Name: 創傷治癒のマウスモデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-05-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 39 s
Description: 学ぶ創傷治癒のマウスモデルで、シリコンスプリントを用いて創傷収縮を防ぎ、上皮化・細胞増殖・血管新生を促進する方法です。各マウスを自己対照とし、治療薬の前臨床評価に適した実用的で再現性の高い技術を習得できます。

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著者は、国民健康とオーストラリアの医学研究評議会（NHMRC）（：632512プロジェクト無償ID）から資金援助を承認したいと思います。ルイーズダン、国立心臓財団キャリア開発フェローシップによってNHMRC早いキャリアフェローシップとクリスティーナBursillによってサポートされていました。

1。スプリントと閉塞性ドレッシングの調製<ol><li>シリコンディスクを作成するために厚さ0.5mmのシリコンシートと利用ハサミや生検パンチで10ミリメートルの円を概説。 </li><li>センター10ミリメートルサークルの真ん中に5ミリメートル生検パンチと添え木として使用され、 &quot;ドーナツ&quot;のような円盤を形成するための穴を作成するためにしっかりと押します。 </li><li>などOpsiteなどの透明密封包帯に10ミリメートルの円を概説し、円形のドレッシングを作成するためにハサミを使用しています。 </li></ol> 2。実験動物<ol><li>実行されるすべての実験のための動物倫理委員会の承認を得る。 </li><li>商業ブリーダー（ 例えばジャクソン研究所）から8週齢（22〜26グラム）の雄C57BL/6Jマウスを使用してください。 </li><li> 21の標準的な条件でマウスを保つ°Cと食物と水に自由にアクセスして12時間の明暗サイクル。 </li><li> （オプション）：糖尿病はボーラス腹腔麟蹄で6から7週齢のマウスに誘導することができる定期的な血糖測定（AccuChekグルコメーター）により確認高血糖と165 mg / kgでストレプトゾトシン（クエン酸緩衝液中で、pH4.5）中のction。糖尿病マウスでは、尿があるかもしれませんので、それらの寝具は湿気を排除するために、より頻繁に変更する必要があるかもしれませんし、その重みが密接に監視する必要があります。 </li></ol> 3。麻酔と手術の準備<ol><li> 100％酸素でイソフルラン5％（流量1リットル/分）を使用して、全身麻酔を誘導し、イソフルラン1〜3％を使用して麻酔を維持します。 </li><li>マウスの深いペダル反射が抑制されていることを確認し、発生しやすい位置にマウスを置きます。 </li><li>首の付け根から背中ダウンと2つの肩甲骨の間のさらに3 cmまでバリカンで毛を除去することにより、手術部位を準備します。 </li><li>脱毛クリームの光照射は、2分を超えないために適用することができる。ウェットガーゼ綿棒は、すべてのクリームを確保するために使用することができ、残りの毛を除去する。 </li><li>で皮膚を拭きアルコール綿棒、10％ポビドンヨードの二つのアプリケーション（ベタジン）とマウスをドレープ。 </li></ol> 4。傷の切除と副木<ol><li>マウスの創傷治癒モデルの概略図を図1に示されている。 </li><li>肩のレベルで、マウスの正中線の両側に傷のために2つの円形のパターンを概説する無菌4ミリメートル生検パンチを使用してください（ 図2a-2b参照 ）。 </li><li>皮筋層（ 図2E）を含む皮下組織（ 図2C-2D）を通って延びて全層傷、および消費税円形の作品を作成するためにアウトラインとアイリスのはさみの真ん中に皮膚を持ち上げるために鋸歯状の鉗子を使用して、組織の。 </li><li>正中線（ 図2F）の反対側の傷のためにプロセスを繰り返します。 </li><li>シリコーンスプリントの各側面からプラスチックの保護コーティングを除去。 </li><li> cyanoacrylaを適用teの接着剤（ 例えば、スーパー接着剤またはクレイジー接着剤）シリコーンスプリントの片側に。 </li><li>センターでは、傷の上に添え木（ 図2G）と位置決め（ 図2H）を確実にするために中断された6-0ナイロン縫合糸で添え木を固定。 </li><li>他の傷に副木プロセスを繰り返します。 </li><li>この時間の時点で必要に応じて、もう一方の傷（ 図2I）と、車両制御に（最大100μl）をテストする治療化合物を適用します。 </li><li>透明密封包帯（例えば、OpSite）（ 図2J-2K）で傷口をカバーしています。 </li><li>定規は、スプリントと（2リットル図 ）とら顕微鏡写真の下方に配置されている。 </li></ol> 6。術後管理<ol><li>カルプロフェンは（5 mg / kg）を術後の疼痛緩和のための皮下注射により1日1回投与する。 </li><li>手術動物は個別にケージと熱メートル上に維持された後ATSは完全に回復するまで。 </li><li>痛みや体重減少の症状のために二回、毎日動物を監視します。我々は、痛みや体重減少の肉眼行動ディスプレイは観察されなかった。 </li></ol> 7。傷の測定と治療<ol><li>傷は、毎日測定することができます。 </li><li> 5％イソフルランガス（流量1リットル/分）を使用して、全身麻酔を誘導した後、マウスの深い感覚の反射を確実に1〜3％がイソフルラン使用して抑制されます。 </li><li>ピンセットでそっと裏閉鎖包帯。 </li><li>巻径を測定するために外科キャリパーを使用してください。私たちは、X、YおよびZ軸方向（ 図2メートル-20）と同様に将来の参照（ 図2P）のための顕微鏡写真に沿って3つの測定値の平均を取る。 </li><li>オプション：この時点で動物はレーザードップラーイメージャ（ 図2Q）を使用して、血流のために評価することができる。 </li><li>治療用化合物と車両制御の再アプリケーションがパフォーマンスすることができますこの時点でMED。 </li><li>きれいな透明閉鎖包帯は、その後再適用し、完全に回復するまでの動物は保温されています。 </li><li>注：スプリントが適切に確保されていない場合、傷は容易に収縮する（ 図2R）。 </li></ol> 8。組織学的分析<ol><li>麻酔の過剰摂取で10日後のマウスを安楽死させる。 </li><li>鉗子やメスの刃を使用すると、縫合糸、慎重剥がれ添え木を削除します。 </li><li> 4℃で一晩緩衝生理食塩水（PBS）創傷領域の周りや下に広い、完全切除を作成し、リンの4％パラホルムアルデヒドで組織をインキュベートするアイリスのはさみを使用しています。 </li><li> °C、その後-80℃でOCTコンパウンド、凍結、組織や場所に慎重に軽くたたくことで過剰の溶液を除去し4℃でさらに24時間PBS溶液中で17％ショ糖に組織を移す</li><li>ヘマトキシリン​​およびエオシン染色、創傷構造および上皮ギャップを可視化するために使用することができる。 Neovascularisationは、毛細管の数（フォンビルブラント因子を使用して）決定するために免疫組織化学的分析によって評価することができる。 </li></ol>

<ol><li>Sen, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+skin+wounds%3A+a+major+and+snowballing+threat+to+public+health+and+the+economy%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy.</a> Wound Repair. 17, 763-771 (2009).</li>
<li>Sen, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+healing+essentials%3A+let+there+be+oxygen%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Wound healing essentials: let there be oxygen.</a> Wound Repair Regen. 17, 1-18 (2009).</li>
<li>Gurtner, G. C., Werner, S., Barrandon, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+repair+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Wound repair and regeneration.</a> Nature. 453, 314-321 (2008).</li>
<li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Considerations+for+selecting+the+correct+animal+model+for+dermal+wound-healing+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomater.+Sci.+Polym.+Ed%22%5BJournal%5D)">Considerations for selecting the correct animal model for dermal wound-healing studies.</a> J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 19, 1087-1096 (2008).</li>
<li>Grose, R., Werner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound-healing+studies+in+transgenic+and+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Wound-healing studies in transgenic and knockout mice.</a> Mol. Biotechnol. 28, 147-166 (2004).</li>
<li>Reid, R. R., Said, H. K., Mogford, J. E., Mustoe, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+future+of+wound+healing%3A+pursuing+surgical+models+in+transgenic+and+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Surg%22%5BJournal%5D)">The future of wound healing: pursuing surgical models in transgenic and knockout mice.</a> J. Am. Coll. Surg. 199, 578-585 (2004).</li>
<li>Fang, R. C., Mustoe, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+wound+healing%3A+utility+in+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomater.+Sci.+Polym.+Ed%22%5BJournal%5D)">Animal models of wound healing: utility in transgenic mice.</a> J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 19, 989-1005 (2008).</li>
<li>Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+approaches+to+create+murine+models+of+human+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Surgical approaches to create murine models of human wound healing.</a> J. Biomed. Biotechnol. 2011, 969618(2011).</li>
<li>Galiano, R. D., Michaels, J. t, Dobryansky, M., Levine, J. P., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+and+reproducible+murine+model+of+excisional+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Quantitative and reproducible murine model of excisional wound healing.</a> Wound Repair. 12, 485-492 (2004).</li>
<li>Galiano, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+vascular+endothelial+growth+factor+accelerates+diabetic+wound+healing+through+increased+angiogenesis+and+by+mobilizing+and+recruiting+bone+marrow-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Topical vascular endothelial growth factor accelerates diabetic wound healing through increased angiogenesis and by mobilizing and recruiting bone marrow-derived cells.</a> The American Journal of Pathology. 164, 1935-1947 (2004).</li>
<li>Thangarajah, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+for+impaired+hypoxia-induced+VEGF+expression+in+diabetic+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">The molecular basis for impaired hypoxia-induced VEGF expression in diabetic tissues.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106, 13505-13510 (2009).</li>
<li>Raza, A., Bayles, C., Biebel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+Bacterial+Growth+and+Moisture+Handling+Properties+of+Transparent+Dressings%3A+3M+Tegaderm+Transparent+Dressing%2C+3M+Tegaderm+HP+Transparent+Dressing%2C+and+Opsite+IV3000+Transparent+Dressing%5BTitle%5D)+AND+%22Smith+and+Nephew+Report%22%5BJournal%5D)">Investigation of Bacterial Growth and Moisture Handling Properties of Transparent Dressings: 3M Tegaderm Transparent Dressing, 3M Tegaderm HP Transparent Dressing, and Opsite IV3000 Transparent Dressing.</a> Smith and Nephew Report. , (1998).</li>
<li>Chung, T. Y., Peplow, P. V., Baxter, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testing+photobiomodulatory+effects+of+laser+irradiation+on+wound+healing%3A+development+of+an+improved+model+for+dressing+wounds+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Photomed.+Laser+Surg%22%5BJournal%5D)">Testing photobiomodulatory effects of laser irradiation on wound healing: development of an improved model for dressing wounds in mice.</a> Photomed. Laser Surg. 28, 589-596 (2010).</li>
</ol>

著者らは、開示することは何もありません。

これは、皮膚の創傷治癒の実験マウスモデルである。このモデルの重要な特徴は、ヒトで発生するプロセスと、それが類似すること、再上皮化し、新しい組織の形成が起こることができるように、創傷収縮を防ぐために、シリコーン副木の使用である。このモデルは、用途が広く、生理学的および病態生理学的の両方（ 例えば、糖尿病）の設定における創傷治癒を評価するために使用することができる。モデルは、経済的な環境の中に潜在的な創傷治癒または血管新生の治療を評価するために使用することができる。独自のコントロールとして動作するそれぞれのマウスで、動物の数が最小限に抑えられます。このモデルのために必要な手術手技は、このように、このモデルは広く比較的少ない手術経験を有する者が使用することができ、高度に洗練されていません。 縫合糸で、それは添え木が十分に肌に付着して固定されていることが不可欠です再現性と正確な定量を確保し、そのTにここで2つの傷を作成する間の最小遅延はある。急激にマウスで傷に副木または部分的な除去は、次の緩みを引き締めることネズミの傷の性向は、スプリントの毎日のモニタリングを必要とします...

障害創傷治癒にはかなりの罹患率と死亡率を世界的に責任があるが、これは糖尿病1,2の患者のために特に当てはまります。ヒトでは、創傷治癒は3と重なる重要な存在である、工程の連続である。直後に負傷、炎症プロセスが開始されます。炎症細胞は、細胞増殖、遊走及び血管新生の過程を促進する因子を放出する。再上皮化し、新しい組織の形成後にコラーゲンなどのマトリックスタンパク質のアポトーシス及び再組織の両方を伴うリモデリングの段階がある。 創傷治癒の複雑性は、現在、 インビトロで複製され、これは、動物モデルの使用を必要とすることはできない。現在までに、創傷治癒研究は治癒過程が同等と人間に匹敵することを保証するために、例えば、ブタなどの大型動物モデルが、これらに限定されている。しかし、大規模なアニマを使用このような研究のためのlsが家に困難になり、常に実用的4ではありませんすることができます。実験用マウスは簡単に遺伝的に5-7序調査のために操作することができる経済的な動物モデルを表しています。しかし、ネズミの傷は人間の、収縮8の過程が主な原因とは異なって癒す。これは、部分的にヒトに主として存在しないか、皮筋層と呼ばれる広範な皮下横紋筋層によるものである。マウスでは、この筋層は、皮膚が独立深い筋肉の移動することができ、皮膚の次の負傷の急速な収縮を担当しています。 この制限を克服するために、マウスの創傷治癒は、スプリント（ 図1）8,9を用いてヒトの創傷治癒を複製するように構成することができる。このビデオでは、創傷収縮がなくなり、より密接に再epithelializa人間の過程を近似splintedマウス創傷モデルを実証ると新しい組織形成。このモデルでは、皮筋層を含む2つのフル厚切除がマウスの正中線の両側に背、1で作成されます。シリコーンスプリントは、接着の支援、その後中断した縫合糸で固定スプリントで傷の周囲に配置されています。各マウスことにより、動物の数を減少させる、傷一つは、治療およびその他の車両制御を受け取ると、自身のコントロールとして作用する。局所適用に続いて、透明密封包帯を適用する。さらに、局所適用および/ ​​または創傷領域10,11の測定に必要なときに包帯を除去することができる。実験では、創傷閉鎖の終了時に、血管新生の形態アーキテクチャおよび程度は、免疫組織化学により評価することができる。この経済的モデルを実行することが容易にも糖尿病または他の病態生理との関連で創傷治癒を評価するために利用することができる。

<table><tbody><tr><td>プレス・トゥ・シール シリコンシート 厚さ0.5mm</td><td>Invitrogen</td><td>P18178</td><td>外径1cm、内径0.5cmの「ドーナツ」にカット</td></tr><tr><td>バイオプシーパンチ 5mm</td><td>シュタイフェル</td><td>BC-B1-0500</td><td>切除する創傷領域の輪郭を描くために</td></tr><tr><td>ヴァンナスはさみ 8.5cm湾曲</td><td>ワールド精密機器 </td><td>501232</td><td>創傷切開・切除用</td></tr><tr><td>デュモンテ #7b鉗子、11 cm</td><td>World Precision Instruments</td><td>501302</td><td>切開および切除時に皮膚をつかむために </td></tr><tr><td>Graefe 鉗子、鋸歯状 10cm</td><td>World Precision Instruments</td><td>14142</td><td>シリコンスプリントを皮膚に取り付けるのを助けるために</td></tr><tr><td>ニードルホルダー、滑らかな顎、湾曲、12.5 cm</td><td>World Precision Instruments</td><td>14132</td><td></td></tr><tr><td>マリス鉗子、滑らか、ストレート、12 cm</td><td>Codman and Shurtleff, Inc (J&アンプ;J)</td><td>80-1500</td><td>シリコンリングを皮膚に縫合</td></tr>するには <tr><td>定規、0.5 mm グラデーション</td><td>n/a</td><td></td><td></td></tr><tr><td>キャリパー 0.25 mm グラデーション</td><td>ダックワース&ケント</td><td>9-653</td><td>傷口面積を測定するには</td></tr><tr><td>Opsite FlexiFix 透明粘着フィルム 10 cm x 1 m</td><td>Smith &甥</td><td>66030570</td><td></td></tr><tr><td>・リマディル(カルプロフェン)</td><td>ファイザー 462986</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

創傷治癒のマウスモデル

Murine Model of Wound Healing

創傷治癒と修復は、人間の生活の中で発生する最も複雑な生物学的プロセスである。怪我の後、複数の生物学的経路が活性化。例えば糖尿病患者に起こる障害創傷治癒は、このような切断などの重篤な不利な結果につながることができます。創傷修復を促進する新規な薬剤を開発するために増加させる原動力は、したがって、がある。これらのテストは、例えば、しばしば非実用的であるブタなどの大型動物モデルに限られていた。彼らは経済的で機械的な調査が可能に遺伝子操作に適しているようにしたマウスは、理想的な前臨床モデルを表しています。しかし、マウスにおける創傷治癒は、それが主に収縮を介して行われるように、人間のそれとは根本的に異なる。我々のマウスモデルは、創傷の周りに添え木を組み込むことによって、これを克服する。傷を副木で、修復プロセスが密接にミラー上皮化、細胞増殖や血管新生に次に依存しているヒトの創傷治癒の生物学的プロセス。一貫性とケアを必要とする一方で、このマウスモデルは、複雑な手術手技を伴い、例えば、血管新生を促進したり、炎症を阻害する可能性がある有望な薬剤の堅牢なテストのためにできません。 2創傷を調製するようさらに、各マウスは、試験化合物と同じ動物上の車両制御の両方のアプリケーションを可能にし、それ自体の対照として作用する。結論として、私たちは、人間に匹敵する創傷治癒の実用的に学ぶことが簡単に、かつ堅牢なモデルを示しています。

（0日目径/日のX径） -創傷閉鎖曲線は、創傷の平均直径を算出し、比率、 すなわち 100として結果を表現することにより決定される。この実験では、治療化合物（またはビヒクル対照）創傷に毎日適用した。治療化合大幅に加速された創傷閉鎖（ 図3）。これはスプリントの除去が迅速創傷収縮（ 図2R）につながり、ヒトで観察された創傷治癒のパターンから分岐するよう副木は、実験期間中維持されなければならないことに留意することが重要である。 <img src="/files/ftp_upload/50265/50265fig1.jpg" alt="図1" fo:content-width="3in" fo:src="/files/ftp_upload/50265/50265fig1highres.jpg" /> 図1。マウス創傷治癒モデルの概略図。このモデルでは、2つの完全な厚さの傷はEIに...

生理学的および病態生理学的環境における治療用化合物を評価するために使用され得る皮膚の創傷治癒のマウスモデル。

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

この手順の全体的な目的は、創傷部位に副子（スプリント）を固定することで、創傷の収縮を防ぎ、上皮化、細胞増殖、および血管新生を促進させることです。まず、背側を準備し、正中線的に両側に2つの全層切除創を作成します。次に、創傷の上に副子を配置し、縫合して固定します。その後、創傷の大きさを測定し、治療を施します。最後に、創傷部位を密封ドレッシングで覆い、マウスを回復させます。最終的に、この皮膚切除創傷治癒モデルを用いて、創傷、上皮化、および増殖や血管新生を含む関連プロセスを評価します。他の手法と比較した本手法の主な利点は、創傷収縮が抑制されることです。これにより、上皮化の増殖と血管新生が促進され、より実際の創傷治癒過程に近い状態が再現されます。ヒトにおいて、この方法は治療化合物の有効性を評価するのに特に有用であり、また、各マウスが自身の対照（コントロール）となるため、研究に必要な動物数を最小限に抑えることができます。まず、副子（スプリント）を作成するために、副子と閉鎖ドレッシングを準備します。最初に、シリコンシート上に直径10 mmの円を描き、はさみまたは生検パンチを用いてシリコンディスクを作成します。次に、10 mmのディスクの中央に5 mmの生検パンチを合わせ、強く押し込んで、副子として使用するドーナツ状のリングを作成します。Opsiteなどの透明ドレッシング材を用いて、同じサイズの円形ドレッシングを作成します。まず、麻酔をかけたマウスの麻酔深度が適切であることを確認します。手術部位の除毛後、ベタジンとアルコールを繰り返し塗布して皮膚を洗浄します。準備が整ったら、滅菌済みの4 mmバイオプシーパンチを使用し、マウスの肩レベルの正中線両側に2つの円形の輪郭を作成します。次に、鋸歯付きピンセットで輪郭の中央の皮膚を持ち上げ、虹彩剪刀で創傷を作成します。パンヌス組織を含む皮下組織まで確実に切除してください。組織の両側を切り出し、2つの円形の創傷を露出させます。シリコンスプリントの両面からプラスチック保護コーティングを取り除き、片面にシアノアクリレート接着剤を塗布します。副子を創傷部位の中央に合わせ、6-0ナイロン縫合糸を用いて結節縫合で固定します。もう一方の創傷部位に対しても同様に副子の固定を行います。これで、一方の創傷を対照として使用しながら、もう一方の創傷に治療化合物を適用することが可能になります。車両コントロール（対照群）として、副材の下に定規を置き、顕微鏡写真（マイクログラフ）を撮影します。あらかじめ準備しておいた円形のドレッシング材で創傷部を覆います。鎮痛剤を投与した後、動物を保温ケージ内で回復させます。動物に痛みや体重減少の兆候がないか、1日2回モニタリングを行います。創傷を測定するには、前述の方法で動物を麻酔し、ピンセットで密閉ドレッシングをそっと剥がします。サージカルキャリパーを用いて、創傷の直径を複数箇所で測定して平均値を算出し、後で参照できるように顕微鏡写真を撮影します。この時点で、動物の血流灌流を評価することができます。レーザードップラーイメージャを用い、創傷部に清潔で透明な閉鎖性ドレッシング材を適用し、完全に回復するまで動物を保温します。注意点として、副子（スプリント）が適切に固定されていない場合、麻酔薬の過剰投与による安楽死後に創傷部が容易に収縮するため、鉗子とメスを用いて縫合糸を除去し、創傷部から慎重に副子を剥がしてください。アイリス剪刀を用いて、創傷部位の周囲および下方から幅広く完全に切除します。切除後、標準的な手順に従って組織を固定します。創傷構造および上皮の間隙を可視化するために、ヘマトキシリン・エオジン染色を用いることができます。さらに、免疫組織化学的解析によって新生血管を評価し、毛細血管の数を決定することができます。創傷閉鎖曲線は、創傷の平均直径を算出し、その結果をパーセンテージで表すことで決定します。この例では、治療化合物を投与した群は対照群と比較して、創傷閉鎖が大幅に促進されました。この手法を習得すれば、適切に実施することで30分で完了させることができます。本手順を行う際は、実験間の整合性を維持するため、等間隔に縫合して副子をしっかりと固定することが重要です。

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医学

このビデオでは、詳細な分子分析のために適切な時点で結腸内視下創傷床を分離する手順について説明します。この分析は、消化管の炎症状態における創傷治癒過程を理解するのに役立ちます。...

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L-012、化学発光のルミノール アナログを視覚化し、マウス切除創傷モデルで生成される活性酸素種 (ROS) を定量化を利用した、非侵襲的生体内でイメージ投射は、効率的でコスト効果の高い、プロトコルについて述べる.

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後部皮下ポリビニルアルコールスポンジの移植と切除テール皮膚創傷モデルを用いた急性創傷治癒の評価

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マウス創傷モデルおよび単一細胞懸濁液の調製

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創傷は世界的な健康課題です。この研究では、創傷測定のばらつきを最小限に抑えるために、デジタル面積測定を利用した標準化されたフォトブースを開発しました。マウスの創傷を14日間にわたってモニタリングしたところ、創傷面積と周囲が最初に増加し、その後徐々に閉鎖されることが明らかになりました。この方法論は、前臨床モデルにおける創傷閉鎖動態の評価に役立つ可能性があります。...

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生理学的または病理的条件下で、治癒過程の異なる段階にわたって様々な治療薬を評価できるラット皮膚創傷モデルが記述されます。さらに、組織修復中の創傷収縮率を監視するための手動平面測定のプロトコルも詳細に示されています。...

ラット外科皮膚創傷モデル:創傷治癒研究および生体材料評価のアプローチ

学ぶ創傷治癒のマウスモデルで、シリコンスプリントを用いて創傷収縮を防ぎ、上皮化・細胞増殖・血管新生を促進する方法です。各マウスを自己対照とし、治療薬の前臨床評価に適した実用的で再現性の高い技術を習得できます。

創傷治癒のマウスモデル

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