マウス肺挿管の簡単な方法

この手順の全体的な目標は、マウスを挿管して、機械的な換気または液体の取り付けを可能にすることです。これは、最初にカニューレと光源を組み立てることによって達成されます。2番目のステップは、マウスを上切歯で垂直に吊るすことです。

頭と体を操作して挿管のための直線経路を確保した後、光ファイバーイントロデューサーとカニューレを声帯に挿入します。最終的に、光ファイバーを取り外し、カニューレを所定の位置に配置したマウスを仰臥位にして換気または設置します。さて、今日はマウスの肺に挿管する簡単な手順を実演します。

マウスの位置はカニューレの挿入に関して重要なステップであることが多いため、視覚化は重要です。したがって、少し練習するだけで少し練習が必要になります。比較的短い時間でこれを繰り返し行うことは誰でも可能であり、今日の手順を示しているのは、呼吸器内科と医学部の若手教員であるサンディ・ドス博士です。最初のステップは準備することです。

成体マウス用のカニューレを準備し、長さ1〜1.5インチ、20ゲージのIVカテーテルを使用します。次に、0.5ミリメートルの長さの光ケーブルを切断して光ファイバーケーブルを準備し、エッジを滑らかにします。カット後、繊維の端を持ち、先端が1000グリットのエメリー紙に触れるように小さな円を作ります。

もう一方の端は、光源の開口部に合うサイズのシリコーンゴムストッパーに挿入されます。まず、18ゲージの針に押し込みます。次に、針穴に光ファイバーを挿入し、針を引き抜きます。

次に、ラバーストッパーを150ワットのハロゲン光源に接続します。次に、光ファイバーケーブルを短いシリコンゴムチューブに挿入します。光ファイバーケーブルを調整しながら、チューブを所定の位置に固定します。

所定の位置に配置されたら、シリコンチューブをカニューレのルアーエンドにぴったりと挿入します。光ファイバーケーブルの位置を調整して、カニューレを通って先端の約4ミリメートル前に伸びるようにします。すべての準備が整ったら、麻酔をかけたマウスを垂直サポートに置き、動物を上切歯で慎重に吊り下げます。

固定したら、非常に優しく舌を引き出し、親指と人差し指で持ちます。中指を首とプラスチックサポートの間に置き、人差し指で舌のトラクションをサポートします。指と親指を使って口を開け、挿管経路をまっすぐにします。

頭の角度は、このように中指を首の後ろにつけて調整します。次に、声帯を視覚化します。コードが見えない場合は、中指を支えにして舌を強く引っ張ります。

視覚化したら、光ファイバーケーブルを光源とイントロデューサーの両方として使用し、声帯に押し込みます。カニューレが気管内にあることを示す1つの兆候は、カニューレが最初に挿入されたときにマウスが息を切らす可能性があることです。挿入したら、カニューレをさらに約5ミリメートル進めてから、カニューレを動かさないように注意しながら、光ファイバーケーブルを引っ込め、マウスを横にして、カニューレをテープで固定し、カニューレハブをモデリング粘土で支えます。

冷凍庫に保管されている小さな歯科用鏡を使用して、カニューレが食道ではなく気管にあることを確認できます。ミラーをカテーテルのルアーハブの前に置きます。カテーテルが正しい位置にあると、吐き出された息が鏡に結露を形成します。

挿管手順が肺への薬剤のエアロゾルインストールのみに対して行われる場合、これはマウスが仰臥位に横たわっている間に行うことができます。しかし、この位置では、マウスを垂直位置に吊り下げたまま液体の設備をより効率的に行い、その後、肺機能を測定するためにカニューレをすぐに取り外すことができます。挿管された麻酔マウスは、次に示すように人工呼吸器に接続されます。

人工呼吸器の設定は挿管を開始する前に行う必要があるため、換気に遅れることはありません。この挿管されたマウスの換気圧力と換気量の記録が示されています。この分析法が 5 週間にわたって気道抵抗の再現性のある測定値を得る能力を評価しました。

このグラフのデータは、ベースライン抵抗が比較的一定のままであるため、繰り返し測定を行う影響がないことを示しています。毎週研究した4匹のマウスのそれぞれで、マウスを犠牲にした後に肺にエアボーラスを注入することにより、気管と挿管カニューレの間のシールの気密性を評価しました。ストレスの後、非常にゆっくりとした漏れが発生する場合がありますが、緩和回復、圧力漏れは最小限に抑えられているように見えます。

この手順を試みるときは、誤ってカニューレを引き抜くのが非常に簡単なため、マウスをサポートスタンドから取り外す際に注意することが非常に重要です。