイン/ケモカインの分泌と細胞内シグナル伝達（サイトメトリービーズアレイおよびウェスタンブロット解析）、遺伝子発現解析（リアルタイムPCR）、薬物/毒物分析と宿主 - 病原体相互作用。これらのアッセイの利用は、メタボロミクス、トランスクリプトミクス、プロテオミクス、他のアレイ·ベースのアプリケーションなど、より詳細なと広大な研究のための基盤を設定します。私たちの目標は、多様な科学的興味を持つ研究者によって使用されるように容易な、堅牢なシステムでは、 生体組織の人間を再現器官の3次元モデルを生成するために、培養ヒト上皮細胞の非従来型の手段を提示することである。

上皮細胞が3-D細胞凝集体の形成をもたらす生理的条件下で成長することができ、回転細胞培養システムが記載されています。凝集体は、ディスプレイを生成<emin vivoでの&gt;</em&gt;のような特性は、従来の培養モデルで観察され、科学的な調査の多数のためのより正確な器官のモデル系としては機能しません。

回転壁容器バイオリアクター由来3D上皮細胞モデルの培養とその応用

体内の細胞や組織は、その構造、細胞間相互作用、および全体的な機能に影響を及ぼす環境条件にさらされています。

この非従来型のプロトコルでは、ヒトの生体内組織を再現する器官型3Dモデルへとヒト上皮細胞を培養するための、簡便で堅牢なシステムを提示します。まず、上皮細胞を組織培養フラスコ内でコンフルエントな単層になるまで培養して回収し、STLVバイオリアクター内でマイクロキャリアビーズと混合します。プラットフォーム上でSTLVを回転させて低流体剪断力の一定な自由落下環境を作り出すことで、細胞をビーズに接着・増殖させ、96時間後およびその後はおよそ1日ごとに細胞凝集体を形成させます。凝集体の形成後、細胞代謝を維持するためにSDLVの培地を補充します。凝集体の形成と細胞分化が完了した後は、週に一度、光学顕微鏡で試料の画像を撮影し、分化の進行状況をモニターします。得られた凝集体を、後続の実験的解析およびアッセイのために播種します。最終的に、このシステムを用いることで、多種多様な科学的研究に適した、生体内に近い臓器様モデルシステムを構築することが可能です。従来の細胞培養などの既存の手法に対する本手法の主な利点は、上皮細胞が分化し、組織のような凝集塊として極性を持つため、形態学的および機能的に実際の人組織と同様に振る舞うことです。この3Dモデルシステムは、上皮細胞の生物学、宿主と病原体の相互作用、およびシステムに導入される可能性のある細胞種間の複雑な相互作用について、さらなる知見を提供します。Dr.Andrea Radkey。私の研究室のポストドクターが、低回転横方向血管バイオリアクターの除染手順について実演します。開放ポートをルアーキャップで塞ぎます。STLVに95% ethanolを満たし、24時間平衡化させます。エタノールを除去した後、滅菌蒸留水で満たし、ベンダー提供のツールを用いて24時間インキュベートします。すべてのネジを緩め、STLVからセンタープラグを取り出します。これらを滅菌ポーチに入れ、110 °Cで20分間オートクレーブします。STLVを再組み立てし、滅菌性を確保するために除染を繰り返します。次に、STLVのネジを締めます。各ポートに、滅菌済みのワンウェイ止水栓を取り付けます。次に、10 mLおよび5 mLのルアーロックシリンジからプランジャーを取り外し、プランジャーを包装紙の中で保管します。無菌状態を維持するため、シリンジをストップコックにねじ込みます。STLVが満たされ、5 mLシリンジに充填され始めるまで、10 mLシリンジにDPBSを注入してください。その後、各シリンジに滅菌プランジャーを挿入し、シリンジのプランジャーを交互に操作して、バイオリアクター内の残存気泡を除去します。ストップコックを閉じ、STLVを回転式垂直プラットフォームに取り付けます。50 milliliterのコニカルチューブ内で漏れがないか確認するため、最低24時間回転させます。15

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Research

JoVE Journal

Biology

生物学

主に単層培養 -  - 多くの場合、分化初代細胞は比較的短い寿命を持っていて、培養中に脱分化している欠点に苦しんで体外培養システムにおける過去の多くの。結果として、彼らの臓器特異的な機能のほとんどが急速に失われていた。従って、in...

インタビュー：幹細胞研究のためのバイオリアクターと浮上し、修正3D -足場

伝統的な、二次元細胞培養技術は、しばしば、分化マーカー、サイトカインおよび増殖因子に関する変更特性になる。...

ヒト細胞培養のための回転細胞培養システム：モデルとしてのヒト栄養膜細胞

培養中の細胞の機能的な動作は、3次元培養環境16-21様インビボでより中で培養することによって改善することができます。この原稿は、in vivo様の哺乳動物組織培養のための中空繊維バイオリアクターシステムのセットアップと操作について説明しています。...

用中空糸バイオリアクター<em&gt;インビボ</em&gt;哺乳動物の組織培養様

三次元（3-D）環境中で増殖する細胞は、2-D環境（ 例えば 、フラスコまたはディッシュ）で細胞培養上顕著な改善を示します。ここでは、回転-壁容器（RWV）バイオリアクターが提供する微小重力下で培養ヒト腸粘膜の多細胞3次元器官モデルの開発について説明します。...

微小重力下で増殖させたヒト腸粘膜の多細胞三次元器官型モデルの開発

この原稿は、細胞外マトリックスに囲まれた定義された幾何学的形状の3次元（3D）上皮組織の均一な配​​列を操作するソフトリソグラフィーベースの技術が記載されています。この方法は、細胞の種類および実験の文脈の多種多様に適していると同一の​​複製のハイスループットスクリーニングを可能にします。...

細胞外マトリックス内に埋め込まれたエンジニアリング三次元上皮組織

プロトコルでは、回転楕円体の perfusable...

マイクロ流体デバイスにおける組織モデルと perfusable の血管ネットワーク

このプロトコルの目的は、多細胞スフェロイドとして乳房上皮細胞を、薬物スクリーニング研究に使用できる3D乳房内皮共培養モデルを迅速に作成するために、多細胞性スフェロイドとして直接バイオプリントすることです。...

内皮ネットワーク上の3D多細胞乳房スフェロイドの直接バイオプリンティング

このプロトコルは、微小重力下でのアメロブラスト様細胞の培養と3D増殖を行い、細長い偏光形状とエナメル質特異的タンパク質発現を維持する方法を提示します。微小重力下での歯周工学コンストラクトや肺器官の培養のための培養条件についても記載する。...

微小重力下での歯科および呼吸器細胞および臓器の増殖

この論文では、新しく設計された3Dプリントインサートを共培養のモデルとして提示し、内皮細胞とケラチノサイト間のパラクリン細胞間コミュニケーションの研究を通じて検証します。...

簡単な2Dおよび3D細胞培養を可能にするように設計された革新的な3Dプリントインサート

ここでは、ナノファイバー膜ベースの2層システムで線維芽細胞を培養した上皮細胞が、膜に安定して付着して増殖する様子を示します。...

ナノファイバー膜を用いた上皮細胞の三次元共培養モジュールの確立

学ぶ回転壁容器バイオリアクターを用いた3D上皮細胞培養法。マイクロキャリアビーズ上で細胞凝集体を形成し、in vivo様のオルガノタイプモデルを構築する技術を解説。組織工学や感染症研究への応用も紹介します。

回転壁容器バイオリアクター由来3D上皮細胞モデルの培養とその応用

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