2023年10月6日
これまでのところ、すべての主要な中枢神経系常在細胞タイプを同じマウスから同時に単離するためのプロトコルは、満たされていない需要です。プロトコルはneuroinflammationの間に複雑な細胞ネットワークを調査し、同時に必須のマウス数を減らすために素朴で、実験的な自己免疫の脳脊髄炎のマウスで適当なプロシージャを示す。
多発性硬化症などの自己免疫疾患における分子および細胞メカニズムを調査するために、再現性のある高度な細胞分離プロトコルの生成は満たされていないニーズです。中枢神経系に常在する細胞を単離・解析する現在の技術のほとんどは、1種類の細胞のみに焦点を絞ったり、出生後のマウスのみに焦点を絞ったりするなど、重大な欠点を示しています。1つのCNS複製からすべての主要なCNS常在細胞タイプを同時に単離するための現在のプロトコルは、健康なマウスおよび実験的自己免疫性脳脊髄炎のマウスに適用可能な、1つの単一細胞懸濁液からの複雑なニューロンネットワークおよび新しい炎症経路をex vivoで分析する可能性を提供します。
さらに、マウス数が減少する 健康なマウスとEAEマウスにおける4つの主要なCNS常在細胞タイプすべてを同時に分離するための当社のプロトコルは、新しい炎症経路を研究する研究グループにとって有用なツールとして使用でき、複雑な生体分子メカニズムと細胞ネットワークex vivoのより正確な分析を可能にします。私たちのプロトコルの助けを借りて答えることができる新しい科学的質問は、神経炎症、神経変性、寛解などの疾患経過のさまざまな段階でのEAEの動的な調査です。また、細胞間相互作用と生化学的経路は、個人レベルで研究することができます。
同様に、機能アッセイは培養細胞で実施できます。EAEの時点で1つの個々のCNSホモジネートからのマルチオミクス解析のためのEAEコースの動的研究に焦点を当てる予定です。
本研究では、単一のマウスから中枢神経系(CNS)の主要な常在細胞タイプをすべて同時に単離するための新しいプロトコルを提示します。この手法は、ナイーブモデルおよび実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)モデルの両方に適用可能です。本手法は、現在の細胞単離技術の限界を解消し、使用するマウスの数を最小限に抑えながら、神経炎症時の複雑な細胞間相互作用を研究することを目的としています。
成体EAEマウスから中枢神経系(CNS)に存在するすべての主要な細胞型を同時に単離することで、単一の実験で神経炎症メカニズムを包括的に解析することが可能になります。このアプローチは、動物の使用数を削減しつつ、高コンテンツのマルチオミックス解析を可能にし、神経免疫学ポートフォリオにおける初期探索およびターゲットバリデーションに直接的な影響を与えます。本プロトコルは、自己免疫性CNS疾患モデルにおけるパスウェイのデリスキングおよびトランスレーショナルバイオマーカー開発に対する予測の信頼性を高めます。
本プロトコルは、EAEマウスおよび健康なマウスから複数の細胞型を同時に解析することを可能にし、仮説駆動型研究と探索的研究の両方を支援することで、発見から前臨床に至る一連の流れへと統合されます。