Name: イメージンググリオーマ開始ポリッシュと補強シン頭蓋骨頭蓋窓スルー (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-20T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 44 s
Description: 学ぶ磨き補強薄頭蓋骨窓を用いたマウス脳内グリオーマ発生の可視化法。GFP標識グリオブラストーマ細胞を注射し、2光子顕微鏡で縦断観察することで、腫瘍幹細胞と血管内皮細胞の相互作用を解明する。

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この作品は、ジャクソン研究所がんセンターパイロットグラントとメインがん財団によってサポートされています。

1。プロトコル<ol><li> 0.1 mgのケタミンと体重1グラム当たりキシラジンの0.01 mgの用量でケタミンおよびキシラジンでマウスを麻酔。カルプロフェン（体重1グラム当たり0.005 mg）を、鎮痛のために使用され、術前に投与される。 </li><li>歯科用ドリルビットを含む外科的なツールのすべては、オートクレーブで蒸気滅菌されています。バッチ手術が実行される場合には、手術器具の先端が、後続の各手術前にガラスビーズ滅菌器（ファイン科学ツールFST 250）で再滅菌しなければならない。 </li><li>マウスはつま先のピンチへの応答の有無によって評価麻酔の外科平面に達していると、それは、その後〜37℃の体温を維持するために加熱されたパッドの上に置かれる綿のパッド上に配置され麻酔の深さは、手術中に頻繁に監視されています。 </li><li>毛皮はほぼ三角形の面積の背側頭部〜鼻孔に尾3ミリメートルから削除され、CEに尾側に延びているrvical椎骨。眼軟膏は、脱水や刺激から守るために目に適用されます。 </li><li>マウスは腹recumbancyに配置され、皮膚を外科ヨウ素、70％エタノール、滅菌綿棒で消毒されています。頭蓋骨の前頭葉と頭頂骨の背側面を覆う皮膚の0.8×1.0 cm商品フラップは細かいハサミを用いて除去する。 </li><li>外用鎮痛、0.5％リドカイン、​​傷の周囲の骨膜と露出組織に局所的に適用されます。骨膜を穏やかにメスの刃で頭蓋骨を削って除去され、これが骨に付着するシアノアクリレート系接着剤を助けるでしょう。 </li><li>興味のある皮質領域はマーカーで頭蓋骨に概説されています。関心領域は、基礎となる大型船への損傷を避けるために、頭蓋骨の縫合線の上に位置するべきではありません。 </li><li>シアノアクリレート系接着剤の薄層を除いてserosanguinous流体の漏出を防止するために、創傷の縁に適用され、頭蓋骨のことです関心のある領域。 </li><li>光によって活性化された歯科用セメントは、頭蓋骨を封止するための我々のプロトコルで使用されています。歯科用セメントを塗布する前に、間伐のために意図された領域以外のすべての露出頭蓋骨をプライマーとし、続いて光活性歯科用セメントキットから接着剤で処理されます。接着剤が乾燥したら、光によって活性化された歯科用セメントは、頭蓋骨をカバーするために適用されます。その後の手術とイメージングのためのマウスの頭部を安定させるために、滅菌した＃00から90六角ナットを薄くする領域からの距離に歯科用セメントに埋め込まれています。光によって活性化された歯科用セメントの使用は、私たちは全体の手順を完了するために急いでしなくても、頭蓋骨を準備することができます。頭蓋骨に歯科用セメントの準備が完了すると、歯科用セメントは、可視光で硬化させる。 </li><li>歯科用セメントを硬化させた後、定位固定装置からヘッドピースホルダーは、＃00から90ネジを使用して、マウスの頭の上に六角ナットに取り付けられている。 </li><li> DR室温のop、0.9％滅菌生理食塩水を薄くするために頭蓋骨の領域に適用されます。実体顕微鏡の助けを借りて、高速マイクロドリルは、関心のある領域にわたって頭蓋骨の円形領域（通常は直径〜4,5 mm）を薄くするために使用されます。掘削と掘削面積に生理食塩水のアプリケーションは、基礎となる脳組織への熱損傷を避けるために、間伐手順の間に断続的に行われている。生理食塩水は、熱を吸収し、また、骨を柔らかくするのに役立ちます。 </li><li>マウスの頭蓋骨は海綿骨の厚い層を挟んで、緻密骨の2つの薄層を含む。緻密骨と海綿骨の大部分の外部層は、ドリルを使用して除去される。 </li><li>海綿骨の大部分が除去された後、海綿骨内の残りの空洞が掘削は内部コンパクト骨層に近づいていることを示し、解剖顕微鏡下で見ることができます。この段階では、頭蓋骨の厚さは依然として以上50μm以下である必要があります。間伐頭蓋骨は次のようになります非常に薄い（〜20μm）と滑らかな製剤を得るために慎重に続けた。 </li><li>頭蓋骨の所望の厚さ（〜20μm）を達成されたら、頭蓋骨が最初の約10分間、ダイヤモンドペーストを使用したカスタムメイドのシリコーンホイップ（6から15μm）を用いて研磨されています。ダイヤモンドペースト研磨は2つの目的があります。まず最初に、それはさらにそれによって、基礎となる脳組織への偶発的な損傷を回避すること、間伐頭蓋骨に圧力をかけることなく頭蓋骨を薄く。ファイングレイン·スズ酸化物は、さらに頭蓋骨の研磨に使用される前に、第二に、それは薄くなった頭蓋骨の初期研磨工程として機能します。 </li><li>ダイヤモンドペースト研磨後、薄くなった頭蓋骨は、約10分間酸化スズで研磨されています。頭蓋骨を研磨したら薄くなった頭蓋骨がきれいに表示されるまで、酸化スズは、生理食塩水で流されています。 </li><li>頭蓋窓が in vivoイメージングに縦に使用する場合は、このステップで、洗浄薄い頭蓋骨領域を乾燥させる。クリアの小滴シアノアクリレート系接着剤は頭蓋窓を密閉するために適用されます。間伐頭蓋骨とカバーガラスの間にシアノアクリレート系接着剤の層はできるだけ薄くする必要があります。 </li><li>注射はポート頭蓋ウィンドウの作成後に実行する必要がある場合は、この段階では、26ゲージの注射針は、洗練された薄頭蓋骨ウィンドウの片側に小さな開口部を作成するために使用されます。この開口はGBM細胞注入のために使用されます。 </li><li>直径約50μmを開く先端で滅菌ガラスピペット、ピペットプラーを使用してプルアップされています。このピペットはGBM細胞注入のために使用されるでしょう、そして、マイクロマニピュレータ上にロードされます。ピペットはGBM細胞注射部位は、最終的な撮像部位から離れるとなるように、30度の角度でロードされます。ピペットの先端は、解剖顕微鏡下で除去する。 GBMの細胞懸濁液をシリンジポンプを用いて吸引することによりピペットにフロントロードされます。 </li><li>注入用ピペットはGBM細胞がロードされたら、マウスが目の下で後方に移動さ電子顕微鏡。注入用ピペットは頭蓋窓にある小さい開口部に向かって下降し、最終的にマイクロマニピュレーターを用いて開口部を通って脳に挿入されます。 GBMの細胞懸濁液1μlを脳脳表面100から200ミクロン（：0.1μl/分、持続時間：10分回転数）に注入される。 </li><li>頭蓋骨を乾燥させ、明確なシアノアクリレート系接着剤の小滴は、乾燥頭蓋骨に適用され、3ミリサイズ＃1のカバーガラス片が薄く、洗練された頭蓋骨領域に接着されている。カバースリップと隣接する歯科用セメントの間の空間は、シアノアクリレート接着剤で封止されている。 </li><li>手術後、マウスは1ミリリットル暖かい滅菌生理食塩水を皮下注射していると完全に麻酔から回復するまで体温を維持するために補足的な暑さを備えている。 </li><li>イメージングのために、マウスは0.1 mgのケタミンと体重1グラム当たりキシラジンの0.01 mgの用量でケタミンおよびキシラジンで麻酔する。マウスはカスタム定位フレームを使用して固定化されている顕微鏡下で。マウスはケタミンの反復使用と依存の兆候を示すようにin vivoイメージングの繰り返しが日常的に行われている場合、イソフルランは、より良いオプションになります。 </li></ol> 2。代表的な結果成功したポート頭蓋窓手術は頭蓋窓が数週間から数ヶ月のための明確なままにすることができます。後方散乱光を用いて可視化として、 図1はポート頭蓋窓の下に血管系を示しています。これらの血管系の画像は、繰り返しイメージングのための同じ脳領域を特定するための目印として用いた。血管系の内皮細胞およびGBM細胞の両方を可視化するために、我々はB6.Cg-GT（ROSA）26Sor TM9（CAG-tdTomatoと血管内皮細胞をラベルするB6.Cg-TG（テック-CRE）1Ywa / Jマウスを、交差させる）Hze / Jマウス、および赤色蛍光タンパク質tdTomatoで標識された血管内皮細胞と生成されたマウス。そして、私たちは、これらマイル上のポートの開頭手術を行ったCE、および頭蓋窓の側の小さな開口部を通って、自分の脳にGFP標識GBM細胞を注入した。次に、注射したマウスで縦方向に二光子イメージング生体内で行った。レーザー励起波長は、GFPとtdTomato両方の励起につながっ910 nmで設定されていました。二光子イメージングは同時赤色/緑色蛍光検出能力のための2つの検出器で特注の二光子レーザー走査顕微鏡で行った。 図2は、血管系の近くに注入されたGBM細胞から神経膠腫開始の in vivoでの例に示します。ポート頭蓋窓もin vivoイメージングタイムラプス慢性ための優れた選択肢です。 図3に示すポートの手術をせずにマウスの皮質切片のGFAP染色、ポート手術後のマウスの7日間、マウス7日、次のポートの手術と生理食塩水を注入。それは手術をせずにマウスとPOR付マウスその画像からも明らかであるTSの手術は脳内浸透と生理食塩水の注射をピペットに起因し、生理食塩水注射後のに対し、グリオーシスは、マウスの脳組織で観察される、グリオーシスを持っていない。この結果は、神経膠症は頭蓋窓は、ここで説明ポートが一般的に&quot;開かれた頭蓋骨&quot;慢性頭蓋ウィンドウに関連付けられている神経膠症につながらないことを独立した検証を提供して、ポート頭蓋窓の下では発生しませんを示しています。 図4は高解像度を示していますPortsウィンドウもin vivoイメージングの高分解能のための優れた選択肢であることを実証して手術の日に同じマウス（0日目）からの樹状突起スパインのイメージングと32日Portsウィンドウを作成した後（32日目）。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/4201/4201fig1.jpg" /> 図1：後方散乱光を用いて研磨し、補強された間伐頭蓋骨頭蓋窓下の血管系の可視化。日tを表す<html>手術の数日後、彼は数、画像はすぐにGBM細胞注入が完了した後に手術の日に始まる撮影された。スケールバー：0.5mmの<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4201/4201fig1large.jpg" target="_blank">拡大図を表示するには、ここをクリックしてください</a> 。 <img alt="図2" src="/files/ftp_upload/4201/4201fig2.jpg" /> 図2：in vivoで注入されたGBM細胞と血管系の可視化。 TEK-CREおよびROSA26 CAG-tdTomato両方を持つマウスは、GBM細胞注入のために使用された。血管内皮細胞は、tdTomato（赤）で標識した、とGBM細胞は、GFP（緑色）で標識した。画像はGBM細胞注射後24時間を開始を取得した。ビューの10-12隣接するフィールドの合計を採取し、最終的な画像を生成するために、合計フィールドの中央に注入された識別されたGBM細胞と、互いに隣接して組み立てた。日は、手術後の日数を表す。スケールバー：100μmである。href =の&quot;https://www.jove.com/files/ftp_upload/4201/4201fig2large.jpg&quot;ターゲット= &quot;_blank&quot;&gt;拡大図を表示するには、ここをクリックしてください。 <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/4201/4201fig3.jpg" /> 図3：グリオーシスは、ポート頭蓋窓手術後は発生しません。アッパーパネル：低倍率下でのマウス脳冠状断面。左のパネル：任意の頭蓋窓の手術をせずにマウス;なしGFAPの活性化は、脳組織で観察される。中央のパネル：脳の右側で生成されたポート頭蓋窓が付いているマウス、ノーGFAPの活性化は、脳組織で観察される。右のパネル：Portsウィンドウの側からポート頭蓋窓と生理食塩水の注射でマウス。 GFAPの活性化は、Portsウィンドウの側ではなく、無傷の脳組織の側に観察される。スケールバー：1ミリメートル。下部パネル：上部パネル画像のホワイトボックスに示されているように地域での脳組織の高出力画像。スケールバー：100μmである。 <ahref =の&quot;https://www.jove.com/files/ftp_upload/4201/4201fig3large.jpg&quot;ターゲット= &quot;_blank&quot;&gt;拡大図を表示するには、ここをクリックしてください。 <img alt="図4" src="/files/ftp_upload/4201/4201fig4.jpg" /> 図4高解像度THY-1 YFPHマウス由来の樹状突起スパインのイメージング。画像は、ポートの手術の日に取得され、32日ポートの手術後に行った。それは、ほとんどの棘が一日に提示したイメージから、0ポート手術後のはっきり見える32日アールは明らかである。スケールバー：2μmである。

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</ol>

特別な利害関係は宣言されません。

成功したポート頭蓋窓の鍵は、間伐や研磨です。間伐初期は迅速に行うことができますが、注意が広い面積にわたって頭蓋骨の間伐均質性を確保するために取られるべきである。我々は一般的に生理食塩水がマイクロドリルは一度頭蓋骨を通過した直後に蒸発するような、頭蓋骨に生理食塩水の薄い層を適用し、薄い頭蓋骨ワンパス時。これはゆっく​​りと、しかし均一さらに薄い頭蓋骨に私たちをことができます。顕微鏡下で着実に手も鍵となります。頭蓋骨-間伐が意図した厚さに近づいたら、我々は通常、酸化スズを使用して、後続の研磨と、10〜15分間間伐頭蓋骨を磨くためにダイヤモンドペーストを使用します。我々はダイヤモンドペーストとの最初の間伐頭蓋骨を研磨すると、一般的により良い研磨結果が得られることを発見し、また、私たちは間伐頭蓋骨領域に多くの圧力を適用することなく、頭蓋骨領域の薄い大面積を促進することができます。 我々は、ポートcrを選んだむしろ次のような理由でそのような &quot;開かれた頭蓋骨&quot;ウィンドウと &quot;間伐頭蓋骨&quot;ウィンドウのような他の一般的に使用される頭蓋窓、よりanialウィ...

<table border="1"><tr><td> 試薬の名称 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> コメント（オプション） </td></tr><tr><td>ピルビン酸ナトリウムDMEM/F12（1:1） </td><td>サーモサイHyclone社</td><td> SH3026101 </td><td></td></tr><tr><td> B-27に、無血清サプリメント（50×） </td><td>インビトロジェン</td><td> 17504-044 </td><td></td></tr><tr><td>グルタ1補助</td><td>インビトロジェン</td><td> 35050061 </td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン - ストレプトマイシン溶液</td><td>サーモサイHyclone社</td><td> SV30010 </td><td></td></tr><tr><td> Accutase酵素細胞分離培地</td><td> eBiosciences </td><td> 00-4555-56 </td><td></td></tr><tr><td> T25フラスコ - ベントキャップグリーン</td><td>ザルスタット</td><td> 83.1810.502 </td><td></td></tr><tr><td> 70％アルコール</td><td> JAX LAHS </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 10パーセントポビドンヨード局所用溶液</td><td> JAX LAHS </td><td></td><td></td></tr><tr><td>ケタミン塩酸</td><td>バトラーアニマルヘルスサプライ</td><td> NDC＃11695-0550-1 </td><td></td></tr><tr><td>キシラジン</td><td> Akorn株式会社</td><td> NADA＃139から236 </td><td></td></tr><tr><td>カルプロフェン</td><td> JAX LAHS </td><td></td><td></td></tr><tr><td>眼軟膏</td><td> Dechra獣医製品</td><td> 17033-211-38 </td><td></td></tr><tr><td> 0.5パーセントリドカイン塩酸</td><td> REGENT株式会社</td><td> NDC 0517-0625-25 </td><td></td></tr><tr><td>シアノアクリレート接着剤</td><td>ヘンケル社</td><td> 46551 </td><td></td></tr><tr><td>滅菌綿棒</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> 23から400から114 </td><td></td></tr><tr><td>ダイヤモンドペースト</td><td>ウィジェットサプライ</td><td> BBE60 </td><td></td></tr><tr><td>酸化スズ</td><td> LORTONE株式会社</td><td> 591から038 </td><td></td></tr><tr><td>ライナーボンド2V </td><td>クラレメディカル株式会社</td><td> 1921-KA </td><td></td></tr><tr><td>クリアフィルAP-X </td><td>クラレメディカル株式会社</td><td> 1721-KA </td><td></td></tr><tr><td>生理食塩水</td><td> JAX LAHS </td><td></td><td></td></tr><tr><td>カバーガラス</td><td>ワーナー·インスツルメンツ</td><td> 64から0720 </td><td></td></tr><tr><td>六角ナット</td><td>小さなパーツ株式会社</td><td> HNX-0090-C </td><td></td></tr><tr><td>注射器ポンプ</td><td> Syringepump.com </td><td> NE-1000 </td><td></td></tr><tr><td>二光子イメージングシステム</td><td>カスタム構築された（任意の商用システムがそう仕事） </td><td></td><td></td></tr></table>

イメージンググリオーマ開始<emインビボで&gt;</em&gt;ポリッシュと補強シン頭蓋骨頭蓋窓スルー

Imaging Glioma Initiation In Vivo Through a Polished and Reinforced Thin-skull Cranial Window

神経膠腫は、ヒト癌の最も致命的な形態の一つです。日付手術に最も効果的な神経膠腫の治療は、放射線に続くほとんどの患者は神経膠腫の再発1,2に起因診断後五年以上生きていけないように、患者にわずかな利益を治療しています。ヒト脳腫瘍における癌幹細胞の発見は、神経膠腫の3のための新規治療戦略の開発に多大な影響を持っていることのための可能性を秘めています。がん幹細胞は、その能力、自己再生すると区別するために、新たな腫瘍4を開始する能力を持っている腫瘍で唯一の細胞であると考えられているの両方で定義されています。神経膠腫再発以下の放射線療法は、治療へのグリオーマ幹細胞の抵抗（GSCs）から発生すると考えられている5-10。 生体内では 、GSCsは、その幹細胞様の特性11-14を維持するために重要である血管周囲のニッチに存在することが示されている。 organiに中央GSCニッチのzationは12血管内皮細胞である。既存のエビデンスは、血管内皮細胞とGSCsとそれらの相互作用が腫瘍の開発のために重要であり、神経膠腫のための重要な治療標的としての内皮細胞とGSCsとそれらの相互作用を識別することを示唆している。 GSCsの存在は、同所移植15時に新しい腫瘍を開始するために彼らの能力によって実験的に決定される。これは典型的には深刻な免疫不全マウスの、またはホストコンジェニックマウスの脳にマウスGBM細胞の脳にヒト腫瘍から単離されたGBM細胞の特定の数を注入することによって達成される。腫瘍の成長のためのアッセイはその後注入GBM細胞間GSCsが新しい腫瘍 - 典型的には数週間あるいは数ヶ月を生じさせることができるのに十分な時間後に実行されます。したがって、既存のアッセイは、in vivoでのシングルGSCsから腫瘍の開始の重要な病理学的過程の検査を許可していません。したがって、本質的なIGSCsと腫瘍の開始の初期段階では血管内皮細胞との相互作用の具体的な役割にnsightsが不足している。このような洞察は、神経膠腫の新しい治療戦略を開発するために重要であり、患者では神経膠腫の再発を防止するための大きな意味を持つでしょう。ここでは、ポートの頭蓋のウィンドウプロシージャは16を適応していると、生体内で二光子顕微鏡は、生きたマウスの脳内に注入されたGBM細胞から腫瘍の開始の可視化を可能に。我々の技術は、神経膠腫の開始時GSCsと血管内皮細胞との間の重要シグナル伝達機構を解明するための今後の取り組みへの道を開くでしょう。

ポリッシュと補強薄頭蓋骨（ポート）頭蓋窓と神経膠芽腫（GBM）の細胞注入を組み合わせることによって、我々は、神経膠腫の開始と縦ライブマウスの脳内に注入GBM細胞からの成長を観察することができます。

神経膠腫（グリオーマ）は、ヒトの癌の中で最も致死性の高い形態の一つである。現在までで最も効果的な神経膠腫の治療法である、手術後の放射線治療は、…

この手順の全体的な目的は、生体内で単一の注入された膠芽腫細胞から始まる神経膠腫発生の初期段階を可視化することです。これは、まずマウスの頭蓋骨の一部を、生体イメージングに適した厚さまで薄くすることによって達成されます。次に、薄くした頭蓋骨領域を研磨します。次に、GFP標識したグリオブラストーマ細胞をマウスの脳内に注入し、in vivoイメージングのために頭蓋窓を密封します。最後に、注入したグリオブラストーマ細胞を毎日イメージングし、in vivoでの注入細胞からの神経膠腫（グリオーマ）の発生を可視化します。最終的に、グリオブラストーマ細胞の単回注入によるin vivoでの神経膠腫の発生と、血管内皮細胞との関係を、二色in vivo二光子顕微鏡を用いて示す結果を得ることができます。この手法は、グリオーマ幹細胞と血管内皮細胞の相互作用の重要な役割や、生体内におけるグリオーマの発生など、がん幹細胞分野における主要な疑問への回答に役立ちます。なお、本手順はJAK Surgical Servicesのlapier managerの管理下および私の研究室にて実施されます。オートクレーブを用いて、歯科用ドリルビットを含むすべての手術器具を蒸気滅菌し、手術の準備をします。マウスにケタミンとキシラジンで麻酔を施し、鎮痛剤を投与します。小型電気シェーバーを用いて足指を挟み、麻酔深度を確認します。頭部背面の、鼻腔から頸椎まで約3mmのほぼ三角形の領域から被毛を除去します。眼に眼科用軟膏を塗布します。マウスを腹臥位にし、外科用ヨード、次いで70%ethanolを用いて消毒します。皮膚を消毒した後、動物を綿パッドの上に置き、ヒートパッドへと移動させます。体温を約37°Cに維持するため、骨膜および創傷の露出組織に局所麻酔薬を塗布します。メスを用いて、頭蓋骨を優しく掻き出すようにして骨膜を除去します。これにより、シアノアクリレート接着剤が骨に密着しやすくなります。次に、マーカーを用いて目的の皮質領域を縁取り、下層にある太い血管を損傷しないよう、縫合線を避けるように注意します。その後、漿液性血性滲出液の漏出を防ぐために、創縁にシアノアクリレート系接着剤を薄く塗布し、さらに目的領域以外の頭蓋骨にも塗布します。光硬化型歯科用セメントで頭蓋骨を封じる前に、薄層化させる予定の領域以外の露出した頭蓋骨すべてにプライマーおよびボンディング材を処理します。ボンディング材が乾燥した後、マウスの頭部を固定するために、歯科用セメントで頭蓋骨を覆います。手術およびイメージングのために、薄化させる部位から離れた位置の歯科用セメントに00-90六角ナットを埋め込みます。歯科用セメントの準備が完了したら、可視光線を用いて硬化させます。次に、00-90ネジを使用して、ステレオタクティック装置のヘッドピースホルダーを六角ナ

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Medicine

医学

その後の3Dと頭蓋内注入インビボでの</emマウス神経膠腫の>生物発光イメージング

我々は、ミリメートルにまたがると、脳の炎症を伴わないヶ月間安定であるマウスの頭蓋骨の画像ウィンドウを形成する手法を提案する。このメソッドは、よく二光子顕微鏡を用いて血流、細胞のダイナミクス、細胞/血管構造の縦断的研究に適しています。...

マウス脳の長期イメージングのためのポリッシュと強化間引き頭蓋骨ウィンドウ

このビデオでは、脳のさまざまな領域への安定した光学アクセスのために、マウスモデルに頭蓋窓を埋め込む外科的処置を紹介しています。...

マウスモデルにおける頭蓋イメージングウィンドウの移植:マウス脳領域への安定した光学アクセスのためのガラスベースのカバースリップを埋め込む外科的処置

私達はのためのマウスモデルにおける間引き頭蓋骨皮質ウィンドウ（TSCW）を作成する方法を紹介...

ための間引き頭蓋骨皮質ウィンドウ·テクニック<emインビボで&gt;</em&gt;光干渉断層イメージング

新規高分解能<em生体内で&gt;</em腫瘍増殖と治療に頭蓋内構造物の動的応答を研究する&gt;イメージング技術

我々は、腫瘍の成長の間の遊びで、通常の生物物理学的な制約を再現生体2光子顕微鏡用マウスにおける皮質同所神経膠芽腫モデルを確立している。腫瘍の上に頭蓋骨を交換慢性ガラス窓は、2光子顕微鏡による経時的な腫瘍進行のフォローアップを可能にします。...

同所神経膠芽腫モデルマウスは、脳実質細胞の物理的制約を維持し、生体内二光子顕微鏡に適し

ここでは、同じ生体動物内での侵襲的外科的介入(例えば生検)の前後の脳腫瘍細胞の高解像度タイムラプスマルチフォトンイメージングの方法について説明する。この方法は、これらの侵襲的外科的処置が腫瘍細胞の移動、侵襲的、増殖性の行動に対する影響を単一の細胞レベルで研究することを可能にする。...

侵襲性外科生検に対する脳腫瘍細胞行動の縦腔内イメージング

このプロトコルは、神経-神経膠血管構造の縦画像化、相互作用、および健康および疾患条件の両方における機能に使用できる慢性頭蓋窓移植技術を記述する。これは、多くの場合、好ましいが、いくつかの重大な制限を有する経頭蓋イメージングアプローチに対する補完的な代替手段として機能する。...

マウスにおける神経免疫ダイナミクスの反復インビボイメージングを行う正確な脳マッピング

ここに提示されるのは、覚醒した頭部拘束マウスにおける脳細胞の縦方向イメージングのための慢性頭蓋窓の移植のためのプロトコルである。...

覚醒マウスにおける 反復生体内 イメージングのための頭蓋窓の移植

この研究は、マウスへの反復性外傷性脳損傷の送達と、2光子顕微鏡を使用したニューロン発現EGFPのその後の生体内イメージングのための頭蓋窓の同時移植を示しています。...

2光子顕微鏡を用いた閉鎖頭蓋外傷性脳損傷マウスおよび頭蓋窓における蛍光タンパク質発現の生体内イメージング

マウスモデルにおける膠芽腫への蛍光標識酸化鉄ナノ粒子の腫瘍送達の2光子顕微鏡法の新しいアプローチを紹介します。...

マウスモデルにおける神経膠芽腫の2光子生体内顕微鏡

学ぶ磨き補強薄頭蓋骨窓を用いたマウス脳内グリオーマ発生の可視化法。GFP標識グリオブラストーマ細胞を注射し、2光子顕微鏡で縦断観察することで、腫瘍幹細胞と血管内皮細胞の相互作用を解明する。

イメージンググリオーマ開始

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