Name: OP-IVM:卵母細胞検索後の体外成熟と婦人科手術の組み合わせ (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 31 s
Description: 学ぶOP-IVM技術による卵母細胞検索後の体外成熟と婦人科手術の組み合わせ方法。不妊・亜不妊女性や卵巣嚢胞症候群患者、がん治療前の生殖能力保存を必要とする患者への応用を含む。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

この作品は、中国国家キーR&Dプログラムからの助成金によって支えられました(いいえ。 2017YFC1002000,2018YFC1004001,2019YFA0801400,中国国立科学財団(81571386,81730038),CAMS医学イノベーション基金(2019-I2M-5-001)、中国資本健康開発特別研究プロジェクト(2018-209-409-409)。

注:OP-IVM法に関する研究は、北京大学第三病院の機関審査委員会(IRB)と北京大学倫理委員会(2014S2004)によって承認されています。OP-IVM の概要を図 1に示します。次のセクションでは、手順を説明します。
1. 適切な患者へのOP-IVMの導入
<ol><li>ステップ 1.1.1-1.1.3 で説明されているようなOP-IVMの恩恵を受ける可能性のある潜在的な患者を特定します。<ol>
<li>腹腔鏡下卵巣穿孔手術を必要とするクロミフェン耐性を有する多嚢胞性卵巣症候群(PCOS)患者。</li>
		<li>ART治療前に、子宮鏡下筋切除術、多形切除術、中隔および腹腔鏡下管切除術の経子宮頸部切除、および卵巣嚢胞切除術などの良性婦人科手術を必要とする不妊患者。</li>
		<li>化学放射線療法または放射線療法を受けている癌または血管疾患を有する患者。</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. インフォームド・コンセント
<ol><li>OP-IVMが有益である理由、その手順、IVM卵母細胞(IVF-ETまたは凍結保存)の使用、推定CDRおよびLBR、および合併症の可能性を含む、患者に完全な情報を提供する。同意書に署名して、患者にインフォームド・コンセントを提出してもらいます。</li>
</ol>3. ラベルとIVM卵子培地を準備する
<ol><li>培養皿および管のための患者の名前および日付の印字の識別(ID)ラベル。</li>
	<li>4ウェルプレートの各ウェルに0.075 IU/mLの卵胞刺激ホルモン(FSH)と0.075 IU/mLの黄体形成ホルモン(LH)を添加するIVM培地の0.5 mLを加えます。媒体を油で覆います。 注:これらすべての手順を、ラミナーフロークリーンベンチで実行します。</li>
	<li>使用前に5%CO2および5%O2を含む加湿空気中の37°CのIVM卵母細胞培地と4ウェルプレートを予熱する。</li>
</ol>4. 手術室で麻酔を行う
<ol><li>麻酔をする前に患者の名前を確認してください。</li>
	<li>麻酔科医によって患者を静脈内麻酔する。</li>
</ol>5. 卵母細胞の検索を行う
<ol><li>ラベルに、カルチャ料理やチューブの名前、日付、ID をタグ付けします。</li>
	<li>膀胱リトトミーの位置に患者を置く;常に消毒し、ドレープし、暖かい生理液で膣をスクラブします。</li>
	<li>膣内の超音波プローブを配置します。両方の卵巣の卵胞の数をスキャンし、記録します。穿刺部位として卵巣に最も近い場所を見つけ、腸、膀胱、および大きな血管を避ける。</li>
	<li>濾胞液を吸引する。<ol>
<li>穿刺する前に、pH安定なハンドリング媒体で針を洗浄します( 材料表を参照)。</li>
		<li>超音波の指導の下で卵巣に19G、単一内腔吸引針を注入する。</li>
		<li>プローブに最も近い明確な境界を持つ大きな卵胞を穿刺する。低い位置で、すぐに25 U/mLのヘパリンを補ったリンス溶液を注入する。80-90 mmHgの圧力下で針を持つ濾胞液を吸引し、針をわずかに回転させ、できるだけ多くの濾胞液を吸引する。この平面上の近くから遠い側に他の卵胞を穿刺します。 注:吸引の間、卵母細胞を含む濾胞液は陰圧下で無菌10 mL試験管に流れ込みます。ヘパリンは、吸引プロセスを容易にするために濾胞液粘度を低下させることができる。</li>
		<li>卵巣から針を取り出します(針を膣壁に入れる)。超音波プローブの方向を調整し、他の平面上の残りの卵胞を穿刺します。直径5~9mmの卵胞をすべて吸引してみてください。 注:プローブの位置を調整して、常に卵巣に最も近い位置に保ちます。膣のフォルニックスを適切な力で押して、傷害と出血を軽減します。</li>
		<li>一方の卵巣で仕上げ終えた針を引き出し、ハンドリング媒体で針を洗い、もう一方の側を同じ方法で穿刺する。 注:25〜30分以内に完全な卵胞の吸引。</li>
	</ol>
</li>
	<li>患者の名前とIDを確認した後、数分以内に手術室からIVF検査室に濾胞液を移す。 注:凝固を防ぐために、できるだけ早くIVF実験室のベンチに吸引濾胞液を移す。</li>
	<li>すべての卵胞を穿刺した後、Bモード超音波で骨盤腔内の活動性出血を検出する。鏡を挿入し、後部fornixに先端を向けて穿刺部位での活発な出血を検出する。 注:卵巣の位置が正常であり、卵母細胞の検索が慎重に行われる場合、膣穿刺部位では活性出血は認めてはならない。圧縮後も続く軽い出血の場合は、2〜4時間膣内で無菌ガーゼの圧縮を保ちます。2-4時間の血管鉗子を有するクランプを使用して、小動脈からの過度の出血を制御する。めったに起こらない骨盤腔または卵巣の出血は、腹腔鏡手術による電気凝固によって制御されるべきである。</li>
</ol>6. 婦人科手術
<ol><li>患者の必要性および状態に基づいて、卵母細胞の検索後に適切な婦人科手術を行う。<ol>
<li>クロミフェン耐性を有する多嚢胞性卵巣症候群(PCOS)患者に対して腹腔鏡下卵巣穿孔手術を行う。</li>
		<li>子宮鏡下筋切除術、多形切除術、中隔および腹腔鏡下管切除術、および卵巣嚢胞切除術などのART治療の前に不妊患者に対して良性婦人科手術を行う。</li>
		<li>化学放射線療法を受ける必要がある癌または血管疾患の患者の生殖能力凍結保存のための卵巣切分術を行う。 注:これらの婦人科手術は、基本的かつ標準化された臨床手術です。各国や病院の運営ガイドラインは比較的似ているはずです。</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. IVM を実行する
注:37°CのホモサーマルフラットでIVMの全工程を実行します。
<ol><li>70 μm のナイロンセルストレーナーで、吸引した卵胞液をフィルター処理します。培養管とストレーナーを、あらかじめ温めたpH安定ハンドリング培地で繰り返しすすいます。すべての未熟なCOCが完全に培養皿に移されることを確認します。100 x 15 mm のペトリ皿にろ過した液体、すすがり、培養を収集します。</li>
	<li>40倍の倍率でステレオスコープの下にあるCOC(図2)を調べます。未熟者を温めるIVM卵母細胞培地に素早く移します。 注: オペレータの習慣に応じて、適切な倍率を選択します。</li>
	<li>培養された未熟なCOCの数を記録します。</li>
	<li>培養したCOCの数を患者に知らせる。患者とそのパートナーと精液のコレクションについて話し合います。通常の手順に従って精子抽出を行います.</li>
	<li>5%CO2及び5%O2 を含む加湿空気中の37°Cで28〜32時間の不成熟なCOCSを培養する。</li>
	<li>卵母細胞の成熟度を評価します。<ol>
<li>40倍の倍率で立体鏡下のガラスパスツールピペットを使用して繰り返しピペット処理を行い、積Mulus細胞を脱裸にした。極体(PB)の押し出しを調べて、卵母細胞の発達段階を特定する。明確な形態学的特徴を持つCOCs、転移II(MII)、転移I(MI)、および生殖小胞(GV)における卵母細胞の代表的な画像については 、図2 を参照してください。 注:ガラスパスツールピペットの直径を卵母細胞の大きさに調整するには、垂直炎(例えば、ブンゼンバーナーの)を使用してください。</li>
		<li>MII卵母細胞をカウントし、数を記録します。</li>
		<li>IVFまたはガラス化のために成熟卵母細胞を選択してください。 注:卵母細胞がIVFのために成熟した日に精子を収集しますが、卵子のガラス化のためではありません。</li>
		<li>GVおよびMI段階で未熟卵母細胞を、さらに10〜14時間のcumulus細胞を用いた元のIVM培地で培養する。ステップ 7.6.2 ~ 7.6.3 を繰り返します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>8. ICSI または卵卵子ガラス化を行う
<ol><li>生殖センター8の標準的な手順に従ってください。</li>
</ol>9. 培養胚と胚凍結保存を行う
<ol><li>生殖センター8の標準的な手順に従ってください。</li>
</ol>

<ol><li>Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effectiveness+and+safety+of+in+vitro+maturation+of+oocytes+versus+in+vitro+fertilization+in+women+with+a+high+antral+follicle+count%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count.</a> Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).</li>
<li>Yang, Z. Y., Chian, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+in+vitro+maturation+techniques+for+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Development of in vitro maturation techniques for clinical applications.</a> Fertility and Sterility. 108 (4), 577-584 (2017).</li>
<li>Hatirnaz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+in+vitro+maturation%3A+A+sytematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Turkish+Journal+of+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Oocyte in vitro maturation: A sytematic review.</a> Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 15 (2), 112-125 (2018).</li>
<li>Gremeau, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+maturation+or+in+vitro+fertilization+for+women+with+polycystic+ovaries%3F+A+case-control+study+of+194+treatment+cycles%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">In vitro maturation or in vitro fertilization for women with polycystic ovaries? A case-control study of 194 treatment cycles.</a> Fertility and Sterility. 98 (2), 355-360 (2012).</li>
<li>Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effectiveness+and+safety+of+in+vitro+maturation+of+oocytes+versus+in+vitro+fertilization+in+women+with+a+high+antral+follicle+count%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count.</a> Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).</li>
<li>Sahin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+should+be+the+preferred+technique+during+laparoscopic+ovarian+cystectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Sciences%22%5BJournal%5D)">Which should be the preferred technique during laparoscopic ovarian cystectomy.</a> Reproductive Sciences. 24 (3), 393-399 (2017).</li>
<li>Xiao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+hemostatic+methods+on+ovarian+reserve+and+fertility+in+laparoscopic+ovarian+cystectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Therapeutic%22%5BJournal%5D)">Impact of hemostatic methods on ovarian reserve and fertility in laparoscopic ovarian cystectomy.</a> Experimental and Therapeutic. 17 (4), 2689-2693 (2019).</li>
<li>Song, X. -L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+the+scope+of+in+vitro+maturation+for+fertility+preservation%3A+transvaginal+retrieval+of+immature+oocytes+during+endoscopic+gynaecological+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Enhancing the scope of in vitro maturation for fertility preservation: transvaginal retrieval of immature oocytes during endoscopic gynaecological procedures.</a> Human Reproduction. 35 (4), 837-846 (2020).</li>
<li>Magnusson, Å, Källen, K., Thurin-Kjellberg, A., Bergh, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+number+of+oocytes+retrieved+during+IVF%3A+a+balance+between+efficacy+and+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">The number of oocytes retrieved during IVF: a balance between efficacy and safety.</a> Human Reproduction. 33 (1), 58-64 (2018).</li>
<li>Larose, H., et al. Gametogenesis: A journey from inception to conception. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLarose%2C+H+%22Current+Topics+in+Developmental+Biology%22">Current Topics in Developmental Biology</a>. Wellik, D. M., et al. 132, Academic Press. 257-310 (2019).</li>
<li>Broer, S. L., Broekmans, F. J. M., Laven, J. S. E., Fauser, B. C. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-M%C3%BCllerian+hormone%3A+ovarian+reserve+testing+and+its+potential+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction+Update%22%5BJournal%5D)">Anti-Müllerian hormone: ovarian reserve testing and its potential clinical implications.</a> Human Reproduction Update. 20 (5), 688-701 (2014).</li>
<li>Arce, J. C., La Marca, A., Mirner Klein, B., Nyboe Andersen, A., Fleming, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antim%C3%BCllerian+hormone+in+gonadotropin+releasing-hormone+antagonist+cycles%3A+prediction+of+ovarian+response+and+cumulative+treatment+outcome+in+good-prognosis+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Antimüllerian hormone in gonadotropin releasing-hormone antagonist cycles: prediction of ovarian response and cumulative treatment outcome in good-prognosis patients.</a> Fertility and Sterility. 99 (6), 1644-1653 (2013).</li>
<li>Katayama, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound-guided+transvaginal+needle+aspiration+of+follicles+for+in+vitro+fertilization%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Ultrasound-guided transvaginal needle aspiration of follicles for in vitro fertilization.</a> Obstetrics and Gynecology. 72 (2), 271-274 (1988).</li>
<li>Dellenbach, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transvaginal+sonographically+controlled+follicle+puncture+for+oocyte+retrieval%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Transvaginal sonographically controlled follicle puncture for oocyte retrieval.</a> Fertility and Sterility. 44 (5), 656-662 (1985).</li>
<li>Hirata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concomitant+ovarian+drilling+and+oocyte+retrieval+by+laparoendoscopic+single-site+surgery+led+to+live+birth+using+in+vitro+maturation+of+oocyte+and+transfer+of+frozen-thawed+blastocyst+in+woman+with+polycystic+ovary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Obstetrics+and+Gynaecology+Research%22%5BJournal%5D)">Concomitant ovarian drilling and oocyte retrieval by laparoendoscopic single-site surgery led to live birth using in vitro maturation of oocyte and transfer of frozen-thawed blastocyst in woman with polycystic ovary syndrome.</a> Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 40 (5), 1431-1435 (2014).</li>
<li>Deutinger, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follicular+aspiration+for+in+vitro+fertilization%3A+sonographically+guided+transvaginal+versus+laparoscopic+approach%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Obstetrics%2C+Gynecology%2C+and+Reproductive+Biology%22%5BJournal%5D)">Follicular aspiration for in vitro fertilization: sonographically guided transvaginal versus laparoscopic approach.</a> European Journal of Obstetrics, Gynecology, and Reproductive Biology. 26 (2), 127-133 (1987).</li>
<li>Tanbo, T., Henriksen, T., Magnus, O., Abyholm, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+retrieval+in+an+IVF+program.+A+comparison+of+laparoscopic+and+transvaginal+ultrasound-guided+follicular+puncture%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Obstetricia+et+Gynecologica+Scandinavica%22%5BJournal%5D)">Oocyte retrieval in an IVF program. A comparison of laparoscopic and transvaginal ultrasound-guided follicular puncture.</a> Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 67 (3), 243-246 (1988).</li>
<li>Nagy, Z. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+and+birth+after+intracytoplasmic+sperm+injection+of+in+vitro+matured+germinal-vesicle+stage+oocytes%3A+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Pregnancy and birth after intracytoplasmic sperm injection of in vitro matured germinal-vesicle stage oocytes: case report.</a> Fertility and Sterility. 65 (5), 1047-1050 (1996).</li>
<li>Söderström-Anttila, V., Mäkinen, S., Tuuri, T., Suikkari, A. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Favourable+pregnancy+results+with+insemination+of+in+vitro+matured+oocytes+from+unstimulated+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Favourable pregnancy results with insemination of in vitro matured oocytes from unstimulated patients.</a> Human Reproduction. 20 (6), 1534-1540 (2005).</li>
<li>Hwang, J. L., Lin, Y. H., Tsai, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+maturation+and+fertilization+of+immature+oocytes%3A+a+comparative+study+of+fertilization+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Assisted+Reproduction+and+Genetics%22%5BJournal%5D)">In vitro maturation and fertilization of immature oocytes: a comparative study of fertilization techniques.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 17 (1), 39-43 (2000).</li>
<li>Walls, M., Junk, S., Ryan, J. P., Hart, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IVF+versus+ICSI+for+the+fertilization+of+in-vitro+matured+human+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Biomedicine+Online%22%5BJournal%5D)">IVF versus ICSI for the fertilization of in-vitro matured human oocytes.</a> Reproductive Biomedicine Online. 25 (6), 603-607 (2012).</li>
<li>Park, J. H., Jee, B. C., Kim, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+normal+and+abnormal+fertilization+of+in+vitro-matured+human+oocyte+according+to+insemination+method%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Obstetrics+and+Gynaecology+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of normal and abnormal fertilization of in vitro-matured human oocyte according to insemination method.</a> Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 42 (4), 417-421 (2016).</li>
<li>Ho, V. N. A., Pham, T. D., Le, A. H., Ho, T. M., Vuong, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+birth+rate+after+human+chorionic+gonadotropin+priming+in+vitro+maturation+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ovarian+Research%22%5BJournal%5D)">Live birth rate after human chorionic gonadotropin priming in vitro maturation in women with polycystic ovary syndrome.</a> Journal of Ovarian Research. 11 (1), 70(2018).</li>
<li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hCG+priming+on+embryonic+development+of+immature+oocytes+collected+from+unstimulated+women+with+polycystic+ovarian+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Biology+and+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Effect of hCG priming on embryonic development of immature oocytes collected from unstimulated women with polycystic ovarian syndrome.</a> Reproductive Biology and Endocrinology. 10, 40(2012).</li>
<li>Tannus, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictive+factors+for+live+birth+after+in+vitro+maturation+of+oocytes+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Gynecology+and+Obstetrics%22%5BJournal%5D)">Predictive factors for live birth after in vitro maturation of oocytes in women with polycystic ovary syndrome.</a> Archives of Gynecology and Obstetrics. 297 (1), 199-204 (2018).</li>
<li>Cohen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+pregnancy+and+live+birth+rates+after+vitrification+of+in+vitro+matured+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Assisted+Reproduction+and+Genetics%22%5BJournal%5D)">Decreased pregnancy and live birth rates after vitrification of in vitro matured oocytes.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 35 (9), 1683-1689 (2018).</li>
<li>Yazdanpanah, F., Khalili, M. A., Eftekhar, M., Karimi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+vitrification+on+maturation+and+viability+capacities+of+immature+human+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Gynecology+and+Obstetrics%22%5BJournal%5D)">The effect of vitrification on maturation and viability capacities of immature human oocytes.</a> Archives of Gynecology and Obstetrics. 288 (2), 439-444 (2013).</li>
</ol>

著者らは開示するものは何もない。

この記事で説明するOP-IVM法は、従来のIVMアプリケーションにまで及び、卵母細胞の検索後のIVMと日常的な婦人科手術を組み合わせたものです。婦人科手術で失われたであろう卵母細胞は、追加の外科的リスクなしにIVF-ETまたはFPに使用できるようになりました。OP-IVMは、PCOS患者の卵巣掘削前に卵母細胞を取り出すために最初に使用されました。その適用はすぐに良性婦人科手術と癌または化学放射線療法を必要とする血管疾患患者を必要とする不妊患者に拡大した。転移の潜在的なリスクのために、OP-IVMは悪性腫瘍の患者に適さないか、または推奨されない。OP-IVMに基づいて、不妊患者と癌患者のFPのための卵銀行の新しい中国様式がこの機関で確立されました。
OP-IVMの場合、婦人科手術の緊急性と、より多くの卵母細胞を得る可能性の両方を考慮する必要があります。一般に、IVMの結果は、卵母細胞の検索中に得られた未熟な卵母細胞の数9と正の相関がある。優勢な卵胞は、周囲の小さな卵胞の成長を阻害し、アレジア10</s...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/61647">OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery</a>. The Protocol and Representative Results sections were&#160;updated.
Step 3.2 of the Protocol was updated from:
Add 0.5 mL of IVM&#160;medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
to:
Add 0.5 mL of IVM&#160;medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
The legend for Figure 2 was updated from:
Figure 2:&#160;Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.
to:
Figure 2:&#160;Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII&#160;stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/61647">OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery</a>. The Protocol and Representative Results sections were&#160;updated.

Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

IVMは、ヒト未熟卵母細胞がIVF-ETまたはFPの成熟に向けて体外で培養されるARTである。IVMでは、排卵誘導薬は使用されず、痛み、経済的負担、卵巣過剰刺激症候群(OHSS)1、2などの合併症を軽減する。また、IVMは、排卵誘導療法3を受けることができないか、または受け取る時間がない場合があるホルモン感受性患者の癌患者のFPおよび不妊治療に特に適している。したがって、取得した卵母細胞の数は、臨床妊娠率(CPR)、および出生率(LBR)がIVF4、5のそれよりも低いが、IVMは独自の利点を有する。
子宮内膜病変、水力不水圧、または卵巣嚢胞を有する不妊患者は、通常、ART治療の前に婦人科手術を受け、その卵母細胞は通常未熟である。OP-IVMは、ガイド付き経膣超音波を使用して未熟な卵母細胞を取り出し、IVF-ETまたはFP.OP-IVMの成熟まで体外で成長させ、卵母細胞の検索および婦人科手術後にIVMを組み合わせ、それによって制御された卵巣過剰刺激サイクルで一般的な合併症を軽減し、時間とお金を節約する。肥沃な患者にとって、OP-IVMは定期的な婦人科手術を受けながら「不妊保険」として機能する可能性があります。
さらに、電気焼灼6、7、卵巣腫瘍切除などの婦人科手術による損傷は、婦人科手術前に卵母細胞の検索によって減少する可能性がある。したがって、定期的な婦人科手術と比較して、OP-IVMは不妊治療中の手術の数を減らし、卵巣手術中の機能的卵母細胞の喪失を防ぐことができる。
以前の研究では、卵母細胞の検索の追加手順は、外科的合併症および不利な妊娠結果を増加させることも、入院を延長することもなく、8.一部の患者は、この方法の実現可能性を示すOP-IVM8を介して生きた出産を行った。本論文では、OP-IVMの恩恵を受ける可能性のある患者の特徴、およびOP-IVMの手順および重要な点について説明し、ヒト卵母細胞成熟度の評価について議論する。

<table><tbody><tr><td>19 G シングルルーメン吸引針</td><td>Cook, Australia</td><td>K-OPS-7035-REH-ET</td><td></td></tr><tr><td>4-well plate</td><td>Corning</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70 &mu;m ナイロンセルストレーナー</td><td>Falcon, USA</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>CO2 Incubator</td><td>Thermo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Culture oil</td><td>Vitrolife, Sweden</td><td>10029,OVOIL&nbsp;</td><td>ステップ 3.2.</td></tr><tr><td>FSHとLH</td><td>Ferring Reproductive Health、ドイツ</td><td>MENOPUR&reg;</td><td></td></tr><tr><td>ガラスパスツールピペット</td><td>Hilgenberg GmbH, Germany</td><td>3154102-26</td><td></td></tr><tr><td>G-MOPS medium</td><td></td><td></td><td>pH-stable handling medium for washing the needle before puncturing</td></tr><tr><td>IVM medium</td><td>Origio, Denmark</td><td>ART-1600-B</td><td></td></tr><tr><td>Laminar Flow Clean Benches</td><td>ESCO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Petri dish</td><td>Thermo Fisher Scientific, Denmark</td><td>263991</td><td></td></tr><tr><td>インキュベーター外の卵子や胚の取り扱いと操作をサポートするように設計されたpH安定ハンドリング培地</td><td>Vitrolife, Sweden</td><td>10130, G-MOPS PLUS</td><td>Step 7.1.</td></tr><tr><td>リンス液</td><td>クック オーストラリア</td><td>K-SIFB-100</td><td></td></tr><tr><td>ステレオスコープ</td><td>ニコン</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

op-ivm:卵母細胞検索後の体外成熟と婦人科手術の組み合わせ

OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

婦人科手術(OP-IVM)前のインビトロ成熟(IVM)の使用は、定期的な婦人科手術と卵母細胞の検索に続くIVMを組み合わせた従来のIVMの延長である。OP-IVMは、不妊治療(FP)または体外受精や胚移植(IVF-ET)などの不妊治療の必要性を有する良性婦人科手術を受けている患者に適しています。手術室では、良性婦人科手術を受けている患者は、最初に麻酔を受け、超音波誘導未熟卵性卵胞吸引(IMFA)治療を受ける。その後の婦人科手術が行われると、cumulus-oocyte複合体(COC)を検査し、未熟なCOCをIVM培地に移し、IVF実験室で28〜32時間培養する。評価後、MII段階の成熟卵母細胞を選択し、FP用の液体窒素中で凍結保存するか、IVF-ETの細胞質内精子注入(ICSI)によって受精する。IVMと婦人科手術を組み合わせることで、廃棄されたであろう未熟な卵母細胞を保存し、生殖補助技術(ART)に使用することができます。OP-IVM の手順、重要性、および重要な側面については、この記事で説明します。

2019年12月まで、OP-IVMは274人の患者の不妊治療保存に使用されました。2014年から2016年の間に158人の患者の胚学的および生殖結果が前の論文8に掲載された。次の例では、2016 年に OP-IVM を受信した PCOS 患者の手順について説明します。患者は原発性不妊症、左腺嚢胞、およびPCOSと診断された28歳である。彼女は9月28日に腹腔鏡下膀胱切除術とOP-IVMを受けました。27の未熟なカッコが得られた。28時間培養後、MIIステージで7個の卵母細胞を選択し、ICSIにより受精した。1日目の良質2プロ核(2PNs)と3日目の胚の数は、それぞれ6、6、2であった。5日目(2016年10月4日)に得られた胚盤胞を凍結した。2017年2月14日、1つの胚盤胞が解凍されました。この解凍した爆風は生きていて、2017年2月14日に子宮に移されました。血液ヒト絨毛性ゴナドトロピン(hCG)検査の結果は陽性であり、超音波検査では...

婦人科手術前のインビトロ成熟(IVM)は、卵母細胞の検索に続くIVMと日常的な婦人科手術を組み合わせ、不妊治療の保存のための従来のIVMアプリケーションの延長として機能します。

OP-IVM:卵母細胞検索後の体外成熟と婦人科手術の組み合わせ

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte ...

この技術OP-IVMは、卵母細胞の検索に続くIVMと日常的な婦人科手術を組み合わせた従来のIVMプロトコルの拡張です。それは、ART治療または不妊治療の前に婦人科手術を受ける必要がある不妊または不妊亜女性、腹腔鏡下卵巣穿孔手術を必要とするクロミフェン耐性を有する多嚢胞性卵巣症候群患者、子宮鏡下筋切除術、ポリペクトミー、経胸部開胸術などの良性婦人科手術を必要とする不妊患者および中胸部外科手術、および中胸部手術、および ART治療前の大腸嚢胞切除術、および化学放射線療法または放射線療法を受けている癌および血液疾患の患者は、不妊治療の保存のためにこの手術を行うことができます。超音波プローブを膣内に置いて、両方の卵巣の卵胞の数をスキャンして記録します。腸、膀胱、および大きな血管を避けて、穿刺部位として卵巣に最も近い場所を見つける。pH安定した取り扱い媒体で19ゲージの単一の内腔の吸引針を洗い、次に超音波の指導の下で卵巣に針を注入する。80〜90ミリメートルの水銀の圧力で針を持つ濾胞液を吸引し、針をわずかに回転させ、できるだけ多くの濾胞液を吸引する。ヘパリンを使用して、吸引中の濾胞液粘度を低下させます。プローブの位置を調整して、常に卵巣にできるだけ近づけ、膣の深膜を適切な力で押して、傷害と出血を軽減します。25~30分以内に濾胞性流体吸引を完了してください。一方の卵巣で仕上げ終えた針を引き出し、ハンドリング媒体で針を洗い、もう一方の側を同じ方法で穿刺する。37°Cのホモサーマルフラットで作業し、ハンドリングメディア、ペトリ皿、およびセルストレーナーを準備します。培養管とストレーナーを、あらかじめ温めたpH安定したハンドリング媒体でリンスします。70マイクロメートルのナイロンセルストレーナーで吸引した卵胞液をフィルターし、培養管とストレーナーを事前に温めたpH安定な取扱い媒体で繰り返しすすます。すべての未熟なCOCが完全に培養皿に移されることを確認します。きれいな取り扱い媒体に血液を移す。その後、セルストレーナーを新しい皿に移し、洗います。吸引し、新しい皿にCOC、顆粒球細胞およびティッシュと取り扱い媒体を移す。40倍の倍率でステレオスコープの下のCOCを調べます。未熟者を温めるIVM卵母細胞培地に素早く移します。次に、血栓と細胞ストレーナーのCOCを調べる。COCと取り扱いメディアを、温め込んだIVM卵子培地に転送します。5%の二酸化炭素と5%の酸素を含む加湿空気で摂氏37度で28〜32時間未熟なCOCを培養する。2019年12月までに、OP-IVMは274人の患者の不妊治療に使用されました。一例は、原発性不妊症、左腺嚢胞、およびPCOSと診断された28歳の患者であった。彼女は2016年9月に腹腔鏡下膀胱切除術とOP-IVMを受け、27の未熟なCOCCが得られた。培養28時間後、MIIステージで7つの卵母細胞が選択され、ICSIによって受精した。5日後、2つの胚盤胞が凍結した。1つは2017年2月に解凍され、子宮に移された。患者は11月に健康な女の子を出産した。OP-IVMは、卵巣掘削手術を受けているPCOSを持つ不妊女性の卵母細胞検索に最初に適用され、現在、その適用は、不妊治療の保存のための癌女性でさえ、良性の婦人科手術を受ける必要がある不妊女性に拡大することができます。これは、IVMのアプリケーション範囲は、女性の不妊治療の保存のための他の伝統的な婦人科の操作と組み合わせることによって拡大することができることを示しています。

op-ivm-combining-vitro-maturation-after-oocyte-retrieval-with

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

私たちは、Xenopus laevisの未熟卵子の操作方法、卵子の卵子へのin...

操作と<em&gt;インビトロ</emの&gt;成熟<em&gt;アフリカツメガエル</em細胞質内精子注入し&gt;卵母細胞、胚発生を研究するために

この原稿は、形態学的および生化学的に馬の卵母細胞を特徴付けるための実験的アプローチを記載している。具体的には、超音波誘導卵子ピックアップ（OPU）による未成熟および成熟ウマの卵母細胞の採取方法および染色体分離、紡錘体形態、全球ヒストンアセチル化およびmRNA発現を調べる方法を具体的に説明する。...

馬の卵母細胞における染色体分離、ヒストンアセチル化およびスピンドル形態の解析

開発初期段階で卵巣卵胞から卵母細胞を分離する手順と、完全に成長した段階までの成長と分化をサポートできるインビトロ培養システムのセットアップについて説明する。...

牛の初期のアンタル卵胞からの卵母細胞のための体外培養戦略

卵母細胞凍結保存は、思春期後の女性の不妊治療の保存のためのゴールドスタンダードとしていくつかの国際科学協会によって認識されています。適切な臨床および実験室戦略は、最大の有効性、効率、および不妊治療の安全性を保証します。...

卵母細胞ガラス化による不妊治療の保存:臨床および検査の視点

重度の卵巣機能障害患者に対する卵巣卵胞の薬物を含まないインビトロ活性化(IVA)の検査手順の詳細を提示する。この方法は、卵巣過剰刺激当たりの取得可能な卵母細胞の数を増加させ、それらの患者の生殖能力の保存に利益をもたらす可能性がある。...

重度卵巣機能障害患者における不妊治療の保存

専任チームは、メイヤー・ロキタンスキー・クスター・ハウザー患者に、腹腔鏡下膣形成術時に制御された卵巣刺激と卵母細胞の凍結保存を行うオプションを提供できます。...

マイヤー・ロキタンスキー・クスター・ハウザー症候群の治療のための膣形成術中の腹腔鏡下卵母細胞回収と凍結保存

ここでは、採卵後に卵丘-卵母細胞複合体の一部を迅速に除去して体外受精観察プロセスを迅速化し、顆粒膜細胞の除去に必要な時間を短縮し、外部要素への卵子の曝露を最小限に抑え、胚発生を妨げず、最終的に体外受精の検査手順の効率を向上させるための最適化された方法を紹介します。...

Cumulus-Oocyte Complexesの即時部分的除去:体外受精の迅速観察のための洗練されたアプローチ

このプロトコルは、体外受精手順から卵胞液、体細胞、未熟卵母細胞を分離および処理するための標準化された方法の概要を示し、高品質の分子および細胞分析を可能にします。これらのアプローチは、通常臨床ケアで廃棄される材料を使用した生殖能力、生殖老化、卵巣機能障害へのトランスレーショナル研究をサポートします。...

体 外 受精を受けている個人からのヒト卵胞液、卵胞体細胞、および未熟卵母細胞の収集

このプロトコルは、マウス卵母細胞の in vitro 成熟、 in vitro...

マウス卵母細胞の体外成熟、受精、着床前胚の培養

ここでは、小さな顕微手術の練習ステーションの設定方法と、非生物動物モデルを用いた顕微手術の訓練のためのシンプルで安価な方法を説明します。...

2非生物の動物モデルを組み合わせた顕微トレーニング方法：ステップバイステップ

学ぶOP-IVM技術による卵母細胞検索後の体外成熟と婦人科手術の組み合わせ方法。不妊・亜不妊女性や卵巣嚢胞症候群患者、がん治療前の生殖能力保存を必要とする患者への応用を含む。

OP-IVM:卵母細胞検索後の体外成熟と婦人科手術の組み合わせ

さらに動画を探す