DNAバーコードを用いたマルチプレックス免疫蛍光イメージングによる、遺伝的に再プログラムされたマウス黒色腫のFFPE検体を解析

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2025年6月6日

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Sachin S. Surwase^*¹^,²^,³ , Xin Ming M. Zhou^*³^,⁴ , Kathryn M. Luly¹^,²^,³ , Qingfeng Zhu⁵^,⁶^,⁷ , Niki Talebian⁶ , Robert A. Anders⁵^,⁶^,⁷^,⁸^,⁹ , Jordan J. Green¹^,²^,³^,⁵^,⁸^,⁹^,¹⁰^,¹¹^,¹² , Stephany Y. Tzeng¹^,²^,³ , Joel C. Sunshine¹^,³^,⁴^,⁵^,⁶^,⁸^,⁹

¹Department of Biomedical Engineering, Johns Hopkins University, ²Translational Tissue Engineering Center, Johns Hopkins University, ³Johns Hopkins Translational ImmunoEngineering Center, Johns Hopkins University, ⁴Department of Dermatology, Johns Hopkins University, ⁵Department of Oncology, Johns Hopkins University, ⁶Department of Pathology, Johns Hopkins University, ⁷Convergence Institute, Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center Johns Hopkins University School of Medicine, ⁸Bloomberg Kimmel Institute for Cancer Immunotherapy, Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center, Johns Hopkins University School of Medicine, ⁹Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center, Johns Hopkins University School of Medicine, ¹⁰Institute for Nanobiotechnology, Johns Hopkins University, ¹¹Departments of Neurosurgery and Ophthalmology, Johns Hopkins University School of Medicine, ¹²Departments of Materials Science & Engineering and Chemical & Biomolecular Engineering, Johns Hopkins University

^* These authors contributed equally

このプロトコールは、マウスFFPE黒色腫組織のDNAバーコードベースのイメージングのためのマルチプレックス免疫蛍光抗体パネルを設計するためのステップバイステップガイドを提供します。また、マウスの黒色腫腫瘍免疫微小環境に対する空間的プロテオミクスの洞察を生成するためのオープンソースツールを使用した画像解析パイプラインについても説明します。

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DNAバーコードイメージング

空間プロテオミクス

抗体パネル設計

組織微小環境

画像解析パイプライン

細胞フェノタイピング

腫瘍微小環境

Chapters in this video

0:00

Introduction

1:21

Formalin-Fixed Paraffin-Embedded (FFPE) Tissue Staining and Imaging for Multiplex Analysis

4:37

Digital Pathology Analysis and Proteomics Data Normalization

8:34

Results

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