Co 免疫沈降法とプルダウンの試金

共免疫沈降法(CoIP)とプルダウンアッセイは、安定したタンパク質間相互作用を同定するための密接に関連する方法です。これらの方法は、抗体に結合した標的タンパク質を非結合タンパク質から分離する方法である免疫沈降に関連しています。CoIPでは、抗体に結合したタンパク質自体が、抗体と結合しない別のタンパク質に結合し、その後、タンパク質-タンパク質複合体を保存する分離プロセスが続きます。プルダウンアッセイの違いは、アフィニティータグ付きベイトタンパク質が抗体に置き換わり、アフィニティークロマトグラフィーを使用してタンパク質-タンパク質複合体を単離することです。

このビデオでは、CoIP、プルダウンアッセイ、およびラボでの実装について説明します。結合タンパク質の精製と分析に使用される試薬、装置、機器など、各技術の段階的なプロトコールがカバーされています。さらに、このビデオのアプリケーションセクションでは、ミクソウイルスタンパク質がインフルエンザ核タンパク質を阻害する方法を研究する手順、プルダウンアッセイによるカルモジュリン中のカルシウムイオンの役割の調査、および一過性タンパク質相互作用を特徴付けるための修正プルダウンアッセイについて説明します。