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DOI: 10.3791/56256-v
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インフルエンザ ウイルスのヘマグルチニンを対象とする抗体による Fc を介したエフェクターの機能の活性化を測定する手法を提案します。この試金は、Fc 免疫を誘導するモノクローナル抗体やポリクローナル血清の他のウイルスの表面糖蛋白質をターゲットの能力を評価するために合わせることができます。
このプロトコールの全体的な目標は、抗体または血清サンプルがFcを介したエフェクター機能を活性化する能力を評価することです。この方法は、抗体依存性Fc介在性免疫の活性化を測定することにより、免疫学およびワクチン学分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、材料の準備からデータ分析まで24時間以内に実験を行うことができることです。
この手順を実演するのは、ピーター・パレーズ研究室の大学院生であるマーク・ベイリーです。トランスフェクションによりインフルエンザウイルスヘマグルチニン発現を誘導するために、まずヒト胚性腎臓293細胞を1ウェルあたり10倍〜第4細胞の2倍でプレート化し、96ウェルプレートで白組織培養処理した。摂氏37度、CO2濃度5%で4時間後、ウイルスヘマグルチニンをコードするDNA100ナノグラムとウェルあたり0.2マイクロリットルのトランスフェクション試薬、および1X最適還元血清培地の総容量50マイクロリットルで細胞をトランスフェクションします。
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