Name: Ovoに位置 患者由来急性リンパ芽球性白血病 (ALL) 細胞の異種移植 (PDX-ALL) (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T14:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: 学ぶ 患者由来急性リンパ芽球性白血病細胞のin ovo異種移植法。B細胞・T細胞系統のALL細胞を鶏胚血管に移植し、10日間で薬剤応答や病態進行を評価する迅速な前臨床スクリーニングモデルです。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+is+the+evidence+that+tumors+are+angiogenesis+dependent%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">What is the evidence that tumors are angiogenesis dependent.</a> J Natl Cancer Inst. 82 (1), 4-6 (1990).</li>
<li>Hagedorn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accessing+key+steps+of+human+tumor+progression+in+vivo+by+using+an+avian+embryo+model%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Accessing key steps of human tumor progression in vivo by using an avian embryo model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (5), 1643-1648 (2005).</li>
<li>Dumartin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Netrin-1+mediates+early+events+in+pancreatic+adenocarcinoma+progression%2C+acting+on+tumor+and+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Netrin-1 mediates early events in pancreatic adenocarcinoma progression, acting on tumor and endothelial cells.</a> Gastroenterology. 138 (5), 1595-1606 (2010).</li>
<li>Aguirre-Ghiso, J. A., Estrada, Y., Liu, D., Ossowski, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ERK+activity+as+a+determinant+of+tumor+growth+and+dormancy%3A+Regulation+by+p38%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">ERK activity as a determinant of tumor growth and dormancy: Regulation by p38.</a> Cancer Res. 63 (7), 1684-1695 (2003).</li>
<li>Baroni, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ribonomic+and+short+hairpin+RNA+gene+silencing+methods+to+explore+functional+gene+programs+associated+with+tumor+growth+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Ribonomic and short hairpin RNA gene silencing methods to explore functional gene programs associated with tumor growth arrest.</a> Methods Mol Biol. 383, 227-244 (2007).</li>
<li>Lopez-Rivera, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+nitric+oxide+synthase+drives+mTOR+pathway+activation+and+proliferation+of+human+melanoma+by+reversible+nitrosylation+of+TSC2%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Inducible nitric oxide synthase drives mTOR pathway activation and proliferation of human melanoma by reversible nitrosylation of TSC2.</a> Cancer Res. 74 (4), 1067-1078 (2014).</li>
<li>Balke, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+short-term+in+vivo+model+for+giant+cell+tumor+of+bone%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">A short-term in vivo model for giant cell tumor of bone.</a> BMC Cancer. 11, 241(2011).</li>
<li>Balke, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+characterization+of+osteosarcoma+growth+on+the+chick+chorioallantoic+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Res+Notes%22%5BJournal%5D)">Morphologic characterization of osteosarcoma growth on the chick chorioallantoic membrane.</a> BMC Res Notes. 3, 58(2010).</li>
<li>Sys, G. M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CAM-assay+as+a+xenograft+model+for+sarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">The CAM-assay as a xenograft model for sarcoma.</a> J Vis Exp. (77), e50522(2013).</li>
<li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Chick+Chorioallantoic+Membrane+%28CAM%29+assay+as+an+efficient+xenograft+model+of+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">The Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) assay as an efficient xenograft model of hepatocellular carcinoma.</a> J Vis Exp. (104), e52411(2015).</li>
<li>Pontel, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+lymphoblastic+leukemia+necessitates+GSH-dependent+ferroptosis+defenses+to+overcome+FSP1-epigenetic+silencing%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Acute lymphoblastic leukemia necessitates GSH-dependent ferroptosis defenses to overcome FSP1-epigenetic silencing.</a> Redox Biol. 102408, (2022).</li>
<li>Oriol, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcome+after+relapse+of+acute+lymphoblastic+leukemia+in+adult+patients+included+in+four+consecutive+risk-adapted+trials+by+the+PETHEMA+Study+Group%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Outcome after relapse of acute lymphoblastic leukemia in adult patients included in four consecutive risk-adapted trials by the PETHEMA Study Group.</a> Haematologica. 95 (4), 589-596 (2010).</li>
<li>Xin, Q., Chen, Z., Wei, W., Wu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+acute+lymphoblastic+leukemia%3A+Recapitulating+the+human+disease+to+evaluate+drug+efficacy+and+discover+therapeutic+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal models of acute lymphoblastic leukemia: Recapitulating the human disease to evaluate drug efficacy and discover therapeutic targets.</a> Biochem Pharmacol. 198, 114970(2022).</li>
<li>Gilmore, M. J., Prentice, H. G., Blacklock, H. A., Janossy, G., Hoffbrand, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+rapid+isolation+of+bone+marrow+mononuclear+cells+using+Ficoll-Metrizoate+and+the+IBM+2991+blood+cell+processor%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Haematol%22%5BJournal%5D)">A technique for rapid isolation of bone marrow mononuclear cells using Ficoll-Metrizoate and the IBM 2991 blood cell processor.</a> Br J Haematol. 50 (4), 619-626 (1982).</li>
<li>Boyer, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow+cytometry+to+estimate+leukemia+stem+cells+in+primary+acute+myeloid+leukemia+and+in+patient-derived+xenografts%2C+at+diagnosis+and+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Flow cytometry to estimate leukemia stem cells in primary acute myeloid leukemia and in patient-derived xenografts, at diagnosis and follow-up.</a> J Vis Exp. (133), e56976(2018).</li>
<li>Kang, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+loss-of-function+genetic+screening+identifies+opioid+receptor+mu1+as+a+key+regulator+of+L-asparaginase+resistance+in+pediatric+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Genome-wide loss-of-function genetic screening identifies opioid receptor mu1 as a key regulator of L-asparaginase resistance in pediatric acute lymphoblastic leukemia.</a> Oncogene. 36 (42), 5910-5913 (2017).</li>
<li>Lee, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HAP1+loss+confers+L-asparaginase+resistance+in+ALL+by+downregulating+the+calpain-1-Bid-caspase-3%2F12+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">HAP1 loss confers L-asparaginase resistance in ALL by downregulating the calpain-1-Bid-caspase-3/12 pathway.</a> Blood. 133 (20), 2222-2232 (2019).</li>
<li>Kalina, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EuroFlow+standardization+of+flow+cytometer+instrument+settings+and+immunophenotyping+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">EuroFlow standardization of flow cytometer instrument settings and immunophenotyping protocols.</a> Leukemia. 26 (9), 1986-2010 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>針 34 G</td><td>BDペリセーフ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Attune NxT フローサイトメーター</td><td>サーモフィッシャー</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BD Perisafeシリンジ(32 g)</td><td>BDペリセーフ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ウシ血清アルブミン(BSA)</td><td>ミリポアシグマ</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>細胞凍結培地</td><td>Gibco、サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>12648010</td><td></td></tr><tr><td>遠心分離機(Allegra X-22R 遠心分離機)</td><td>ベックマン・コールター&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>使い捨て手袋</td><td>Royal Touch300 ニトリル試験用手袋</td><td></td><td></td></tr><tr><td>解剖顕微鏡</td><td>ライカ MZ16FA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEMの</td><td>Gibco、サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>DMSOの</td><td>Invitrogen、サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>D12345</td><td></td></tr><tr><td>卵インキュベーター、Vevitts 120ローリングインキュベーター</td><td>ビクセストトレーディング株式会社</td><td></td><td></td></tr><tr><td>エチルアルコール(95%)</td><td>VWRインターナショナル</td><td>BDH1158-4LP</td><td></td></tr><tr><td>ウシ胎児血清 (FBS)</td><td>Gibco、サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>26140079</td><td></td></tr><tr><td>Ficoll ソリューション (Ficoll??パケプラス)</td><td>ミリポアシグマ</td><td>GE17-1440-02</td><td></td></tr><tr><td>FITC-CD10抗体</td><td>サンタクルーズバイオテック</td><td>sc-46656 フィトック</td><td></td></tr><tr><td>FITC-CD4抗体</td><td>サンタクルーズバイオテック</td><td>SC-19641 フィック</td><td></td></tr><tr><td>蛍光顕微鏡&nbsp;</td><td>ライカマイクロシステムズ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ハンドドリル(Dremel3000)</td><td>ボッシュ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HEK293T&nbsp;</td><td>ATCC、バージニア州、米国</td><td>CRL-3216</td><td></td></tr><tr><td>血球計算器</td><td>VWRインターナショナル、ハウザー・サイエンティフィック</td><td>15170-263</td><td></td></tr><tr><td>ブタ腸粘膜からのヘパリンナトリウム塩</td><td>ミリポアシグマ</td><td>H3149</td><td></td></tr><tr><td>ヘパリン化試験管</td><td>BDバキュテイナー&nbsp;</td><td>BD 366480</td><td></td></tr><tr><td>リポフェクタミン 3000</td><td>Invitrogen、サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>L3000008</td><td></td></tr><tr><td>マルチプレックスレンチウイルス力価キット(qPCRレンチウイルス力価キット)</td><td>アブム</td><td>LV900</td><td></td></tr><tr><td>NH4Cl(アンモニウムchloride_</td><td>ミリポアシグマ</td><td>A9434</td><td></td></tr><tr><td>オリンパスIX71倒立顕微鏡</td><td>オリンポス</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PE-CD19抗体</td><td>サンタクルーズバイオテック</td><td>sc-19650 PE</td><td></td></tr><tr><td>PE-CD8抗体</td><td>サンタクルーズバイオテック</td><td>sc-1177 PE</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン-ストレプトマイシン (10,000 U/mL)&nbsp;</td><td>Gibco、サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>リン酸緩衝生理食塩水(PBS)</td><td>シグマ</td><td>P3813</td><td></td></tr><tr><td>ピペット(容量調節可能)</td><td>エッペンドルフ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ピューロマイシン</td><td>Gibco、サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>A1113803</td><td></td></tr><tr><td>RPMI1640</td><td>Gibco、サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>スコッチチェロテープ</td><td>3メートル</td><td></td><td></td></tr><tr><td>滅菌6ウェルプレート</td><td>VWRインターナショナル、コーニング</td><td>22250-140</td><td></td></tr><tr><td>滅菌遠心分離管</td><td>Axygen Inc、コーニング</td><td>AXYMCT-150-CS</td><td></td></tr><tr><td>滅菌培養フラスコ(75T)</td><td>VWRインターナショナル</td><td>10062-872</td><td></td></tr><tr><td>滅菌ファルコンチューブ(15mL)</td><td>ザルシュテット</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>滅菌ファルコンチューブ(50mL)</td><td>ザルシュテット</td><td>62.547.254</td><td></td></tr><tr><td>滅菌フィルター(0.45&micro;m フィルター)</td><td>VWRインターナショナル</td><td>76778-974</td><td></td></tr><tr><td>滅菌鉗子</td><td>VWRインターナショナル</td><td>82027-404</td><td></td></tr><tr><td>滅菌スライドガラス</td><td>VWRインターナショナル</td><td>48300-031</td><td></td></tr><tr><td>滅菌ピペットチップ</td><td>VWRインターナショナル</td><td>76322-136, 76322-134, 76322-154</td><td></td></tr><tr><td>滅菌シリンジ</td><td>BDシリンジ</td><td>309628?</td><td></td></tr><tr><td>トリパンブルー</td><td>Invitrogen、サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>T10282</td><td></td></tr></tbody></table>

ovoに位置 患者由来急性リンパ芽球性白血病 (all) 細胞の異種移植 (pdx-all)

In Ovo Xenografting of Patient-Derived Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) Cells (PDX-ALL)

発生中のニワトリ胚におけるヒトALL細胞の生移植が成功したかどうかを判断するために、mCherryを運ぶ第2世代複製不能力レンチウイルスを増幅し、それらを使用してB-およびT-ALL細胞株、SEMおよびMOLT3をそれぞれ標識しました16,17。図1Aに示すように、B-(左上の2つのパネル)およびT-(右上の2つのパネル)ALL細胞の~50%をmCherryで標識しました。続いて、患者由来のB-(#1および#2)およびT-(#3および#4)ALL細胞もmCherryで標識されました(図1A、左下と右下の4つのパネルがそれぞれ)。mCherry標識ALL細胞を濃縮するためにピューロマイシンで処理した細胞を使用して、ヒトALL細胞の卵子異種移植を実施し、そのタイムラインを図2に概略的に示します。
<p...

Ovoに位置 患者由来急性リンパ芽球性白血病 (ALL) 細胞の異種移植 (PDX-ALL)

This study introduces a rapid, cost-effective, and efficient method for in ovo xenografting of patient-derived acute lymphoblastic leukemia (ALL) cells, ...

in-ovo-xenografting-patient-derived-acute-lymphoblastic-leukemia-all

Research

JoVE Journal

Cancer Research

がん研究

このビデオでは、ゼブラフィッシュ患者由来の異種移植モデルを作成する手法について説明しています。サンプルプロトコルでは、膵臓腫瘍異種移植モデルに対する薬剤ゲムシタビンとナビトクラクスの効率を評価します。...

ゼブラフィッシュ患者由来異種移植片(zPDX):がんモデル

ここで、サイトカイン形質導入間質細胞株の毎週腹腔内注射による患者由来異種移植（PDX）マウスにおける外因性サイトカインの産生方法を記載する。この方法は、PDXの有用性を広げ、多数のPDXモデルにおける一過性または持続性外因性サイトカイン送達の選択肢を提供する。...

サイトカイン形質導入ストローマ細胞株注入による患者由来異種移植片における外因性サイトカインの発現

フローサイトメトリーによる主な急性骨髄性白血病細胞白血病幹細胞マーカーの同時発現を検出するためのプロトコルの概要を説明します。3 前駆細胞集団と増加する成熟の程度と推定される LSC...

フローサイトメトリーを診断とフォローで主に急性骨髄性白血病、白血病幹細胞患者由来異種での見積もりに

同所性同種人間原発性脳腫瘍を運ぶ免疫不全マウスにおける準備と同種の人間のリンパ球の脳定位固定装置の管理のためのプロトコルを紹介します。本研究は、実現可能性と intrabrain...

同所性同種人間神経膠腫異種移植片のマウスモデルの細胞傷害性免疫細胞の定位の養子転送

このプロトコルは、幼虫ゼブラフィッシュを宿主として用いたウイルスベースの二重蛍光標識腫瘍異種移植片モデルにおける最適化手順について説明する。この異種異種異種移植片モデルは、生体内の膵臓癌微小環境の組織組成を模倣し、パーソナライズされたzPDX(ゼブラフィッシュ患者由来異種移植片)モデルにおける薬物応答を評価するためのより正確なツールとして機能する。...

比較薬評価の宿主としてゼブラフィッシュ幼虫を用いた膵臓癌の患者由来異種異種移植片モデル

ヒト末梢血単核細胞(PBMC)-翻訳免疫腫瘍学研究のためのヒトヒト異種移植片マウスモデルについて説明する。このプロトコルは、I-O療法評価のための同様のモデルを確立し、特徴付けるための一般的なガイドラインとして役立つ可能性があります。...

ヒト末梢血単核細胞(PBMC)移植型ヒト型異物移植モデル翻訳免疫腫瘍学(I-O)研究

ここでは、腫瘍のゲノム構成に基づいて選択された標的療法の有効性を試験するプロトコルを提示する。このプロトコルは、構造的DNA再構成の同定と検証、患者の腫瘍のマウスへの生着、および対応する薬物に対する応答のテストを記述する。...

構造DNA改変解析と患者由来異種移植片を用いたがんの標的治療の試験

ここでは、急性リンパ芽球性白血病患者由来の異種移植片モデルを、CD19標的キメラ抗原受容体T細胞関連毒性を評価および監視するための戦略として使用するプロトコルについて説明します。...

急性リンパ芽球性白血病患者由来異種移植マウスモデルを用いたキメラ抗原受容体T細胞関連毒性の評価

このプロトコールは、一過性免疫抑制ゼブラフィッシュ胚の細胞株および新鮮な患者材料からヒト急性リンパ芽球性白血病(ALL)異種移植片を作製およびトラブルシューティングするためのステップバイステップの手順と、フローサイトメトリーを使用した薬物反応評価のガイドラインを提供します。実験パイプラインは、固形腫瘍にも適応できます。...

ゼブラフィッシュ胚における白血病細胞移植片を用いた迅速な in vivo 薬物応答予測

このプロトコルは、マウスにおける乳がん患者由来異種移植片の同所性移植のための効率的な非外科的方法を説明しています。この技術には、酵素による腫瘍解離とそれに続く乳腺脂肪パッドへの直接注射が含まれ、ハイスループットの移植が可能になります。包括的な検証により、モデルの忠実度が確保され、さまざまな乳がんサブタイプにわたる厳密な研究が容易になります。...

乳がん患者由来異種移植片のハイスループット解離と同所性移植

ここでは、マウスに異種移植され、骨髄穿刺から得られた急性ヒト骨髄性白血病細胞におけるmTORC1、JAK/STAT5、およびMAPK経路の下流のシグナル伝達を分析するためのリン酸化流サイトメトリーベースの方法について説明します。p-STAT5、p-4EBP1、p-RPS6、p-ERK1/2の各レベルを、高感度の次世代スペクトルフローサイトメーターを用いて同時に測定します。...

急性骨髄性白血病患者由来異種移植の細胞内リン酸化流サイトメトリー

学ぶ 患者由来急性リンパ芽球性白血病細胞のin ovo異種移植法。B細胞・T細胞系統のALL細胞を鶏胚血管に移植し、10日間で薬剤応答や病態進行を評価する迅速な前臨床スクリーニングモデルです。

Ovoに位置患者由来急性リンパ芽球性白血病 (ALL) 細胞の異種移植 (PDX-ALL)

さらに動画を探す

Ovoに位置 患者由来急性リンパ芽球性白血病 (ALL) 細胞の異種移植 (PDX-ALL)

さらに動画を探す

Ovoに位置患者由来急性リンパ芽球性白血病 (ALL) 細胞の異種移植 (PDX-ALL)