Name: 神経膠芽腫のレーザー間質性温熱療法のための免疫適格マウスモデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-15T14:10:00.000+00:00
Duration: 9 min 10 s
Description: 学ぶレーザー間質性温熱療法（LITT）を用いた神経膠芽腫治療の最適化マウスモデル構築法。この技術は切除不能な脳腫瘍に対する治療効果評価と新規治療戦略の開発に不可欠である。

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<ol><li>Canadian Cancer Society. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Cancer+Statistics+2023%22">Cancer Statistics 2023</a>. , Canadian Cancer Statistics Advisory Committee in collaboration with the Canadian Cancer Society, Statistics Canada and the Public Health Agency of Canada. Toronto, ON. http://cancer.ca/Canadian-Cancer-Statistics-2023-EN (2023).</li>
<li>Glioblastoma Research Organization. Glioblastoma Research Organization. , 
 <a target="_blank" href="https://www.gbmresearch.org">https://www.gbmresearch.org</a> (2024).</li>
<li>Carpentier, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+thermal+therapy%3A+Real-time+MRI-guided+and+computer-controlled+procedures+for+metastatic+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Lasers+Surg+Med%22%5BJournal%5D)">Laser thermal therapy: Real-time MRI-guided and computer-controlled procedures for metastatic brain tumors.</a> Lasers Surg Med. 43 (10), 943-950 (2011).</li>
<li>Haddad, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+glioblastoma+for+the+evaluation+of+novel+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Neurooncol+Adv%22%5BJournal%5D)">Mouse models of glioblastoma for the evaluation of novel therapeutic strategies.</a> Neurooncol Adv. 3 (1), vdab100(2021).</li>
<li>Chokshi, C. R., Savage, N., Venugopal, C., Singh, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+patient-derived+xenograft+model+of+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">A patient-derived xenograft model of glioblastoma.</a> STAR Protoc. 1 (3), 100179(2020).</li>
<li>Alcaniz, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinically+relevant+glioblastoma+patient-derived+xenograft+models+to+guide+drug+development+and+identify+molecular+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Clinically relevant glioblastoma patient-derived xenograft models to guide drug development and identify molecular signatures.</a> Front Oncol. 13, 1129627(2023).</li>
<li>Muir, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+interstitial+thermal+therapy+for+newly+diagnosed+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Lasers+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Laser interstitial thermal therapy for newly diagnosed glioblastoma.</a> Lasers Med Sci. 37 (3), 1811-1820 (2022).</li>
<li>Muir, M., Traylor, J. I., Gadot, R., Patel, R., Prabhu, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeat+laser+interstitial+thermal+therapy+for+recurrent+primary+and+metastatic+intracranial+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Neurol+Int%22%5BJournal%5D)">Repeat laser interstitial thermal therapy for recurrent primary and metastatic intracranial tumors.</a> Surg Neurol Int. 13, 311(2022).</li>
<li>De Groot, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+laser+interstitial+thermal+therapy+%28LITT%29+for+newly+diagnosed+and+recurrent+IDH+wild-type+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Neurooncol+Adv%22%5BJournal%5D)">Efficacy of laser interstitial thermal therapy (LITT) for newly diagnosed and recurrent IDH wild-type glioblastoma.</a> Neurooncol Adv. 4 (1), vdac040(2022).</li>
<li>Holste, K. G., Orringer, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+interstitial+thermal+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurooncol+Adv%22%5BJournal%5D)">Laser interstitial thermal therapy.</a> Neurooncol Adv. 2 (1), vdz035(2020).</li>
<li>Leuthardt, E. C., Voigt, J., Kim, A. H., Sylvester, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-center+cost+analysis+of+treating+primary+and+metastatic+brain+cancers+with+either+brain+laser+interstitial+thermal+therapy+%28LITT%29+or+craniotomy%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacoecon+Open%22%5BJournal%5D)">A single-center cost analysis of treating primary and metastatic brain cancers with either brain laser interstitial thermal therapy (LITT) or craniotomy.</a> Pharmacoecon Open. 1 (1), 53-63 (2017).</li>
<li>Bastos, D. C. D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+local+control+of+brain+metastasis+treated+with+laser+interstitial+thermal+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Predictors of local control of brain metastasis treated with laser interstitial thermal therapy.</a> Neurosurgery. 87 (1), 112-122 (2020).</li>
<li>Darbinyan, A., Leelatian, N., Fomchenko, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+changes+associated+with+laser+interstitial+thermal+therapy+for+radiation+necrosis%3A+illustrative+cases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg+Case+Lessons%22%5BJournal%5D)">Histological changes associated with laser interstitial thermal therapy for radiation necrosis: illustrative cases.</a> J Neurosurg Case Lessons. 4 (1), CASE21373(2022).</li>
<li>Grant, G. A., Porter, B. E., Li, D., Barros Guinle, M. I., Kaur, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Approach%2C+complications%2C+and+outcomes+for+37+consecutive+pediatric+patients+undergoing+laser+ablation+for+medically+refractory+epilepsy+at+Stanford+Children%27s+Health%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Approach, complications, and outcomes for 37 consecutive pediatric patients undergoing laser ablation for medically refractory epilepsy at Stanford Children's Health.</a> J Neurosurg Pediatr. 33 (1), 1-11 (2023).</li>
<li>Ogasawara, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+interstitial+thermal+therapy+for+cerebral+cavernous+malformations%3A+A+systematic+review+of+indications%2C+safety%2C+and+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Laser interstitial thermal therapy for cerebral cavernous malformations: A systematic review of indications, safety, and outcomes.</a> World Neurosurg. 166, 279-287.e1 (2022).</li>
<li>Satzer, D., Mahavadi, A., Lacy, M., Grant, J. E., Warnke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+laser+anterior+capsulotomy+for+obsessive-compulsive+disorder%3A+lesion+size+and+tractography+correlate+with+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Interstitial laser anterior capsulotomy for obsessive-compulsive disorder: lesion size and tractography correlate with outcome.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 93 (3), 317-323 (2022).</li>
<li>Salehi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+enhancement+of+blood-brain+and+blood-tumor+barriers+permeability+by+laser+interstitial+thermal+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurooncol+Adv%22%5BJournal%5D)">Therapeutic enhancement of blood-brain and blood-tumor barriers permeability by laser interstitial thermal therapy.</a> Neurooncol Adv. 2 (1), vdaa071(2020).</li>
<li>Navarro, K. L., Huss, M., Smith, J. C., Sharp, P., Marx, J. O., Pacharinsak, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+anesthesia%3A+The+art+and+science%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Mouse anesthesia: The art and science.</a> ILAR J. 62 (1-2), 238-273 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>吸収スピア</td><td>FST</td><td>18105-01</td><td>止血スポンジ。</td></tr><tr><td>ADSON組織鉗子</td><td>FST</td><td>11006-12</td><td></td></tr><tr><td>C57BL / 6マウス</td><td>ジャクソン研究所</td><td>株#000664</td><td>6〜12週齢の男性と女性の</td></tr><tr><td>綿チップアプリケーター(6インチ)</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>72308</td><td></td></tr><tr><td>CT2A神経膠腫細胞株</td><td></td><td></td>は<td>、デューク大学のピーター・フェッチ博士から寛大に寄付されました。</td></tr><tr><td>Cultrex還元成長因子基底膜抽出物、PathClear</td><td>Biotechne、R&Dシステム</td><td>3433-010-01</td><td></td></tr><tr><td>DMEM / F-12、HEPES</td><td>Gibco、ThermoFisher Scientific</td><td>11330032</td><td></td></tr><tr><td>デュアルチャンバースライド&nbsp;</td><td>BIO-RAD</td><td>1450003</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes 2.0 mL</td><td>Eppendorf</td><td>22363352</td><td></td></tr><tr><td>Ethyl Alcohol Anhydrous</td><td>Greenfield Global</td><td>P016EAAN</td><td>ddH2O Fetal Bovine Serum で 70% に希釈</td></tr>、<tr><td>認定、カナダ</td><td>Gibco、ThermoFisher Scientific</td><td>12483020</td><td></td></tr><tr><td>Glad Press-n-Seal プラスチックラップ</td><td>Amazon.ca</td><td></td><td></td>12587704417</tr><tr><td>高速ドリル</td><td>Kopf Instruments</td><td>Model 1474</td><td></td></tr><tr><td>K &J熱電対温度計</td><td>オメガ</td><td>HH509R</td><td></td></tr><tr><td>メタカム (メロキシカム)</td> <td>WDDC</td><td>114424</td><td></td></tr><tr><td>マイクロインジェクションシリンジポンプ</td><td>WPI</td><td>UMP3T-1</td><td></td></tr><tr><td>マイクロリットルシリンジ (700シリーズ)</td> <td>ハミルトン</td><td>87908</td><td>カスタムニードルが利用可能です。急な針の斜角は正確な送達に役立ち、針の長さが短いと安定性に役立ちます。</td></tr><tr><td>ニードルドライバー/ニードルホルダー</td><td>FST</td><td>12500-12</td><td>作業スペースが限られているため、細い先端が最適ですが、ハンドルの好みに基づいて多くのスタイルが適しています。</td></tr><tr><td>Opixcare Plus 眼軟膏</td><td>WDDC</td><td>135941</td><td></td></tr><tr><td>リン酸緩衝生理食塩水 (10x)</td><td>Fisher バイオ試薬</td><td>BP399-4</td><td>ddH2O</td></tr><tr><td>Povidone-iodine</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>3955-16</td> Aliquat で 1 倍に希釈し、<td>綿チップのアプリケーターで使用するための小さなチューブに入れます。</td></tr><tr><td>生理食塩水(ノーマル)</td><td>WDDC</td><td>126588</td><td></td></tr><tr><td>メス、使い捨て(#15ブレード)</td><td>フェザー</td>フェ<td>ザーNO15</td><td></td></tr><tr><td>ハサミ、細かい外科用</td><td>FST</td><td>91460-11</td><td>細かい学生用ハサミ、アイリス、ボンがすべて適しています。</td></tr><tr><td>定位フレーム</td><td>Kopf Instruments</td><td>Model 940</td><td>デジタルディスプレイコンソールとマウスノーズコーンとイヤーバー付き。</td></tr><tr><td>定位シリンジホルダー</td><td>Kopf Instruments</td><td>Model 1772-F</td><td>インジェクションポンプを使用しない場合。</td></tr><tr><td>縫合糸 (5-0モノフィラメント)</td><td>Ethicon</td><td>MCP463G</td><td>Monocryl violet monofilament with reverse cutting tip</td></tr><tr><td>Syringe, 28 G&nbsp;(0.5mL)&nbsp;</td><td>BD</td><td>BD 329461</td><td>BD Lo-Dose U-100 インスリン注射器</td></tr><tr><td>TC20 自動セルカウンター</td><td>BIO-RAD</td><td>1450102</td><td></td></tr><tr><td>熱電対プローブ、細径 (タイプ K)</td><td>オメガ</td><td>TJM-CA316-IM025G-150</td><td></td></tr><tr><td>トリプシン-EDTA (0.25%)、フェノールレッド</td><td>Gibco、ThermoFisher Scientific</td><td>25200072</td><td></td></tr><tr><td>Vetbond by 3M、獣医組織接着剤&nbsp;</td><td>WDDC</td><td>126125</td><td></td></tr><tr><td>Wahl ピーナッツクリッパー</td><td>WDDC/Wahl</td><td>100963</td><td>メーカーから直接入手することもできます。</td></tr><tr><td>保温パッド</td><td>Bensen Medical</td><td>70308/121873</td><td>同様のアイテムであれば何でも使用できます。</td></tr><tr><td>Webcol アルコール調製</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>71005-20</td><td>アルコール調製ワイプ、2層、中型。</td></tr></tbody></table>

神経膠芽腫のレーザー間質性温熱療法のための免疫適格マウスモデル

An Immunocompetent Murine Model for Laser Interstitial Thermal Therapy of Glioblastoma

CT2A腫瘍移植とLITT治療の成功は、図4、 図5、 および図6に示すように、T2強調MRIを使用して特徴付けることができます。MR画像は、上記のプロトコルで概説されたシーケンスパラメータを使用して、17cmボアと直交マウスヘッドコイルを備えた7T無冷媒超伝導磁石を使用して取得されました。この方法を慎重に遵守すると、 図4に示すように、テイクレートが100%に近づき、腫瘍の局在が一貫しており、ほぼ球状の腫瘍形成が得られるはずです。これらの特性は、その後のLITT治療やさらなる分析のための最適な基盤を提供します。同様に、 図5に示すように、LITTアブレーションもサイズと位置の両方で一貫している必要があります。切除された組織の中心コアは、凝固性および液化性壊死で構成され、T2 強調 MRI で低強度 (つまり、黒) として簡単に視覚化されます。LITT治療の直後の数日間は、実施されたLITT治療にもよりますが、周術期浮腫に対応する病変内および病変の周囲に超高強度(すなわち、白い)領域が見られることも典型的です。 図6 は、このプロトコルを実行する際の悪い結果を示し、潜在的な落とし穴のいくつかを強調しています。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67381/67381fig04.jpg"> 
図4:理想的なCT2A腫瘍形成のT2強調冠状MR画像。 移植後12日目の3匹のC57BL/6マウス(A、 B、 C)の腫瘍形成の代表的な画像。白い矢印は腫瘍の境界を示します。一貫した腫瘍の位置とほぼ球形の形成に注目してください。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67381/67381fig04large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67381/67381fig05.jpg"> 
図5:理想的なLITTアブレーションのT2強調コロナMR画像(LITTの1日後)。 移植後 13 日目の 3 匹の C57BL/6 マウス (A、B、C) における LITT 腫瘍アブレーションの代表的な画像。壊死性病変コアのサイズと位置が一貫していることに注意してください。LITT前のMRIとLITTアブレーションを少し早めに実施することで、レーザーターゲティングに最適な腫瘍サイズと、治療後のエンドポイントを後から得る能力との間のより良いバランスが得られます。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67381/67381fig05large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67381/67381fig06.jpg"> 
図6:事前に最適化されたLITT治療のT2強調冠状MR画像。 3 匹の C57BL/6 マウス (A、B、C) を、プロトコルの最適化前に同一のレーザーパラメーターと定位ターゲットで処理した画像 (理想的ではない結果の例)。白い矢印は腫瘍の境界を示します。境界線で囲まれた領域は浮腫の領域を示しています。腫瘍の成長が均一でなく、レーザーアブレーションターゲティングが不十分であるため、組織損傷に一貫性がなくなるなど、大きなばらつきが見られます。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67381/67381fig06large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

Glioblastoma (GB), the most aggressive form of primary brain cancer, accounts for approximately half of all high-grade primary brain tumors in adults and ...

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Research

JoVE Journal

Cancer Research

がん研究

その後の3Dと頭蓋内注入インビボでの</emマウス神経膠腫の>生物発光イメージング

私たちは、ヌードマウスとその後シリアルの脳に人間の多形性膠芽腫細胞の正確な、定位注入のための統合方法を説​​明...

定位頭蓋内注入と<emインビボ&gt;</em多形性膠芽腫のマウスモデル系における腫瘍異種移植片の&gt;生物発光イメージング

浸潤性脳腫瘍である神経膠芽腫のマウスモデルから始めます。腫瘍周辺では、血液脳関門 (BBB) は無傷のままであり、内皮細胞は分子侵入を調節するタイトジャンクションを形成します。マウスには、レーザー光を照射するためのヘッドマウント光ファイバーが取り付けられています。低強度の赤外線レーザーを照射し、皮膚と頭蓋骨を貫通して脳に到達します。レーザーは脳細胞内の酸素分子を励起し、活性酸素種(ROS)を生成します。結果として生じる酸化ストレスはタイトジャンクションを破壊し、BBB透過性を高めます。BBB を通る体液の漏出により、脳細胞や血管を取り囲む間質液 (ISF)...

神経膠芽腫のマウスモデルへのリポソーム送達のためのレーザー誘発性血液脳関門破壊

出典: Clark, AJ, et al. 神経膠芽腫に対する免疫担当動物モデルの生物ルミネセンスイメージングJ. Vis.

神経膠芽腫に対する免疫担当マウスモデルの生物発光イメージング

我々は、腫瘍の成長の間の遊びで、通常の生物物理学的な制約を再現生体2光子顕微鏡用マウスにおける皮質同所神経膠芽腫モデルを確立している。腫瘍の上に頭蓋骨を交換慢性ガラス窓は、2光子顕微鏡による経時的な腫瘍進行のフォローアップを可能にします。...

同所神経膠芽腫モデルマウスは、脳実質細胞の物理的制約を維持し、生体内二光子顕微鏡に適し

GL261神経膠腫細胞は、神経膠芽腫の有用な免疫適格動物モデルを提供します。このプロトコルの目標は、in vivo 生物発光イメージングを使用して頭蓋内腫瘍の成長を監視するための適切な技術を実証し、腫瘍免疫学および神経膠芽腫を治療するための免疫療法アプローチを研究するためのルシフェラーゼ修飾 GL261...

神経膠芽腫のための免疫担当動物モデルの生物発光イメージング

レーザーマイクロディション(LMD)は、グリオーマの不均一性と侵入を媒介する経路を明らかにするために使用できる、敏感で再現性の高い技術です。ここでは、レーザーLMDを用いて、トランスクリプトーム解析を用いて、グリオーマ組織から離散領域を分離するための最適化されたプロトコルについて述べている。...

腫瘍性異種性、オンコストリーム、および浸潤の空間・分子特性解析のための神経膠腫部分領域のレーザー捕捉微小切除

ここでは、遺伝子操作されたモデルマウス腫瘍に由来する細胞の頭蓋内注射によって樹立されたGBMの前臨床同所性マウスモデルについて述べる。このモデルは、ヒトGBMの疾患の特徴を示しています。トランスレーショナル研究のために、マウス脳腫瘍は in vivoMRI および組織病理学によって追跡される。...

多形性膠芽腫の並進同所性モデル

このプロトコルは、固形腫瘍モデルにおける標的温熱療法に必要な技術と方法論を提示します。このアプローチは、腫瘍内に注入された金ナノロッドによる近赤外光の光熱変換を利用して、腫瘍微小環境内で局所的な加熱を誘導します。...

腫瘍内金ナノロッドによる近赤外光の光熱変換によるマウス腫瘍モデルにおける標的軽度温熱療法の誘導

このプロトコルの目的は、研究者に頭蓋内移植のための再現性の高い技術を提供することです。...

マウスにおける膠芽腫患者由来異種移植細胞株の立体定位頭蓋内移植

学ぶレーザー間質性温熱療法（LITT）を用いた神経膠芽腫治療の最適化マウスモデル構築法。この技術は切除不能な脳腫瘍に対する治療効果評価と新規治療戦略の開発に不可欠である。

神経膠芽腫のレーザー間質性温熱療法のための免疫適格マウスモデル

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