Name: 2012年6月：Joveのでは、今月 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-06-01T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: 学ぶ角膜移植の革新的な移植片調製法。イタリアとミシガンの研究グループが開発した手法を用いて、視力回復のための眼科学的手法を探索する。これらの技術は移植成功率向上と適切な移植片の供給増加に貢献する。

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3709">唾液腺、卵巣、ベクター蚊の胚のその場でのハイブリダイゼーション</a></h2>
Jennifer Juhn1, Anthony A. James2, 1 1Department of Molecular Biology and Biochemistry, University of California, Irvine, 2Department of Microbiology and Molecular Genetics, University of California, Irvine 
遺伝子発現の時間的および空間的解析は、機能ゲノミクスにおいて重要な役割を果たしています。ホールマウントin situハイブリダイゼーションは、組織および細胞内コンパートメント内の転写産物の局在を決定するのに役立ちます。ここでは、蚊の特定の標的組織に対する修飾を伴うハイブリダイゼーションin situプロトコルの概要を説明します。
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3763">生きたショウジョウバエ合胞体胚における動的動原体タンパク質の挙動と染色体運動の図示による有糸分裂チェックポイントの研究</a></h2>
Maureen Sinclair1, Jun-Yong Huang2, 1 1Institute for Cell and Molecular Biosciences, University of Newcastle, United Kingdom, 2Institute for Cell and Molecular Biosciences, University of Newcastle
動原体は、SACが姉妹染色分体の有糸分裂分離を監視する信号を開始する場所です。ライカレーザー走査型共焦点システムを使用して、ショウジョウバエ胚の動原体タンパク質の1つの動員と代謝回転、および染色体運動との調整を視覚化する方法が説明されています。
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3765">ヒト眼球からの角膜のIn situ切除および網膜組織の内臓摘出のための簡易技術</a></h2>
Mohit Parekh1, ステファノ・フェラーリ1, エンツォ・ディ・イオリオ1, ヴァネッサ・バルバロ1, ダヴィデ・カンポサンピエロ1, Marianthi Karali2, ディエゴ・ポンツィン1,Gianni Salvalaio3, 1 1Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto O.N.L.U.S. , 2Telethon Institute for Genetics & Medicine (T.I.G.E.M.), 3Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto, O.N.L.U.S.
この論文は、角膜を切除し、ヒトの死体ドナーの眼球から網膜組織を内臓を摘出する簡略化された技術について説明しています。ここで説明する技術は、眼球の他の組織を損傷することなく、移植、外科的または研究目的で使用される良質の組織を切除するのに役立ちます。
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3813">マウス胚性幹細胞の運動ニューロンへの効率的な分化</a></h2>
Chia-Yen Wu1, Dosh Whye2, 1, Robert W. Mason1, Wenlan Wang1 1Nemours Biomedical Research, Alfred I. duPont Hospital for Children, 2Department of Pediatrics, Columbia University Medical Center
私たちは、マウス胚性幹細胞の運動ニューロンへのin vitro分化の効率を改善するための新しいプロトコルを開発しました。分化したES細胞は、免疫組織化学的手法を用いたニューロンマーカーおよび運動ニューロンマーカーの発現によって証明されるように、運動ニューロンの特徴を獲得した。
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3847">内皮角膜形成術のための角膜ドナー組織調製</a></h2>
Maria A. Woodward1, Michael Titus2, Kyle Mavin2, Roni M. Shtein1 1Department of Ophthalmology, University of Michigan, 2MidWest Eye Banks
内皮角膜移植は、角膜後部疾患の治療のための外科的技術です。組織を調製するための機械的なマイクロケラトーム解剖により、より薄く、より対称的な移植片が得られ、内皮細胞の損失が少なくなり、結果が改善されます。角膜移植手術の前にアイバンクで解剖を行うことができます。
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3958">血液疾患における微小血管相互作用を研究するための内皮化マイクロ流体工学</a></h2>
デビッド・R・マイヤーズ1, 2, 3, 4,*, 櫻井由美子1, 2, 3, 4,*, レジナルド・トラン1, 2, 3, 4, ビョンウク1, 2, 3, 4, Elaissa Trybus Hardy1, 2, 3, 4, ロバート・マンニーノ1, 2, 3, 4, アシュリー・キタ1, 2, 3, 4, Michelle Tsai1, 2, 3, 4, Wilbur A. Lam1, 2, 3, 4 1Department of Pediatrics, Emory University of Medicine, 2Wallace H. Coulter Department of Biomedical Engineering, Georgia Institute of Technology and Emory University, 3Aflac Cancer Center and Blood Disorders Service of Children's Healthcare of Atlanta , 4エモリー大学のウィンシップがん研究所 *これらの著者は等しく貢献しました
微小血管サイズのチャネル(<30μm)を持つマイクロ流体デバイスの内皮細胞単層全体を培養する方法が記載されています。このin vitro微小血管系モデルは、血液疾患における血液細胞、内皮細胞、および可溶性因子間の生物物理学的相互作用の研究を可能にします。
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3993">神経科学研究とリアルタイム機能的皮質マッピングのためのヒト皮質電図(ECoG)信号の記録</a></h2>
N. Jeremy Hill1, Disha Gupta2, 1, Peter Brunner2, 1, Aysegul Gunduz2, 1, Matthew A. Adamo3, Anthony Ritaccio2, Gerwin Schalk1, 2, 4, 5, 6, 7 1ワズワースセンター、ニューヨーク州保健局、2神経科、アルバニー医科大学、3脳神経外科、アルバニー医科大学、4脳神経外科、ワシントン大学、5バイオメッド学科。工学、レンセラー工科大学、6バイオメッド学科。Sci., STATE UNIVERSITY OF NEW YORK AT ALBANY, 7Department of Elec. and Comp. Eng., University of Texas at El Paso (テキサス大学エルパソ校
侵襲性てんかんのモニタリングを受けている人間から研究目的で皮質電気信号を収集する方法を紹介します。データ収集、信号処理、および刺激提示のためのBCI2000ソフトウェアプラットフォームの使用方法を示します。具体的には、リアルタイムの機能的脳マッピングのためのBCI2000ベースのツールであるSIGFRIEDを実演します。

利害の衝突が宣言されません。

2012年6月：joveのでは、今月

June 2012: This Month in JoVE

1905年、現在のチェコ共和国において、Eduard Zirmが初の角膜移植術（角膜移植術）を行い、角膜損傷により失明した患者の視力を回復させました。今日では、世界中の眼球バンクが、毎年数千件の視力を救う角膜移植が行われるよう、寄贈された角膜の調製、保存、および病院への分配を行っています。2012年6月のJoVEでは、移植前の角膜グラフト調製に関する2つの異なる手法を提示する、イタリアとミシガンの2つの研究グループに注目します。
イタリアの著者らは、眼球から角膜を摘出する手法を紹介しています。この手法では、まず一連の滅菌溶液に浸漬して無菌的に取り扱えるように準備し、強膜表面に切開を加え、最終的に角膜強膜リムを眼球から分離します。角膜の摘出後、内皮細胞密度と生存率を確認し、長期保存の準備を行います。保存期間中は、眼行バンクに寄託された他の移植片とともに、培地が高スループット方式で定期的に検査されます。
角膜移植術では、全層移植と呼ばれる角膜全層移植術という手法で全層グラフトが使用されますが、一部の疾患角膜では内皮層のみが影響を受けていることがJoVEで紹介されています。ミシガン大学およびMidwest Eye Bankの著者らは、角膜内皮層のみを移植するデスメ膜剥離自動内皮角膜移植術（DSAEK）によるドナー角膜のさらなる処理方法を実演しています。この比較的最近の手法は、角膜を精密に切開して内皮層を移植用に分離できる装置であるマイクロケラトームの使用によって可能になりました。ドナー組織の均一性と品質は、スリットランプおよび鏡像顕微鏡を用いて検証され、その後、角膜移植術に向けてグラフトが保存されます。
異なる大陸から集まった2組の著者グループが、眼球から角膜全体を摘出する方法と、内皮角膜移植のために後層を分離する手順を記録しました。このプロセスにより、感染や移植片拒絶反応のリスクが低減し、患者の視機能が向上します。
JoVE Neuroscienceでは、臨床医と科学者からなる多職種チームが、皮質電図（ECoG）の新しい研究応用について紹介します。ECoGは、脳上に直接配置したストリップ電極およびグリッド電極を用いて、てんかん患者の発作焦点（seizure foci）を特定する侵襲的手法です。この手法は、切除手術中に温存すべき皮質領域のマッピングにも利用可能です。皮質マッピングは、特定の電極への刺激が運動や言語の妨げになるかどうかをモニタリングすることで行われます。患者は通常、発作焦点を特定するために約1週間の頭蓋内モニタリングを受けますが、この期間は、非侵襲的な脳波検査（EEG）よりも信号対雑音比（S/N比）に優れ、記録アーチファクトの影響を受けにくいECoGを用いて、活動中のヒトの脳を研究できる貴重な機会となります。
安静時のベースライン活動を決定した後、著者らは単純な認知タスクまたは運動タスク中のハイガンマ周波数帯域における脳活動を記録します。次に、これらの研究者は、ECoG信号に基づいた迅速かつリアルタイムな機能マッピングを行うためのSIGFRIEDソフトウェアシステムの使用方法を実演し、さらにこれらの信号を解析することで、特定のタスクに関連する脳領域に関する情報を提供します。
Bioengineeringでは、微小血管系をチップ上で近似的に再現できることを示した研究チームを紹介します。この「チップ」は、実際には内皮細胞でコーティングされたマイクロ流体チャネルを備えたデバイスです。SU-8フォトリソグラフィーを用いてシリコンウェハー上にチャネルパターンをエッチングし、これをPDMSの型として使用します。デバイスの作製後、内皮細胞を播種し、チャネル内で培養します。PDMSの透明性により、顕微鏡を用いて細胞をイメージングすることが可能です。この微小血管系のin vitroモデルは、制御された微小環境を提供し、正常な血行動態プロセスおよび血液疾患の研究に利用できます。
この短い要約は、6月のJoVEコンテンツのごく一部に過ぎません。さらに詳しくご覧いただくと、成虫の蚊の組織および胚のin situハイブリダイゼーション法、ショウジョウバエにおける有糸分裂の可視化、および胚性幹細胞から運動ニューロンへの分化誘導などの手法をご紹介しています。どうぞご期待ください。

2012年6月：Joveのでは、今月

1905年、現在のチェコ共和国において、Eduard Zirmが世界で初めて角膜移植術（角膜移植）を行い、角膜損傷により失明した患者の視力を回復させました。今日では、世界中の眼球バンクが寄贈された角膜の調製、保存、および病院への配送を行っており、これにより毎年数千件の視力救済を目的とした角膜移植術が実施されています。2012年6月、JoVEでは、移植前の角膜グラフト調製における2つの異なる手法を提示する、イタリアとミシガンの2つの研究グループに注目します。イタリアの著者は、眼球から角膜を摘出する手法を提示しています。この手法では、まず一連の滅菌溶液に浸漬して無菌的に取り扱えるよう準備し、強膜表面に切開を加え、最終的に角膜・強膜リムを眼球から分離します。角膜の摘出後、内皮細胞密度と生存率が確認され、長期保存の準備が整えられます。保存期間中、培地は眼球バンクに預けられた他のグラフトとともにハイスループット方式で定期的に検査されます。角膜移植術では、全層移植という穿通性角膜移植と呼ばれる処置において全層グラフトが使用されます。しかし、JoVEが知る限り、一部の角膜疾患では内皮層のみが影響を受けています。ミシガン大学およびMidwest Eye Bankの著者は、Descemet膜剥離自動内皮角膜移植（DSAEK）を用いたドナー角膜のさらなる処理について実演します。これは角膜の内皮層のみを移植する処置です。この比較的新しい処置は、角膜を精密に切断して内皮層を移植用に分離できる装置であるマイクロケラトームの使用によって可能になりました。ドナー組織の均一性と品質は、スリットランプおよび鏡像顕微鏡を用いて検証され、グラフトは角膜移植術に向けて保存されます。このように、異なる大陸の2つの著者グループが、眼球から角膜全体を摘出する手順と、内皮角膜移植のために後層を単離する手順を記録しました。このプロセスは、感染やグラフト拒絶反応のリスクを低減し、患者の視覚機能を向上させます。JoVE Neuroscienceでは、臨床医と科学者からなる多職種チームが、皮質電図（ECoG）の新しい研究応用について紹介します。ECoGは、脳に直接配置したストリップ電極およびグリッド電極を用いて、てんかん患者のてんかん焦点（seizure foci）を局在化させる侵襲的な処置です。この処置は、切除手術中に温存すべき皮質領域のマッピングにも使用できます。皮質マッピングは、特定の電極への刺激が運動や言語の妨害につながるかどうかをモニタリングすることで達成されます。患者は通常、てんかん焦点を確認するために約1週間の頭蓋内モニタリングを受けますが、この期間は、非侵襲的な脳波測定（EEG）よりも信号対雑音比に優れ、記録アーティファクトの影響を受けにくいECoGを用いて、活動中のヒトの脳を研究するための貴重な機会となります。安静時のベースライン活動を決定した後、著者は単純な認知タスクまたは運動タスク中の高ガンマ周波数帯域の脳活動を記録します。その後、これらの研究者は、ECoG信号に基づいて迅速なリアルタイム機能マッピングを行うためのSIGFRIEDソフトウェアシステムの使用方法を実演し、さらにこれらの信号を分析することで、特定のタスクに関連する脳領域に関する情報を提供します。Bioengineeringでは、微小血管をチップ上で近似的に再現できることを示す科学者チームを紹介します。この「チップ」は、実際には内皮細胞でコーティングされたマイクロ流路を持つデバイスです。シリコンウェハーにチャネルパターンをエッチングするためにSU-8フォトリソグラフィーが使用され、これがPDMSの金型として機能します。

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

学ぶ角膜移植の革新的な移植片調製法。イタリアとミシガンの研究グループが開発した手法を用いて、視力回復のための眼科学的手法を探索する。これらの技術は移植成功率向上と適切な移植片の供給増加に貢献する。

2012年6月：Joveのでは、今月 (動画) | JoVE Journal

Wendy Chao

Aaron Kolski-Andreaco

2012年6月：Joveのでは、今月

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