Name: 細菌、昆虫細胞およびプラントシステムズ：異なるバイオファクトリーでの組換えタンパク質発現の比較分析 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: 学ぶ 細菌、昆虫細胞およびプラントシステムズを用いた組換えタンパク質発現の比較分析。従来の発酵培養と植物系プラットフォームの利点と限界を評価し、最適な生産方法の選択に役立つ知見を提供します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

この作業は、COSTアクション「Molecular pharming: Plants as a production platform for high-value proteins」FA0804によって支援されました。著者らは、研究目的でMagnICONベクターを提供してくださったAnatoli Giritch博士とYuri Gleba教授に感謝します。

<ol><li>Hampe, C. S., Hammerle, L. P., Falorni, A., Robertson, J., Lernmark, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Site-directed+mutagenesis+of+K396R+of+the+65+kDa+glutamic+acid+decarboxylase+active+site+obliterates+enzyme+activity+but+not+antibody+binding%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Lett%22%5BJournal%5D)">Site-directed mutagenesis of K396R of the 65 kDa glutamic acid decarboxylase active site obliterates enzyme activity but not antibody binding.</a> FEBS Lett. 488 (3), 185-189 (2001).</li>
<li>Avesani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recombinant+human+GAD65+accumulates+to+high+levels+in+transgenic+tobacco+plants+when+expressed+as+an+enzymatically+inactive+mutant%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Biotechnol.+J%22%5BJournal%5D)">Recombinant human GAD65 accumulates to high levels in transgenic tobacco plants when expressed as an enzymatically inactive mutant.</a> Plant Biotechnol. J. 9 (8), 862-872 (2010).</li>
<li>Sambrook, J., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSambrook%2C+J+%22Molecular+Cloning%3A+A+laboratory+manual.+Second+Edition%22">Molecular Cloning: A laboratory manual. Second Edition</a>. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. New York. (1989).</li>
<li>Avesani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+different+biofactories+for+the+production+of+a+major+diabetes+autoantigen%5BTitle%5D)+AND+%22Transgenic+Res%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of different biofactories for the production of a major diabetes autoantigen.</a> Transgenic Res. 23, 281-291 (2014).</li>
<li>Marillonnet, S., Giritch, A., Gils, M., Kandzia, R., Klimyuk, V., Gleba, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+planta+engineering+of+viral+RNA+replicons%3A+efficient+assembly+by+recombination+of+DNA+modules+delivered+by+Agrobacterium%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+%28USA%29%22%5BJournal%5D)">In planta engineering of viral RNA replicons: efficient assembly by recombination of DNA modules delivered by Agrobacterium.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. (USA). 101 (18), 6852-6857 (2004).</li>
<li>Gleba, Y., Klimyuk, V., Marillonnet, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viral+vectors+for+the+expression+of+proteins+in+plants%29%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Viral vectors for the expression of proteins in plants).</a> Curr. Opin. Biotechnol. 18, 134-141 (2007).</li>
<li>Engler, C., Kandzia, R., Marillonnet, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+one+pot%2C+one+step%2C+precision+cloning+method+with+high+throughput+capability%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A one pot, one step, precision cloning method with high throughput capability.</a> PLoS One. 3 (11), (2008).</li>
<li>Xu, R., Li, Q. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol%3A+streamline+cloning+of+genes+into+binary+vectors+in+Agrobacterium+via+the+Gateway+TOPO+vector+system%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Methods%22%5BJournal%5D)">Protocol: streamline cloning of genes into binary vectors in Agrobacterium via the Gateway TOPO vector system.</a> Plant Methods. 4 (4), 1-7 (2008).</li>
<li>Fairbanks, G., Steck, T. L., Wallach, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophoretic+analysis+of+the+major+polypeptides+of+the+human+erythrocyte+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Electrophoretic analysis of the major polypeptides of the human erythrocyte membrane.</a> Biochemistry. 10 (13), 2606-2617 (1971).</li>
<li>Falorni, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radioimmunoassay+detects+the+frequent+occurrence+of+autoantibodies+to+the+Mr+65%2C000+isoform+of+glutamic+acid+decarboxylase+in+Japanese+insulin-dependent+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Autoimmunity%22%5BJournal%5D)">Radioimmunoassay detects the frequent occurrence of autoantibodies to the Mr 65,000 isoform of glutamic acid decarboxylase in Japanese insulin-dependent diabetes.</a> Autoimmunity. 19, 113-125 (1994).</li>
<li>Hunt, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+gene+to+protein%3A+a+review+of+new+and+enabling+technologies+for+multi-parallel+protein+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Protein+Expr.+Purif%22%5BJournal%5D)">From gene to protein: a review of new and enabling technologies for multi-parallel protein expression.</a> Protein Expr. Purif. 40 (1), 1-22 (2005).</li>
<li>Arzola, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+co-expression+of+post-transcriptional+silencing+suppressor+for+increased+in+planta+expression+of+a+recombinant+anthrax+receptor+fusion+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Mol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Transient co-expression of post-transcriptional silencing suppressor for increased in planta expression of a recombinant anthrax receptor fusion protein.</a> Int. J. Mol. Sci. 12 (8), 4975-4990 (2011).</li>
<li>Merlin, M., Gecchele, E., Capaldi, S., Pezzotti, M., Avesani, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+evaluation+of+recombinant+protein+production+in+different+biofactories%3A+the+green+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Res.+Int%22%5BJournal%5D)">Comparative evaluation of recombinant protein production in different biofactories: the green perspective.</a> Biomed. Res. Int. 2014, 136419(2014).</li>
<li>Avesani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+in+planta+expression+of+the+human+islet+autoantigen+glutamic+acid+decarboxylase+%28GAD65%29%5BTitle%5D)+AND+%22Transgenic+Res%22%5BJournal%5D)">Improved in planta expression of the human islet autoantigen glutamic acid decarboxylase (GAD65).</a> Transgenic Res. 12 (2), 203-212 (2003).</li>
<li>Leuzinger, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+agroinfiltration+of+Plants+for+high-level+transient+expression+of+recombinant+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Efficient agroinfiltration of Plants for high-level transient expression of recombinant proteins.</a> J Vis Exp. (77), (2013).</li>
</ol>

著者らは、この論文の出版に関して利益相反がないことを宣言します。

細菌細胞、バキュロウイルス/昆虫細胞および植物：本研究では三つの異なるプラットフォームは、組換えヒトタンパ​​ク質の発現を比較した。植物ベースのプラットフォームは、さらに、（かつ安定した- -ベースMagnICONとpK7WG2 すなわち 、一過性の）3広く使用されている発現技術を利用して調査した。この実験で、hGAD65mutのために選択された標的タンパク質は、以前に別のシステム13内で発現されており、その生産と機能を容易に検出し、14測定可能である。 hGAD65mutこのように面倒な可溶化を必要とし、そのネイティブなコンフォメーションを達成するために、リフォールディングも、低温成長条件で、封入体を形成したので、細菌細胞は、効率的な生産プラットフォームではなかった。実際、複雑な組換えタンパク質の発現のために、このプラットフォームの主な障害は、最終製品の右配座である。 ザ·バキュロウイルス/昆虫細胞プラットフォームは、免疫反応性組換えタンパク質の高発現を媒介した...

組換えタンパク質は、新興のバイオテクノロジーツールの助けを借りて、異種発現系で商業的に大量生産されています。異種発現システムを選択する際に考慮しなければならない重要な要素には、タンパク質の品質、機能性、プロセス速度、収率、コストなどがあります。
組換えタンパク質の分野では、医薬品の市場が急速に拡大しており、その結果、今日生産されているほとんどのバイオ医薬品は組換えタンパク質です。タンパク質は、細菌、酵母、カビ、哺乳動物、植物、昆虫の細胞培養物、ならびに植物系(安定形質転換または一過性形質転換)およびトランスジェニック動物で発現させることができます。各発現システムには固有の利点と限界があり、各ターゲット組換えタンパク質について、最適な生産システムを慎重に評価する必要があります。
植物ベースのプラットフォームは、安全で費用対効果の高い組換えタンパク質生産のための伝統的な発酵槽ベースのシステムに代わる重要な選択肢として生まれています。下流の処理コストは微生物や哺乳類の細胞に匹敵しますが、工場での商業生産に必要な初期投資が少なくて済むことと、広い面積での栽培によってもたらされる潜在的な規模の経済性が主な利点です。
私たちは、1型自己免疫性糖尿病(T1D)の主要な自己抗原の一つであるヒトグルタミン酸デカルボキシラーゼ(hGAD65)の65kDaアイソフォームの発現のためのバイオリアクターとして植物を評価しました。hGAD65は、疾患の進行を分類および監視するためのマーカーとして広く採用されており、T1D予防におけるその役割は現在臨床試験で調査中です。これらの試験が成功すれば、組換えhGAD65の世界的な需要は劇的に増加するでしょう。
ここでは、補因子PLP(ピリドキサール-5'-リン酸)をアルギニン残基(K396R)1に結合するリジン残基を置換することによって生成される変異体であるhGAD65の酵素的に不活性な対応物であるhGAD65mutの発現に焦点を当てます。 
hGAD65mutは免疫原性を保持し、植物や昆虫の細胞では、野生型のhGAD65よりも最大10倍も蓄積します。hGAD65の酵素活性は、自身の合成を抑制するほど植物細胞の代謝を阻害する一方で、酵素的に不活性なhGAD65mutは植物細胞内に高レベルまで蓄積できるという仮説が立てられました。
hGAD65mutの発現については、植物バイオテクノロジーで広く使用されているさまざまな技術の使用がここで探求され、従来の発現プラットフォーム(大腸菌およびバキュロウイルス/昆虫細胞ベース)と比較されました。
この研究では、伝統的な植物ベースのシステムを含むhGAD65mutの発現のために開発された組換えプラットフォームがレビューされ、プロセス速度と収率、および最終製品の品質と機能性に基づいて比較されました。

<table><tbody><tr><td>酵母エキス</td><td>シグマ</td><td>Y1333</td><td></td></tr>トリ<tr><td>プトン</td><td>Formedium</td><td>TRP03</td><td></td></tr>寒<tr><td>天細菌学グレード</td><td>Applichem</td><td>A0949</td><td></td></tr><tr><td>SF-900 II SFM媒体</td><td>Gibco</td><td>10902-088</td><td></td></tr><tr><td>Grace'昆虫培地、未添加</td><td>Gibco</td><td>11595-030</td><td></td></tr><tr><td>セルフェクチンII試薬</td><td>Invitrogen</td><td>10362-100</td><td></td></tr><tr><td>ビタミンを含むMS培地</td><td>デュチェファ生化学</td><td>M0222</td><td></td></tr><tr><td>ショ糖</td><td>デュチェファ生化学</td><td>S0809</td><td></td></tr><tr><td>植物寒天</td><td>デュチェファ生化学</td><td>P1001</td><td></td></tr><tr><td>アンピシリンナトリウム</td><td>デュチェファ生化学</td><td>A0104</td><td>有毒</td></tr>な<tr><td>硫酸ゲンタマイシン</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>G0124</td><td>有毒</td></tr><tr><td>な Ganciclovir</td><td>Invitrogen</td><td>I2562-023</td><td></td></tr><tr><td>カルベニシリン二ナトリウム</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>C0109</td><td>有毒</td></tr><tr><td>な硫酸カナマイシン</td><td>Sigma</td><td>K4000</td><td>有毒</td></tr>な<tr><td>リファンピシン</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>R0146</td><td>有毒 &ndash;DMSO</td></tr><tr><td>ストレプトマイシン硫酸塩</td><td>デュチェファ生化学</td><td>S0148</td><td></td></tr>有毒<tr><td>スペクチノマイシン二塩酸塩</td><td>デュチェファ生化学</td><td>S0188</td><td></td></tr><tr><td>IPTG(イソプロピル-&ベータ;-D-1-チオガラトピラノシド)</td><td>シグマ</td><td>I5502</td><td>有毒</td></tr><tr><td>MES水和物</td><td>シグマ</td><td>M8250</td><td></td></tr><tr><td>MgCl<サブ>2</サブ</td><td>>生化学</td><td>436994U</td><td></td></tr><tr><td>アセトシリンゴン</td><td>Sigma</td><td>D134406</td><td>Toxic &ndash; 0.1 M Stock in DMSO</td></tr><tr><td>Syringe (1 ml)</td><td>Terumo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MgSO4</td><td>Fluka</td><td>63136</td><td></td></tr><tr><td>BAP (6-ベンジルアミノプリン)</td><td>Σ</td><td>B3408</td><td>Toxic</td></tr><tr><td>NAA (Naphtalene acetic acid)</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>N0903</td><td>刺激性</td></tr><tr><td>セフォタキシム</td><td>マイラン ジェネリック</td><td></td><td></td></tr><tr><td>トリズマ ベース</td><td>シグマ</td><td>T1503</td><td>1 N HCl で pH を調整して Tris-HCl バッファーを作る</td></tr><tr><td>HCl</td><td>シグマ</td><td>H1758</td><td>腐食性</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>シグマ</td><td>S3014</td><td>1 M ストック</td></tr><tr><td>KCl</td><td>シグマ</td><td>P9541</td><td></td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td>シグマ</td><td>S7907</td><td></td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>Sigma</td><td>P9791</td><td></td></tr><tr><td>PMSF (フェニルメタンスルホニルフッ化物)</td><td></td> <td>ΣP7626</td><td>腐食性、有毒</td></tr><tr><td>尿素</td><td></td><td>ΣU5378</td><td></td></tr><tr><td>&β;-メルカプトエタノール</td><td></td><td>Σ M3148</td><td>毒物</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td></td> ΣP5927 <td></td><td></td></tr><tr><td>Hepes</td><td>Sigma</td><td>H3375</td><td></td></tr><tr><td>DTT(ジチオスレイトール)</td><td>Sigma</td><td>D0632</td><td>Toxic &ndash; 1 M stock, store at -20 >C</td></tr><tr><td>CHAPS</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>C1374</td><td>有毒</td></tr><tr><td>植物プロテアーゼ阻害剤カクテル</td><td>Sigma</td><td>P9599</td> 凍結<td>/融解しすぎないでください</td></tr><tr><td>SDS (ドデシル硫酸ナトリウム)</td> <td>Sigma</td><td>L3771</td><td>可燃性、毒性、腐食性 &ndash; 10% ストック</td></tr><tr><td>グリセロール</td><td>Sigma</td><td>G5516</td><td></td></tr><tr><td>ブリリアントブルー R-250</td><td>Σ</td><td>B7920</td><td></td></tr><tr><td>イソプロパノール</td><td>シグマ</td><td>24137</td><td>可燃性</td></tr><tr><td>酢酸</td><td>シグマ</td><td>27221</td><td>腐食性</td></tr><tr><td>抗グルタミン酸デカルボキシラーゼ 65/67</td><td>シグマ</td><td>G5163</td> 凍結<td>/融解しすぎない</td></tr><tr><td>西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)-結合抗ウサギ抗体</td><td>シグマ</td><td>A6154</td> 凍結<td>/融解しすぎない</td></tr><tr><td>Sf9細胞</td><td>寿命テクノロジー</td><td>11496</td><td></td></tr><tr><td>BL21 コンピテント E. coli</td><td>ニューイングランド バイオラボ</td><td>C2530H</td><td></td></tr><tr><td>プロテイン A セファロース</td><td>シグマ</td><td>P2545</td><td></td></tr><tr><td>細胞培養プレート</td><td>シグマ</td><td>CLS3516</td><td></td></tr><tr><td>ラジオ免疫アッセイキット</td><td>テクノジェネティクス</td><td>12650805</td><td>放射性物質</td></tr></tbody></table>

細菌、昆虫細胞およびプラントシステムズ：異なるバイオファクトリーでの組換えタンパク質発現の比較分析

A Comparative Analysis of Recombinant Protein Expression in Different Biofactories: Bacteria, Insect Cells and Plant Systems

植物ベースのシステムは、高品質の、生理活性製品の柔軟な、低コスト生産のためのそれらの十分に立証された電位の結果として、組換えタンパク質の生産のための貴重なプラットフォームと考えられている。 本研究では、一過性で安定した植物に基づく発現系、伝統的な発酵槽に基づく細胞培養物（細菌および昆虫）で標的のヒト組換えタンパク質の発現を比較した。 各プラットフォームのために、我々は、セットアップ、最適化、製造工程の長さは、最終製品の品質及び収率を記載し、我々は、選択された標的組換えタンパク質に特異的な仮の製造コストを評価した。 全体として、我々の結果は、細菌は、不溶性の封入体中のその蓄積による標的タンパク質の生産に適していないことを示している。一方、植物ベースのシステムは、多目的プラットフォームトンである帽子は、バキュロウイルス/昆虫細胞系よりも低コストで選択されたタンパク質の産生を可能にする。具体的には、安定したトランスジェニック系統は、最終生成物の最高収率及び過渡発現する植物最速プロセス開発を示した。しかしながら、全ての組換えタンパク質は、植物ベースのシステムから利益を得ることができるが、ここで説明したように最高の生産プラットフォームは、ケースバイケースのアプローチを経験的に決定されるべきである。

異なる生産システムにおける標的組換えタンパク質の異種発現のための実験計画は、ここに記載されている。最初の焦点は、各システムにおける標的タンパク質の発現のための最適な条件を確立することによって、異なるプラットフォームをセットアップした。 標的タンパク質、hGAD65mutの発現は、三重E.で誘導された大腸菌の培養物。 37℃での発現の3時間後、細菌細胞を遠心分離により回収し、超音波処理により溶解した。遠心分離工程の後に、可溶性タンパク質は、不溶性の封入体から分離し、最初の分析（データは示さず）hGAD65mutが不溶性の封入体で優勢に蓄積することが実証された。組換えタンパク質の可溶化は、その強力な変性特性のために、hGAD65mutの不可能適切な定量化をする、RIAの分析を妨げる尿素6 M、の使用を必要とした。いくつかの戦略がなけれいる低温11で微生物細胞を増殖からなる、封入体の形成を制限するために報告アン。培養物を15℃および20℃で増殖させ、組換えタンパク質の発現は、同じ温度で誘導した。 図1A</stro...

この研究では、異なる生産プラットフォームにおける標的ヒト組換えタンパク質の発現が比較されました。私たちは、従来の発酵槽ベースの培養物と植物に焦点を当て、各システムのセットアップを説明し、報告された結果に基づいて、各プラットフォームに固有の制限と利点を強調しました。

Plant-based systems are considered a valuable platform for the production of recombinant proteins as a result of their well-documented potential for the ...

a-comparative-analysis-recombinant-protein-expression-different

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

ポストヒトゲノム時代において、ネイティブコンフォメーションにおける組換えタンパク質の可用性は、構造、機能および治療の研究開発に不可欠である。ここでは、テストと組換えタンパク質のさまざまなを生成するために使用することができるヒト胚性腎臓293T細胞における大規模タンパク質発現系を記述します。...

ヒト細胞から分泌タンパク質の生産のための便利で一般式プラットフォーム

植物は現在の式のパラダイムより、スケーラブルでコスト効率の高い、安全である商業規模で医薬品タンパク質の生産のための新たなシステムを提供しています。本研究では、我々を含む、標的遺伝子を導入するための簡単​​で便利な、まだスケーラブルなアプローチを報告...

組換えタンパク質の高レベルの一過性発現のための植物の効率的なアグロ

biotinylatable融合タンパク質を開発することは、研究の様々な分野で多くの潜在的な用途がある。組換えタンパク質工学は、カスタム設計されたタンパク質を高収率で提供する、費用対効果のある単純な手順である。...

神経組織再生のための可溶性および不溶性ビオチン化タンパク質の発現、分離、および精製

哺乳類システムによる組換えタンパク質の発現は、構造生物学のためのタンパク質複合体を生成するための魅力的な方法になりつつあります。ここでは、浮遊増殖した哺乳類細胞を使用して構造研究のためのタンパク質複合体を精製する、シンプルでありながら高効率な発現システムを紹介します。...

HEK 293F懸濁細胞における構造生物学のための組換えタンパク質の発現：小説とアクセアプローチ

タンパク質共発現は、タンパク質複合体のin vitro再構成に対する強力な代替手段であり、in...

タンパク質の共発現の多面的メリットで<em&gt;エシェリヒア·コリ</em

適切な翻訳後修飾を伴う真核生物タンパク質の実験室規模での生産は、大きな障壁を表しています。ここでは、哺乳類の発現システムを使用したタンパク質発現の迅速な確立とターンアラウンドを実現する堅牢なプロトコールをご紹介します。このシステムは、選択的アミノ酸、タンパク質の選択的標識、および糖鎖組成の低分子モジュレーターをサポートします。...

懸濁液中のHEK293細胞の一過性トランスフェクションによる組換えヒトタンパ​​ク質のハイ・イールド式

Nonlytic昆虫細胞発現系は、生産、細胞輸送/ローカリゼーション、および組換えタンパク質機能解析のために十分に活用されています。ここでは、市販の鱗翅目の細胞株で発現ベクターおよびそれに続く一過性のタンパク質発現を生成する方法について説明します。細胞内蛍光マーカータンパク質とタバココナジラミのアクアポリンの共局在も提示されています。...

培養昆虫細胞における一過性発現および組換えタンパク質の細胞内局在

本稿では、微生物培養メディアのオーダーメイド設計のための一般的なアプローチについて説明します。技術を組み合わせることクリギングを用いた実験設計および microbioreactor...

自動 Microbioreactor 技術を用いた異種タンパク質生産の最適化のための汎用プロトコル

このプロトコルを記述する外国蛋白質を表現するまたは潜在的な外国蛋白質とその切り捨てられたのアミノ酸の抗アポトーシス活性を評価に使用することができます熱衝撃によるタンパク質発現システム (pDHsp/V5-彼/sf9...

昆虫細胞 (sf9) 蛋白質機能の試金のための外国遺伝子の一過性発現

ここでは、昆虫にセルとバキュロ ウイルス蛋白質結晶化の植物の分泌タンパク質の大量生産にタンパク質発現のシステムを利用するためのプロトコルを提案する.バキュロ ウイルス発現ベクターは、GP67 や植物タンパク質分泌発現昆虫細胞での昆虫ヘモリン...

植物昆虫細胞でのタンパク質を分泌生産するバキュロ ウイルス発現ベクターを変更します。

バキュロウイルス発現ベクターシステム(BEVS)は、生化学的、生物物理学的、および構造研究に使用されるタンパク質アルギニンメチルトランスレシナーゼ(PRMT)の発現スクリーニングおよび生産のための堅牢なプラットフォームです。物質のミリグラム量は、真核生物発現プラットフォームを必要とする関心のあるPRMTおよび他のタンパク質の大部分のために製造することができる。...

バキュロウイルス発現ベクターシステムを用いた組換えPRMTタンパク質の生産

学ぶ 細菌、昆虫細胞およびプラントシステムズを用いた組換えタンパク質発現の比較分析。従来の発酵培養と植物系プラットフォームの利点と限界を評価し、最適な生産方法の選択に役立つ知見を提供します。

細菌、昆虫細胞およびプラントシステムズ：異なるバイオファクトリーでの組換えタンパク質発現の比較分析

さらに動画を探す