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방법 논문

Murine 신장 이식 절차

30.4K 조회수

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DOI:

10.3791/1150

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2009년 7월 10일

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이 논문에서

요약

생쥐의 신장 이식은 성공을위한주의 이후 수술 진료와 치료를 필요로하는 기술적으로 도전적인 절차입니다.

초록

생쥐의 신장 이식 orthotopic은 기술적으로 도전적인 절차입니다. 생쥐에서 처음으로 신장 이식이 (1) 벌써 30 년 동안 러셀 외 수행하고 년후 장 외 (2)에 의해 정제했지만, 세계에서 몇 사람이 프로 시저를 마스터했습니다. 저희 연구실에서는 성공적으로> 90 % 생존율과 1200 orthotopic 신장 transplantations을 수행했습니다. 성공을위한 핵심 포인트는 두 절차 및 사후 이식하는 동안 reperfusion 상해, 출혈 및 혈전증의 엄격한 통제를 포함하고, anastomoses 대신 11-0 봉합사의 10-0 중 하나를 사용하십시오.

받는 사람의 포스트 수술 관리 및 치료 성공과 평가를 이식하기 위해 매우 중요합니다. 모든 신장 이식의 수신자는 즉시 페니실린의 주사 지속적으로 마시는 물 속에 포스트 이식과 sulfatrim의 형태로 항생제를받을 수 있습니다. 전체 동물의 건강은 매일 전체 혈액 크레아티닌 분석이 이식편 기능을 평가하기위한 휴대용 I - STAT 기계와 함께 정기적으로 수행 평가됩니다.

프로토콜

기증자 장기 적출 수술 (2) :

  1. 65mg/kg pentobarbital IP를 사용하여 기증자를 마취, 마취는 Isoflurane (2-3 %)에 의해 유지됩니다.
  2. 기증자 복부를 입력하고 오른쪽 옆으로 소장 이동하여 왼쪽 신장을 폭로 가슴에서 치골에 정중선 절개를합니다.
  3. 8-0 실크 봉합사와 부신과 고환 혈관 ligating과 나누어 왼쪽 신장을 분리.
  4. 신장 동맥과 정맥과의 접합 위의 대동맥을 준비 시켜라.
  5. 신장 동맥과 정맥과의 접합부 위 아래 하부 대정 맥 (IVC)을 동원.
  6. 출혈을 최소화하기 위해 8-0 실크 봉합사와 신장 동맥과 정맥 아래의 대동맥을 Ligate.
  7. 신장 hilum에서 방광 왼쪽 ureter을 해부하다.
  8. 방광 돔에서 caudad 철회를 사용하여 ureterovesical 접합을 폭로.
  9. 방광 - 투 - 방광 요도 문합를 통해 재건에 사용되는 왼쪽 ureterovesical 접합을 포함하는 방광의 엑사이스 작은 타원형의 패치. 오른쪽 ureter은 방광에 포함되어 있지 않습니다.
  10. 8-0 실크 봉합사와 신장 동맥과 정맥 아래 IVC를 Ligate.
  11. 신장 동맥과 정맥 위의 대동맥을....

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토론

우리는> 90 % 기술 성공률과 마우스에서 신장 이식의 약 1천2백가지 경우을 수행했습니다. 심장 이식에 비해 신장 이식의 성공률은 일반적으로 낮다. 그러나, 저희 연구실은 신장 이식의 높은 성공률을 (> 90%) 유지하고 있습니다. 성공을위한 핵심 포인트는 기증자의 신장과받는 사람 모두에게 reperfusion의 부상을 감소하고, 절차 및 사후 operatively 전역 출혈 및 혈전증을 최소화하는 것입니다. 다음과 같은 요인이 가장 중요한 수 있습니다 : (A) 수술하는 동안받는 사람의 피를 최대한 신중하고 부드러운 동작을 통해를 줄이고, (B) 기증 신장 준비와 수신자 이식하는 동안 따뜻한 허혈성 및 교차 클램핑 시간을 최소화하고, (C) 괴사, 불충 분한 혈액 공급 및 방광 유출 수술을 방지하기 위해 작은 기증자 방광 패치를 사용하여, 원래 신장의 (D) 지연 신 사까지 ~ 칠일 후 이식 이식 신장 수술 다음과 같은 기능을 복구할 수 있도록, (E ) 혈전증의 발생을 줄이기 위해 대동맥 밖 anastomose.......

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공개 사항

동물 실험은 오하이오 주립 대학 IACUC에 의해 명시된 지침과 규정에 따라 수행되었다.

감사의 글

이러한 연구 GAH에 NIH R01 AI36532에 의해 기금에 의해 부분적으로 지원되었다. 우리는 박사 Tibor Nadasdy에서 제공하는 이식 병리학의 뛰어난 지원을 인정하고,이 연구 노력을 시작으로 후반 박사 찰스 G. Orosz에서 제공하는 귀중한지도 데다가 것입니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
i-STAT기타HESKACat 5101
i-STAT 카트리지기타HESKACAT 5110-CREA
Sulfatrim기타ActavisR02109
Isoflurane기타NOVAPLUSCA-0474
10-0 봉합사수술SharpointAK0100

참고문헌

  1. Russell, P. S., Chase, C. M., Colvin, R. B., Plate, J. M. D. Kidney transplants in mice. An analysis of the immune status of mice bearing long-term, H-2 incompatible transplants. JExpMed. 147, 1449-1468 (1978).
  2. Zhang, Z., Schlachta, C., Duff, J., Stiller, C., Grant, D., Zhong, R.

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