Multielectrode 어레이 (MEA) 녹음 뉴런의 대규모 인구의 전기적 활동을 연구하는 방법을 제공합니다. 여기, 우리는 동시에 조직을 자극하는 동안 마우스 vomeronasal 상피에서 기록 MEA 준비의 세부 사항을 제시한다.
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이 논문에서
요약
초록
신경 회로를 이해하는 것은 방법이 동시에 여러 뉴런에서 기록해야합니다. 에
프로토콜
1 부. 전기 녹음 계측
- 우리는 실리콘 질화물과 절연 10 μm의 평면 티타늄 질화물 전극과 평면 multielectrode 배열을 (에이러 과학 악기)을 사용합니다. 60 전극 30 μm의 중심 - 투 - 중심 간격 5x6 격자로 이루어진 두 분야로 정렬됩니다. (다른 구성도 가능합니다, 직경 녹음 표면에 10 μm의와 전극은 단일 뉴런의 활동을 격리의 관점에서 큰 전극보다 수 있습니다.)
- 전기 신호는 MEA 1,060 앰프 (에이러 과학 악기)를 사용 (1000x 증폭) 증폭됩니다. 신호는 데이터 수집 카드 (내쇼날 인 스트 루먼트) 및 사용자 정의 데이터 수집 소프트웨어 (하나도 상용 소프트웨어를 구입할 수 있습니다)를 사용하여 10 kHz에서에서 찾았습니다.
- 조직은 MEA의 문화 관 반지 안쪽 snugly 맞는 사용자 정의 삽입에 연결된 나일론 메쉬 (53 μm의)에 의해 MEA 아래로 개최됩니다.
2 부. 액체 배달 계측
- 조직은 우리가 링어의 솔루션 (115 MM 나트륨 염화물, 5 MM 염화칼륨, 2 MM의 염화칼슘, 2 MM 마그네슘 염화물, 25 MM 나트륨 중탄산염, 10 MM HEPES, 10 MM D - (+를 제공하여 보증 지속 su....
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토론
Multielectrode 배열 레코딩은 우리에게 뉴런의 큰 인구의 동시 활동을 모니터링하는 능력을 허용합니다. 이것은 특히, VNO를 감각 시스템의 속성을 탐색을위한 유용한 도구입니다. 메인 후각 시스템과는 달리, VNO는 액상의 자극을 감지합니다. 또한, VNO는 이질적인 조직이다. 아마도 다른 응답 프로필 마우스 1 수용체의 약 300 종류가 있습니다. 로봇 팔을와 결합된 MEA 레코딩은 우리가 안정적으로 뉴런과 electrophysiologically 정체성 응답의 크고 다양한 인구 액체 자극을 제공할 수 있습니다. 또한, 체외에서 VNO의 안정성은 자극의 여러 반복을위한 시간을 허용합니다.
이전,이 기술은뿐만 아니라 소변 3 현재 각 리간드를 확인하는 신뢰할 수있는 분석의 역할로 2 마우스 소변에 대응 VSNs의 감각 특성을 조사하기 위해 사용되고 있습니다. 앞으로이 기술은 고도로 추가 리간드.......
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감사의 글
우리는 성령 연구소의 회원을 감사드립니다. 이 작품은 청각 및 통신 장애에 대한 국립 연구소 (R01 DC005964로)와 NSF IGERT 0548890 (하)에 의해 지원되었다.
동물 실험은 미국 동물 복지 행위 및 건강 지침 국립 연구소에 따라 수행되었으며 워싱턴 대학 동물 케어 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다.
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참고문헌
- Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
- Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
- Nodari, F.
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재인쇄 및 허가
