気化した大麻留出物を試験するための前臨床吸入モデルの開発

私たちは、従来の分子生物学技術と新しい計算技術を組み合わせて、吸入大麻 VAPE 製品が肺の生理学にどのような影響を与えるかを調査し、電子タバコが肺機能をどのように変化させるかについての洞察を得ます。大麻蒸気が大麻の煙と同様に肺上皮細胞の転写変化を誘発し、損傷を示唆することを示しました。また、特にビタミンE酢酸を含むTHC製品について、電子タバコ関連の肺損傷に関するメカニズムの洞察が明らかになりつつあります。THC 含有製品に関するほとんどの研究は、経口強制経口投与や注射などの非吸入方法に依存しており、貴重な洞察を提供しますが、通常の人間の使用とは異なります。私たちの目標は、吸入により生理学的に適切な方法で大麻曝露をモデル化することです。新しい大麻製品の効力は、投与に課題をもたらします。私たちは人間の使用パターンを模倣し、マウスに悪影響を与えることなく生理学的に関連する用量を達成したいと考えています。私たちは、行動に悪影響を与えることなく、生理学的に関連する用量のTHCをマウスに投与する標準化された曝露量を確立します。

[講師]まず、システムのすべてのコンポーネントを組み立てます。漏れを防ぐために、閉じたチューブをパフィングポンプのバッファーチャンバーに挿入します。システムの電源を入れ、ソフトウェアを起動します。実験セッションモジュールを選択します。新しい試験を選択して、新しい実験セッションを開始します。研究する実験グループと被験者を定義します。次に、希望する露光レジメンに一致する実験テンプレートを選択します。セッションのプロパティウィンドウで、オペレーターセクションに入力して、機器の使用状況を文書化します。キャリブレーションの場合は、ソフトウェアで目的のチャンネルを選択します。オペレーティングソフトウェアに記載されている手順に従います。次に、ソフトウェアで目的のポンプを選択します。オペレーティング・ソフトウェアの指示に従って、システム・フロー・テストを実行します。流れが回転計に向けられていることを確認します。実験を開始する準備ができていない場合は、データ記録を開始するプロンプトをすべてキャンセルします。動物の準備のために、雄と雌のC57 BL6を3日間かけて徐々に暴露システムに順応させます。順応を開始するには、各マウスを柔らかい拘束具に置きます。10分、20分、または30分の実験暴露に相当する時間、室内空気で毎分2リットルのバイアス気流を開始します。拘束具のメッシュコンポーネントを完全に格納します。次に、拘束具全体をマウスの前に保持し、マウスが自動的にプランジャーコンポーネントに入るようにします。プランジャー部分にマウスの鼻が見えることを確認します。バインダークリップをマウスのすぐ後ろに固定して、後方に移動しないようにします。異なる性別や遺伝子型のマウスを扱う場合は、色分けされたバインダークリップを使用してマウスを識別し、区別してください。6匹の拘束されたマウスをシステムの鼻のみの露光タワーに入れます。チャンバー内の十分な空気の流れを確保するために、室内の空気で毎分2リットルのバイアスフローを開始します。タスク ドッカーで、作成した電子タバコ プロファイルを右クリックし、[タスクのプロパティ] を選択します。パフ頻度で、毎分2パフのレジームで30秒など、希望のパフ間隔を入力します。変更を確認するプロンプトが表示されたら、[OK] をクリックします。セッションの最後にあるプロンプトに従って、パフ体制をテンプレートとして保存し、後で使用します。露出を開始する準備ができたら、変更した電子タバコのプロファイルをダブルクリックして開始します。タイマーを同時に開始して、露光時間を追跡します。10分間の曝露を維持し、パフの頻度を毎分1回、2回、4回に増やすことで、さまざまな強度をテストします。露光が終了したら、室内空気でバイアスフローを再開します。動物を拘束具から解放するには、まずバインダークリップを取り外します。メッシュをプランジャーに向かって完全に引っ込め、動物が自分で拘束具から抜け出せるようにします。必要に応じて、尻尾をそっと引っ張って後方への動きを促します。血清THC-COOH濃度は、1分間に1パフでTHC蒸気に10分、20分、および30分さらされると、時間依存的に有意に増加しました。10分間の曝露中にパフの頻度を増やすと、毎分1パフ、2パフ、4パフで血清THC-COOHレベルが用量依存的に上昇しました。THC蒸気に10分間1分間1分間1パフと1分に4パフで曝露されたマウスは、移動距離がそれぞれ0.29メートルと0.05メートルに短縮され、有意な低運動を示しました。