Name: マウスで閉じた大腿骨骨折の生成: 骨の治癒を研究するためのモデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-16T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 53 s
Description: 学ぶマウス閉鎖大腿骨骨折モデルによる骨治癒研究法。最小侵襲で標準化された骨折を生成し、骨再生の生物学的メカニズムと新規治療戦略の開発を支援します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

この作品は、国防省 (DoD) 米国陸軍衛生研究資材コマンド (USAMRMC) 議会監督医学研究プログラム (CDMRP) (PR121604) と国立機関の関節筋骨格系からの補助金によって支えられました。や皮膚病 (NIAMS)、ユマ sankar さんに NIH R01 AR068332。

次の手順は、インディアナ大学学校の医学機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) からの承認を行った。すべての生存手術は、NIH のガイドラインに従って滅菌条件の下で行われました。痛みや感染症のリスクは、適切な鎮痛剤と抗生物質の正常な結果を確保するために管理されていました。
1. 麻酔や準備
<ol><li>マウスの重量を量るし、ケタミン (100 mg/kg) とキシラジン (10 mg/kg) の投与の混合物を介しての腹腔内 (i. p.) ルートで麻酔すること。空の檻の中にマウスを置くし、それが完全に鎮静するまでそれを監視します。</li>
	<li>つま先ピンチ反射を使用して、マウスを鎮静することを確認します。その目を乾燥から保護するために眼軟膏を適用されます。</li>
	<li>右下肢から毛皮を削除します。ヨウ素系スクラブと 70% エタノールで手術部位を拭きます。手術部位、膝の中央から開始し、外側円形掃引をスクラブします。新鮮なスクラブ、70% エタノールで終わるこの 3 倍を繰り返します。</li>
	<li>即時術後疼痛管理のため皮下ブプレノルフィン塩酸塩鎮痛 (0.03 mg/kg) の術前投与量を管理します。</li>
	<li>滅菌手術用パッドで覆われて加熱パッドの上にマウスを置きます。</li>
</ol>2. 外科的アプローチ
注: 破断前に重量と落下高さ経験的決定してください特定のひずみ、年齢、手術前にマウスのセックスに。この手術は、10 週齢で C57BJ6 男性マウスに最適です。
<ol><li>その裏にマウスを置き、手術足の膝を屈曲します。メスの刃を使用して、膝関節の中央に 1.5 cm の切開を作る。</li>
	<li>横方向に鉗子を使用して大腿骨の遠位端を公開する膝蓋骨を置き換えません。大腿骨の近位端を逆行性に髄運河の長さの下の滑車溝の中心に 1.5 インチ長い 25 サージカル ステンレス製の注射針を挿入します。ピンの適切な配置を確保するため x 線を取る。 注: 針ガイドワイヤのパスを作成するのには、マウスの背側を終了する必要があります。</li>
	<li>大腿骨遠位部にハブを介して出入りマウスの背側に面取りをする針のシャフトを 4-36 ゲージ長いタングステン ガイドワイヤを渡します。</li>
	<li>ガイドワイヤの成功の配置、次の場所でリムとガイドワイヤを押しながらハブを注意深く引いて 25 ゲージの針を慎重に取り外します。X 線によるガイドワイヤーの配置を確認します。</li>
	<li>影響を与えるディスク (図 1 a) 上記 34.6 cm の高さから 391 g 重量を保持します。水平方向に 2 つの間で大腿骨の位置支持点、大腿骨の大腿骨、大腿骨領域サポート アンビル (図 1 b) の残りの部分、リムの側面には、荷重点 (図 1 を直面しているように).体重を落とすし、すぐに破壊された後のデバイスからマウスを慎重に取り外します。</li>
	<li>X 線による破壊の場所を確認します。</li>
	<li>骨折大腿骨を安定させるためにガイドワイヤ上 24 ゲージ ステンレス鋼管皮下に挿入します。 注: このアプリケーションのエントリ ポイントは、小さい直径の針を使用して生成された、いくつかの力を必要があります。この直径の違いは、大腿骨の近位端から 24 ゲージ棒の潜在的な移行を効果的に防止します。鈍のチューブは、大転子の皮質骨を満たしているように、挿入の深さは手動で感じることができます。</li>
	<li>ガイドワイヤを削除する前に x 線による骨折大腿骨の安定化と鉄筋の位置を確認します。</li>
	<li>ワイヤー カッターを用いた大腿骨の遠位端で余分なチューブをカットします。鉗子を使用して膝関節を脱臼しないように注意して、穏やかな下向きの力を適用する顆の表面の下で露出配管を埋めます。</li>
	<li>鉗子を用いた膝蓋骨の位置を変更します。5-0 吸収性縫合糸で切開部位を閉じます。</li>
</ol>3. 術後管理
<ol><li>術では、術後回復にそれらを支援するために i. p. ルートにマウス可能性があります最大 500 μ L の滅菌生理食塩水を介してを注入します。</li>
	<li>手術から目を覚ますまで、温水回復ベッド上の動物を監視します。一度、歩行、ケージに戻します。</li>
	<li>彼らは適切に治癒されており、可動性を取り戻すように手術後数日間マウスを密接に監視し続けます。ブプレノルフィン塩酸塩鎮痛 0.03 mg/kg 皮下すべて 6 h 術後、3 日間のおよび管理に応じてその後。彼らは手術後骨の治癒過程を阻害する示されている、非ステロイド性抗炎症薬 (NSAIDs) の使用を避けてください。</li>
</ol>

<ol><li>Schnell, S., Friedman, S. M., Mendelson, D. A., Bingham, K. W., Kates, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+1-Year+Mortality+of+Patients+Treated+in+a+Hip+Fracture+Program+for+Elders%5BTitle%5D)+AND+%22Geriatric+Orthopaedic+Surgery+%26+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">The 1-Year Mortality of Patients Treated in a Hip Fracture Program for Elders.</a> Geriatric Orthopaedic Surgery & Rehabilitation. 1 (1), 6-14 (2010).</li>
<li>Burge, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+and+economic+burden+of+osteoporosis-related+fractures+in+the+United+States%2C+2005-2025%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Incidence and economic burden of osteoporosis-related fractures in the United States, 2005-2025.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 22 (3), 465-475 (2007).</li>
<li>Cunningham, B. P., Brazina, S., Morshed, S., Miclau, T. III <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fracture+healing%3A+A+review+of+clinical%2C+imaging+and+laboratory+diagnostic+options%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">Fracture healing: A review of clinical, imaging and laboratory diagnostic options.</a> Injury. 48, S69-S75 (2017).</li>
<li>Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Can+an+anti-fracture+agent+heal+fractures%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cases+in+Mineral+and+Bone+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Can an anti-fracture agent heal fractures?</a> Clinical Cases in Mineral and Bone Metabolism. 7 (1), 11-14 (2010).</li>
<li>Hak, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+union+and+nonunions%3A+epidemiology%2C+clinical+issues%2C+and+financial+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">Delayed union and nonunions: epidemiology, clinical issues, and financial aspects.</a> Injury. 45, Suppl 2. S3-S7 (2014).</li>
<li>Decker, S., Reifenrath, J., Omar, M., Krettek, C., Muller, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-osteotomy+and+osteotomy+large+animal+fracture+models+in+orthopedic+trauma+research%5BTitle%5D)+AND+%22Orthopaedic+Reviews+%28Pavia%29%22%5BJournal%5D)">Non-osteotomy and osteotomy large animal fracture models in orthopedic trauma research.</a> Orthopaedic Reviews (Pavia). 6 (4), 5575(2014).</li>
<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+bone+healing+models%3A+standards%2C+tips%2C+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49 (4), 591-599 (2011).</li>
<li>Jacenko, O., Olsen, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+mouse+models+in+studies+of+skeletal+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Rheumatology+Supplement%22%5BJournal%5D)">Transgenic mouse models in studies of skeletal disorders.</a> Journal of Rheumatology Supplement. 43, 39-41 (1995).</li>
<li>Nikolaou, V. S., Efstathopoulos, N., Kontakis, G., Kanakaris, N. K., Giannoudis, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+osteoporosis+in+femoral+fracture+healing+time%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">The influence of osteoporosis in femoral fracture healing time.</a> Injury. 40 (6), 663-668 (2009).</li>
<li>Bain, S. D., Bailey, M. C., Celino, D. L., Lantry, M. M., Edwards, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-dose+estrogen+inhibits+bone+resorption+and+stimulates+bone+formation+in+the+ovariectomized+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">High-dose estrogen inhibits bone resorption and stimulates bone formation in the ovariectomized mouse.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 8 (4), 435-442 (1993).</li>
<li>Haffner-Luntzer, M., Kovtun, A., Rapp, A. E., Ignatius, A. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s40610-016-0037-3">Mouse Models in Bone Fracture Healing Research.</a> Current Molecular Biology Reports. 2 (2), 101-111 (2016).</li>
<li>Einhorn, T. A., Gerstenfeld, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fracture+healing%3A+mechanisms+and+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+in+Rheumatology%22%5BJournal%5D)">Fracture healing: mechanisms and interventions.</a> Nature Reviews in Rheumatology. 11 (1), 45-54 (2015).</li>
<li>Schindeler, A., McDonald, M. M., Bokko, P., Little, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+remodeling+during+fracture+repair%3A+The+cellular+picture%5BTitle%5D)+AND+%22Seminar+in+Cellular+and+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Bone remodeling during fracture repair: The cellular picture.</a> Seminar in Cellular and Developmental Biology. 19 (5), 459-466 (2008).</li>
<li>Ai-Aql, Z. S., Alagl, A. S., Graves, D. T., Gerstenfeld, L. C., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanisms+controlling+bone+formation+during+fracture+healing+and+distraction+osteogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dental+Research%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanisms controlling bone formation during fracture healing and distraction osteogenesis.</a> Journal of Dental Research. 87 (2), 107-118 (2008).</li>
<li>Gerstenfeld, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+Reconstruction+of+Fracture+Callus+Morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Histochemistry+%26+Cytochemistry%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional Reconstruction of Fracture Callus Morphogenesis.</a> Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 54 (11), 1215-1228 (2006).</li>
<li>Marsell, R., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20182234">Emerging bone healing therapies.</a> Journal of Orthopaedic Trauma. 24, Suppl 1. S4-S8 (2010).</li>
<li>Lybrand, K., Bragdon, B., Gerstenfeld, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+bone+healing%3A+fracture%2C+marrow+ablation%2C+and+distraction+osteogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+of+Mouse+Biology%22%5BJournal%5D)">Mouse models of bone healing: fracture, marrow ablation, and distraction osteogenesis.</a> Current Protocols of Mouse Biology. 5 (1), 35-49 (2015).</li>
<li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+LockingMouseNail--a+new+implant+for+standardized+stable+osteosynthesis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">The LockingMouseNail--a new implant for standardized stable osteosynthesis in mice.</a> Journal of Surgical Research. 169 (2), 220-226 (2011).</li>
<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+internal+locking+plate+to+study+intramembranous+bone+healing+in+a+mouse+femur+fracture+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">An internal locking plate to study intramembranous bone healing in a mouse femur fracture model.</a> Journal of Orthopaedic Research. 28 (3), 397-402 (2010).</li>
<li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+technique+for+internal+fixation+of+femoral+fractures+in+mice%3A+impact+of+stability+on+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechistry%22%5BJournal%5D)">A new technique for internal fixation of femoral fractures in mice: impact of stability on fracture healing.</a> Journal of Biomechistry. 41 (8), 1689-1696 (2008).</li>
<li>Holstein, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+establishment+of+defined+mouse+models+for+the+study+of+fracture+healing+and+bone+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Trauma%22%5BJournal%5D)">Advances in the establishment of defined mouse models for the study of fracture healing and bone regeneration.</a> Journal of Orthopaedic Trauma. 23 (5 Suppl), S31-S38 (2009).</li>
<li>Bonnarens, F., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+a+standard+closed+fracture+in+laboratory+animal+bone%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Production of a standard closed fracture in laboratory animal bone.</a> Journal of Orthopaedic Research. 2 (1), 97-101 (1984).</li>
<li>Holstein, J. H., Menger, M. D., Culemann, U., Meier, C., Pohlemann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+locking+femur+nail+for+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechistry%22%5BJournal%5D)">Development of a locking femur nail for mice.</a> Journal of Biomechistry. 40 (1), 215-219 (2007).</li>
<li>McBride-Gagyi, S. H., McKenzie, J. A., Buettmann, E. G., Gardner, M. J., Silva, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bmp2+conditional+knockout+in+osteoblasts+and+endothelial+cells+does+not+impair+bone+formation+after+injury+or+mechanical+loading+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Bmp2 conditional knockout in osteoblasts and endothelial cells does not impair bone formation after injury or mechanical loading in adult mice.</a> Bone. 81, 533-543 (2015).</li>
<li>Williams, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+CaMKK2+Enhances+Fracture+Healing+by+Stimulating+Indian+Hedgehog+Signaling+and+Accelerating+Endochondral+Ossification%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Inhibition of CaMKK2 Enhances Fracture Healing by Stimulating Indian Hedgehog Signaling and Accelerating Endochondral Ossification.</a> Journal of Bone and Mineral Research. , (2018).</li>
</ol>

この原稿の著者が明らかに何もありません。著者は、本稿で報告される調査で使用されるすべての材料へのフル アクセスに制限がない状態をさらに。

この手術の目的は、マウスで標準化された閉じた大腿骨骨折を生成することです。このモデルの主な利点は内部固定の髄内ロッドの湾曲を回避するため、破壊の発生後に行われる。おそらくこのプロトコルの最も重要な側面は、骨折の幾何学は、曲げ力や後肢の位置に依存して標準化された横骨折大腿骨骨幹の世代です。大腿骨の不適切な配置は、曲げモーメントの間に斜めのまたは粉砕骨折につながることができます。重量とドロップの高さは、年齢、性別、およびマウスのひずみに依存しており、経験的に決められたなければなりません。試験機は装備ドロップ重量24の代わりに三点曲げ装置材料を用いた応用力をさらに制御できます。ただし、生成ドロップ重量と骨折は高衝撃やストレス関連の傷害の臨床的に関連するモデルです。
さらに、手術中に合併症を生じる。ガイドワイヤは脱臼骨折、髄内ロッドと安定化中に負傷した大腿骨のミスアラインメントにリードの生成後になるかもしれません。これは、骨折の発生の前後に放射線イメージングによるモニタリングによって防ぐことができます。粉砕骨折の場合動物は研究から除外する必要...

骨折などの筋骨格系に発生する最も一般的な傷害と $ 250 億アメリカ合衆国1で毎年を上回ると予想される治療費を含む多大な経済的負担に関連付けられて 2。骨折の大半は、何事もなく治癒、癒しは実質的なダウンタイムや生産性の損失に関連付けられています。全骨折の約 5-10% は、遅延癒しや非組合員、年齢や骨粗鬆症、糖尿病の3,4,5などの他の基になる慢性の健康状態のために します。現在効率的な骨の治癒を促進し、回復時間を短縮できる FDA 承認の薬理学的治療法がありません。
骨折治癒は種類の細胞の調整を含む複雑な非常にダイナミックなプロセスです。したがって、骨再生に関連する細胞・分子のイベントの包括的な理解は、このプロセスを加速させる治療標的の同定に重要です。他の人間の病気と同様に、非常に従順で再現可能な動物モデルの確立も骨の治癒の研究で非常に重要です。羊や豚などの大型動物骨改造プロパティとバイオメカニクス、人間に似ていますが高価、実質的な癒しの時間を必要とする、ない遺伝子操作6に簡単に従わないです。その一方で、ラットやマウスなどの小型の動物モデルは処理、メンテナンス、短い繁殖サイクル、および短い癒し時間7の低コスト性を含めて多くの利点を提供します。さらに、マウスのゲノムは、迅速な操作と遺伝的変異の生成を可能にする完全に、シーケンスです。したがって、マウスは人間の病気、怪我、研究および8を修復する強力なモデル システムです。人間では、骨粗鬆症や糖尿病の合併症は、治癒遅延の可能性を高めます。既存マウス モデルの数は骨の損傷に及ぼす骨粗鬆症や糖尿病などの合併症を研究利用可能癒し。骨粗鬆症患者治癒9破壊の後の段階で著しく減少した骨形成があります。卵巣摘出 (ovx) は、急速な骨量の減少と閉経後骨粗鬆症10,11にみられるような治癒遅延骨を示します。さらに、多くの種類のマウス ・ モデル私は、II 型糖尿病低骨マス表現型と模倣障害骨折治癒人間11に見られます。また、マウス骨折モデルはカルスで発生する複雑な生物学的過程を研究している多才なプラットホームとして役立ち、骨再生を加速する新規の治療戦略を探る。
骨の構造と代謝、骨骨折のままマウスとヒトに非常によく似たを治癒のプロセス全体の違いにもかかわらず軟骨と骨リモデリングに続いて膜内骨化の組み合わせを含みます。軟骨内骨化には、前駆細胞の肥大し、柔らかいカルスを生成する軟骨を石化する軟骨細胞に分化し、どこ破壊ギャップの周辺より機械的に安定した地域への採用が含まれます。前駆細胞の 2 番目の波は、カルスに潜入し、新しい骨マトリックス12,13,14,15を分泌する成熟した骨芽細胞に分化します。中膜内骨化、骨膜と骨の表面に前駆細胞は直接骨芽細胞の分泌の行列に区別して破壊ギャップ9,11,12 のブリッジを容易にします。 ,13。一緒に、軟骨と膜内の ossifications がさらに機械的負荷13,14 をサポートできる強力な二次骨を形成するため時間をかけて改造ハード カルスの開発につながる、15。健康な人間で癒しのプロセスは、マウス16で 35 日間と比較して、約 3 カ月かかります。
骨折治癒よく研究されているか開いているか閉じて手術モデル17を使用しています。批判的に大きさで分類された欠陥の生成などの外科的アプローチを開くまたは傷害の位置および粉砕骨折による偏差を軽減するジオメトリを標準化し、骨切りを完了します。閉鎖骨折と比較して治癒がよく遅れているので非組合員の背後にあるメカニズムを研究する優秀なモデルとしては、骨切り術。さらに、厳格な外部固定が再生は主に、膜内骨化の依存を意味、切り離した骨骨を安定させるために必要です。オープン手術アプローチが骨折した手足をもがれる軸と回転安定性を提供するためにロックの釘、ピン、クリップ、ロック プレートなどデバイスを使用します。ただし、このようなデバイスは高価であり、大きく手術18,19,20,21のより多くの時間を必要とします。その一方で、クローズド モデルは軟骨の治癒を促進するのに十分な不安定性を可能にする単純な髄内固定装置で安定しました。その結果、容易に閉じた破壊モデルは非組合員の条件を模倣しません。髄内ピン、釘、ネジ、圧縮などの内部固定技法は、安い、使いやすい、手術21,22,で23時間を最小限に抑えるため有利です。いくつかのケースで、破断前に髄内ピンを挿入が、湾曲や骨折大腿骨、変数カルスの大きさに貢献し、癒しの変位につながる髄内ピンの曲げ。破壊位置やジオメトリは、骨幹に重量をドロップする前記三点曲げ装置を使用して生成されたときクローズド モデルで標準化がより困難です。ただし、適切な技術と、この手術方法は迅速かつ一貫性のある結果を提供しています。また、閉鎖骨折モデルは高い力への影響や機械的ストレス22による骨折を研究する臨床的に関連性の高いツールとして提供しています。
この外科手術は、ラットおよびマウス22,24,25骨折大腿骨を安定させるために髄内ピンを使用して上記の方法から適応されました。まず、小径の髄内針はエントリのポイントを確立する intracondylar ノッチを通して挿入され、横重力依存性の 3 ポイントを使用して大腿骨骨幹骨折を生成する前にガイドワイヤーを導入曲げ装置です。閉じた大腿骨骨折の発生の成功、次のより大きな直径の髄内ロッドはガイドワイヤー骨折大腿骨を安定させるために組み込まれています。このメソッドは、治癒遅延、破壊時に髄内ピンの湾曲によって引き起こされる骨折後ロッドの配置により、負傷した大腿骨の再配置と最適化された安定化のため、危険を回避できます。

<table><tbody><tr><td>オスター ミニマックストリマー</td><td>アニマルワールドネットワーク</td><td>78049-100</td><td></td></tr><tr><td>ポビドン-ヨード</td><td>サーモフィッシャー サイエンティフィック 395516</td><td></td><td></td></tr><tr><td>眼科用軟膏</td><td>サーモフィッシャー サイエンティフィ</td>ック <td>NC0490117</td><td></td></tr><tr><td>スタイカー T/ポンプ 温水リサーキュレーター</td><td>ケント・サイエンティフィック・コーポレーション</td><td>TP-700</td><td></td></tr><tr><td>1ml サブQシリンジ</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td></td><td></td>309597</tr><tr><td>ENCORE Sensi-Touch PF</td><td>Moore Medical LLC</td><td>30347</td><td>ラテックス、パウダーフリー手術用手袋</td></tr><tr><td>PrecisionGlide 25G 皮下注射針</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>14-826-49</td><td></td></tr><tr><td>超高温タングステンワイヤー、</td><td>McMaster-Carr</td><td>3775K37</td><td>直径 0.005インチ、1/16 ポンド スプール、380フィート ロング</td></tr><tr><td>304 ステンレススチール、24G 薄肉チューブ</td><td>Microgroup Inc</td><td>304h24tw-5ft</td><td></td></tr><tr><td>#15 Scalpel Blades</td><td>Fine Science Tools</td><td>10015-00</td><td></td></tr><tr><td>#10 Scalpel Blades</td><td>Fine Science Tools</td><td>10010-00</td><td></td></tr><tr><td>Narrow Pattern Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11002-12</td><td>Serrated/Straight/12cm</td></tr><tr><td>Iris Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11066-07</td><td>1x2 Teeth/Straight/7cm</td></tr><tr><td>ディセクタはさみ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>14081-09</td><td>スリムブレード/側面に角度をつけた/シャープ-シャープ/ 10cm</td></tr><tr><td>ファインはさみ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>14058-11</td><td>タフカット/ストレート/シャープシャープ/ 11.5cm</td></tr><tr><td>オルセンヘガーニードルホルダー縫合カッター付き</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>12002-12</td><td>ストレート/鋸歯状/ 12cm /ロック付き</td></tr><tr><td>クリール止血ファイン</td><td>サイエンスツール</td><td>13004-14</td><td>鋸歯状/ストレート/14cm</td></tr><tr><td>タングステンワイヤーカッター</td><td>ACE Surgical Supply Co., Inc.</td><td>08-051-90</td><td>ACE #150 ワイヤーカッター、タングステンカーバイドチップ</td></tr><tr><td>3-0 VICRYL 縫合糸</td><td>Ethicon 縫合</td>糸 <td>J423H</td><td>3-0 VICRYL UNDYED 27" FS-2 CUTTING</td></tr><tr><td>piXarray 100 デジタル試料 X 線撮影システム</td><td>Bioptics, Inc</td><td></td><td>キャビネット X 線システム</td></tr><tr><td>Einhorn 3 点曲げ装置</td><td>N/A</td><td>N/</td><td>A カスタムメイド</td></tr></tbody></table>

マウスで閉じた大腿骨骨折の生成: 骨の治癒を研究するためのモデル

The Generation of Closed Femoral Fractures in Mice: A Model to Study Bone Healing

骨の骨折は、大幅に生活の質に影響を与えるだけでなく、患者に途方もない社会経済的負担を課する。効率的な骨の治癒を促進する治療戦略は存在しないと需要が高いです。骨折治癒の効果的かつ再現可能な動物モデルは、骨の再生に関連付けられている複雑な生物学的プロセスを理解する必要です。骨折治癒の多くの動物モデルは、長年にわたり; 生成されています。ただし、マウス骨折モデル最近骨の治癒を研究する強力なツールとして浮上しています。さまざまなオープンとクローズのモデルが開発されているが、生理学的に関連する方法で迅速かつ再現性のある結果を生成するための簡単な方法として際立っている閉じた大腿骨骨折モデル。この外科手術の目的は、マウスの一方的な閉鎖大腿骨骨折を生成し、髄内に鋼棒を挿入することによって大腿骨の骨折後の安定化を促進します。髄内ロッドの使用が骨組織で新たな不具合を生産やソフトの近くに損なうことがなく一貫した治癒転帰のための十分な安定化を提供しますが、釘やネジなどのデバイスより高い軸と回転安定性を提供組織。放射線イメージングを使用して、カルスの形成、骨性癒合および骨のカルスの後改造の進行を監視します。骨治癒転帰は通常治癒後の骨の強さに関連付けられているし、ねじり試験で計測。まだ、損傷修復に関連付けられている初期の細胞・分子のイベントについて骨再生の研究で重要です。髄内固定を持つマウスで閉じた大腿骨骨折モデルは骨骨折治癒研究・治癒を促進する治療戦略を評価するための魅力的なプラットフォームとして機能します。

手術の成功の実装は、放射線イメージングと監視されました。キーの手順には、髄内針、ガイドワイヤーの配置、横骨折大腿骨骨幹と (図 2 a私- 2Aiv) 髄内ロッドと適切な安定化の誘導の挿入が含まれます。破壊カルスの治癒の進行 (図 2 b) 術後 28 日を毎週放射線画像監視だった。日 10-16 後破壊で、軟骨細胞は肥大を施行し、著名なカルスを形成する石灰化軟骨を生成.
骨骨折治癒を勉強して軟骨と膜内の ossifications に関与する分子・細胞の初期イベントを理解することは重要です。大腿骨とトルイジン ブルー 7 および 14 日後破壊破壊ギャップ (図 3 a) で軟骨の形成を視覚化するために染色...

クローズド マウスの大腿骨骨折モデルは骨折治癒を勉強する強力なプラットフォームで骨の再生を加速する新しい治療戦略です。この外科手術の目的は、大腿骨を安定させるために髄内鋼棒を用いたマウスで一方的な閉鎖大腿骨骨折を生成します。

Bone fractures impose a tremendous socio-economic burden on patients, in addition to significantly affecting their quality of life. Therapeutic strategies ...

この方法は、骨折治癒研究における重要な疑問に答えるのに役立ちます 修復の生物学的メカニズムと、効率的な骨治癒を促進するための新しい治療戦略の開発。この技術の主な利点は、マウスの骨折治癒を研究するための標準化された骨折を生成するための低侵襲手順として機能することです。外科的処置のデモンストレーションは、私たちの研究室の技術者であるYongLiとAnuradha ValiyaKambrathです。つま先つまみで適切な鎮静量を確認した後、麻酔をかけた10週齢の雄マウスの眼に軟膏を塗布し、右後肢の毛皮を切除します。膝の中心から始めて外側に円形に掃引し、露出した皮膚を3つの連続したヨウ素ベースおよび70%エタノールスクラブで消毒し、マウスを滅菌外科用ドレープで覆われた加熱パッドの上に仰臥位に置きます。手術脚の膝を曲げ、メスの刃を使用して、膝関節の中央に1.5センチの切開を行います。鉗子を使用して膝蓋骨を横方向に変位させ、大腿骨の遠位端を露出させ、滑車溝の中心に長さ1.5インチ、25ゲージのステンレス鋼皮下注射針を滑車溝の中心に逆行方向に挿入します。ピンが適切に配置されていることを確認するために、X線を撮ります。次に、長さ4インチ、36ゲージのタングステンガイドワイヤーを針のシャフトに通し、大腿骨遠位部のハブに通し、マウスの背側の斜角を出ます。ガイドワイヤーが正常に配置されたら、ハブをそっと引いて、手足とガイドワイヤーを所定の位置に保持しながら針を慎重に取り外し、X線でガイドワイヤーの配置を確認します。次に、マウスを重力依存の3点曲げ装置に置き、大腿骨の転子間および顆上領域が支持アンビルに載り、四肢の側面がローディングポイントに面するように、大腿骨を2つの支持点を横切って水平に配置します。このプロトコルの最も重要なステップは、骨折の形状が加えられた曲げ力と後肢の位置に依存するため、3点曲げ装置内に大腿骨を配置することです。大腿骨が所定の位置にあるとき、デバイスのインパクトディスクから34.6センチメートル上に391グラムの重りを配置し、重りを落とします。すぐに、しかし慎重に、マウスをデバイスから取り外し、X線で骨折位置を確認します。ガイドワイヤーに24ゲージのステンレス製皮下注射チューブを挿入して骨折した骨を安定させ、X線で鋼棒の位置と骨折した大腿骨の安定化を確認します。ガイドワイヤーを取り外し、ワイヤーカッターを使用して、大腿骨の遠位端にある余分なチューブを取り外します。鉗子を使用して、膝関節を脱臼しないように注意しながら、露出したチューブを顆の表面の下に埋めるために穏やかな下向きの力を加え、膝蓋骨の位置を変更します。次に、5-0吸収性縫合糸で切開部位を閉じます。手術が完了したら、各マウスに最大500マイクロリットルの滅菌生理食塩水を腹腔内に注射して、術後の回復を助け

the-generation-closed-femoral-fractures-mice-model-to-study-bone

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

偽骨折、無菌筋骨格系の外傷の再現性のマウスモデルは、後期長期外傷後の免疫応答の評価することができます。この記事では、複数の外傷の研究を可能にするために実験モデルの組み合わせの可能性を含む、ステップごとのモデルの段階の手続きの実行を、説明します。...

偽骨折：急性末梢組織外傷モデル

動物モデルは、生物医学研究において深刻な骨損傷を模倣するために頻繁に使用されます。マウスはサイズが小さいため、ほとんどの研究グループの能力を超えています。ここでは、マウスの実験的大腿骨欠損を確立および分析するための簡単な方法について説明します。...

マウスの簡単な重要なサイズの大腿欠陥モデル

マウスモデルは骨組織工学にとって非常に貴重なツールですが、長骨欠損のモデルはまばらです。この必要性は、4 本のネジと専用の治具を備えたロッキング...

プレート骨接合によって安定化マウスにおけるセグメント別大腿臨界サイズ欠陥モデルの確立

このプロトコルは、マウスの正常および欠陥のある骨治癒を分析するために使用できる、大腿骨骨切り術の標準化された固定のための髄内ロッキングネイルを使用した骨接合技術について説明しています。...

マウスにおける正常および不良骨治癒を分析するために大腿骨骨切り術の標準化された固定用髄内ロッキングネイル

このプロトコルでは、時効中における組織再生の研究をパラビオーゼと組み合わせれば術後 neuroinflammation と行動変容のメカニズムの研究に使用されている整形外科のマウス...

整形外科術後の高次脳機能障害と組織再生を研究するマウス モデル

このプロトコルでは、大腿骨の骨折は、癒しのマウスにおける軟骨内骨を分析するための標準化された安定化髄内ねじを用いた低侵襲骨接合法について説明します。...

癒しの標準化された生体力学的条件下でマウスの軟骨破壊を分析する低侵襲モデル

プロトコルの目的は、コンシス テント ・...

破壊装置設計と齧歯動物で閉じて安定骨折に対するプロトコルの最適化

このプロトコルは、成体マウスに骨折を行い、治癒過程を監視する方法を記載する。...

安定化ピン付きマウス大腿骨の横骨折

ここでは、Wistarアルビノラットの大腿骨のシャフトを医原性的に破壊し、カルスの発達を追跡するためのプロトコルを提示します。この大腿骨骨切り術モデルは、研究者が骨折治癒のプロセスを評価し、薬物が骨折治癒にどのように影響するかを研究するのに役立ちます。...

Wistarアルビノラットにおける大腿骨骨切り術モデルを開発するためのプロトコル

このプロトコルは、骨折治癒研究のために、髄内ワイヤーで安定化されるマウスの大腿骨に骨幹骨折を確立するための外科的処置を説明しています。...

マウスにおける骨幹大腿骨骨折モデルの確立

マウス骨髄損傷モデルは、出生後の骨形成を膜内骨化で研究するための有用なツールです。この簡略化された外科的プロトコルは、損傷後の新しい骨形成と細胞反応の下流評価のための骨髄アブレーション手順を説明しています。...

マウス骨髄損傷モデルにおける膜内骨化による出生後骨形成の研究方法の改善

学ぶマウス閉鎖大腿骨骨折モデルによる骨治癒研究法。最小侵襲で標準化された骨折を生成し、骨再生の生物学的メカニズムと新規治療戦略の開発を支援します。

マウスで閉じた大腿骨骨折の生成: 骨の治癒を研究するためのモデル

さらに動画を探す